JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:12 min. • July 8th, 2025
Per studiare l'impatto degli antimicrobici sugli aggregati batterici, prendere la coltura di Pseudomonas aeruginosa in un terreno di coltura che promuove la formazione di aggregati, simulando la crescita durante l'infezione.
I batteri ingegnerizzati esprimono una proteina fluorescente per la rilevazione degli aggregati al microscopio a fluorescenza. Immagine in tre dimensioni per calcolare il volume degli aggregati, o la biomassa batterica, e visualizzare l'aumento della biomassa nel tempo, indicando la crescita batterica.
Aggiungi la colistina, un peptide antimicrobico cationico, a una concentrazione subletale che uccide i batteri sensibili selezionando quelli tolleranti agli antibiotici.
La colistina si lega ai lipopolisaccaridi caricati negativamente, o LPS, sulla membrana esterna batterica, spostando i ponti cationici che stabilizzano il monostrato LPS, danneggiando l'integrità della membrana.
La colistina entra nel periplasma e si lega all'LPS sulla membrana cellulare, interrompendo la membrana e provocando la lisi cellulare. Come contromeccanismo, specifiche mutazioni genetiche in un sottogruppo di batteri neutralizzano la carica negativa di LPS. Questa modifica inibisce l'in
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