JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:23 min. • July 8th, 2025
Il virus della Drosophila C, o DCV, un virus a RNA a filamento singolo positivo, infetta comunemente la Drosophila melanogaster.
Durante l'infezione, il DCV utilizza il macchinario della cellula ospite per replicare il genoma virale, producendo infine particelle virali. Le cellule infette mostrano effetti citopatici, CPE, e vanno incontro a lisi o muoiono senza lisi a causa della loro incapacità di dividersi.
Per determinare la dose infettiva media di coltura tissutale virale, la concentrazione di DCV alla quale metà delle cellule infette mostra CPE, iniziare con sospensioni di DCV diluite in serie.
Trasferimento in una piastra multipozzetto contenente cellule semiaderenti di Drosophila S2* derivate da embrioni in fase avanzata di Drosophila melanogaster, un ospite naturale di DCV. I pozzetti contenenti terreno e cellule fungono da controlli negativi.
Incubare affinché il virus infetti le cellule. Le cellule infettate da virus mostrano CPE attraverso il danno cellulare e la morte. Dopo l'incubazione, osservare i pozzetti al microscopio.
Identifica i pozzetti positivi e negativi per CPE attraverso le diluizioni. Utilizzare un metodo adeguato per determinare la dose media di DCV in c
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