Un sistema di coltura di organi intestinali ex vivo per studiare le interazioni ospite-microbiota

Per studiare le interazioni tra l'ospite e il microbiota intestinale ex vivo, iniziare con un tessuto murino del colon privo di specifici batteri colonizzatori intestinali. Sciacquare il fazzoletto con un terreno per rimuovere le feci e trasferirlo in una piastra a più pozzetti contenente un terreno adatto.

Contemporaneamente, assemblare il dispositivo di coltura di organi intestinali ex vivo a più pozzetti.

Ogni pozzetto del dispositivo comprende due porte di ingresso e uscita accoppiate: la prima si collega al lume del colon e la seconda fornisce una fornitura continua di terreno ai pozzetti per mantenere la vitalità dei tessuti.

Trasferire il fazzoletto sul dispositivo. Collegare le estremità prossimale e distale del colon alla prima coppia di porte di ingresso e uscita. Avviare il flusso di stimolante luminale nel lume del colon e il flusso medio nel pozzo.

Lo stimolante contiene batteri colonizzatori intestinali che secernono enzimi che degradano lo strato di muco, consentendo loro di legarsi alle cellule epiteliali sottostanti. Questo attiva una cascata di segnalazione che innesca le cellule dendritiche residenti a estendere i loro dendriti tra le cellule epiteliali, catturan