Uccisione delle cellule K562 da parte delle cellule mononucleate del sangue periferico esposte a preparazioni di prodotti del tabacco

Le cellule tumorali attivano le cellule immunitarie effettrici per rilasciare citochine e granuli citolitici contenenti perforina e granzimi. La perforina forma pori nella membrana cellulare tumorale, facilitando l'ingresso del granzima nella cellula e avviando l'apoptosi, causando la morte cellulare.

Per analizzare la funzione citolitica delle cellule mononucleate del sangue periferico umano, le PBMC, dopo la preparazione del prodotto del tabacco, TPP, esposizione, prelevare una piastra multipozzetto con concentrazioni crescenti di TPP. Un pozzetto contenente il fluido funge da controllo.

Aggiungere la sospensione PBMC. L'agente immunosoppressore primario dei TPP, la nicotina, si lega ai recettori nicotinici dell'acetilcolina delle PBMC, sottoregolando la produzione di citochine pro-infiammatorie.

centrifuga. Rimuovere il surnatante contenente TPP. Risospendere le PBMC nel supporto. Aggiungere ai pozzetti cellule K562 marcate in fluorescenza, cellule leucemiche umane che hanno una maggiore suscettibilità alla citotossicità delle cellule effettrici PBMC.

Le

cellule effettrici trattate con TPP con risposte immunitarie soppresse mostrano una ridotta espressione di perforina e rilasci