JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:32 min. • July 8th, 2025
Iniziare con una piastra a più pozzetti contenente neutrofili marcati in fluorescenza e trattarli con siero del paziente contenente anticorpi citoplasmatici anti-neutrofili.
Questi anticorpi interagiscono con i recettori Fc dei neutrofili, attivando una via di segnalazione, producendo specie reattive dell'ossigeno o ROS e attivando la peptidil arginina deiminasi.
I ROS provocano la degranulazione dei neutrofili, rilasciando enzimi - elastasi e mieloperossidasi nel citoplasma. Questi enzimi e la peptidil arginina deiminasi attivata traslocano nel nucleo.
L'elastasi scinde l'istone-H1 e la mieloperossidasi modifica gli istoni, avviando la decondensazione della cromatina. La peptidil arginina deiminasi attivata induce citrullinazione degli istoni, convertendo i residui di arginina in citrullina e contribuendo a un'ulteriore decondensazione.
La cromatina decondensata si mescola con proteine intracellulari, comprese le proteine antimicrobiche e citoplasmatiche. Successivamente, la membrana del neutrofilo si disintegra, rilasciando cromatina decondensata mescolata con proteine citoplasmatiche nello spazio extracellulare, formando una trappola extracellulare per neutrofili, NET.
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