JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:28 min. • July 8th, 2025
Prendi un sistema di infezione a due camere separato da un inserto a membrana permeabile. Il compartimento inferiore contiene cheratinociti umani aderenti, o cellule della pelle.
Aggiungere agenti patogeni batterici nella camera superiore e incubare. La membrana impedisce il contatto diretto degli agenti patogeni con i cheratinociti. Gli agenti patogeni secernono streptolisina S o SLS – una piccola tossina – che attraversa la membrana per raggiungere le cellule.
Il co-trasportatore del bicarbonato di sodio sui cheratinociti media l'afflusso di bicarbonato e ioni sodio, mantenendo il pH intracellulare. SLS si lega al co-trasportatore e interrompe il trasporto ionico, portando a stress osmotico intracellulare.
La segnalazione a valle indotta dallo stress provoca la degradazione dell'inibitore legato al fattore nucleare sequestrato-Kappa B, o NF-κB, portando alla sua attivazione. L'NF-κB attivato trasloca nel nucleo, portando alla sovraregolazione della produzione di citochine pro-infiammatorie.
Dopo la secrezione extracellulare, le citochine si legano ai recettori di morte sulla cellula ospite, avviando la necrosi. Dopo l'incubazione, prelevare il surnatante di coltura per valutare l
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