JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:08 min. • July 8th, 2025
Dopo l'interazione con stimolanti infiammatori, le cellule immunitarie rilasciano molecole di segnalazione infiammatoria - citochine - per produrre una risposta immunitaria.
Per analizzare l'effetto dei preparati a base di prodotti del tabacco, TPP, prelevare una piastra a più pozzetti con concentrazioni crescenti di TPP. Seminare la piastra con cellule mononucleate del sangue periferico umano, PBMC contenenti cellule immunitarie.
La nicotina, un agente immunosoppressore nei TPP, si lega ai recettori nicotinici dell'acetilcolina, riducendo la produzione di citochine pro-infiammatorie. Questa sottoregolazione è dose-dipendente, con concentrazioni più elevate che hanno un effetto più significativo.
Centrifugare per pellettare le celle ed eliminare il surnatante contenente residui di TPP.
Risospendere le cellule in un mezzo completo e aggiungere una miscela contenente lipopolisaccaride, uno stimolatore immunitario, e GolgiPlug, un inibitore del trasporto proteico.
Le molecole di lipopolisaccaridi interagiscono con le cellule immunitarie contenenti il recettore toll-like-4, innescando vie di segnalazione intracellulari e la produzione di citochine pro-infiammatorie. Nel frattempo, le m
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