Una tecnica per valutare la localizzazione in vivo di anticorpi specifici per il tumore
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:13 min. • July 8th, 2025
Prendi una sospensione di cellule di cancro ovarico umano. Aggiungere un mezzo di matrice a membrana basale e tenere sul ghiaccio per evitare la formazione di gel.
Caricare la miscela in una siringa e iniettarla per via sottocutanea in un topo nudo atimico. Rimuovere l'ago una volta che la matrice subisce la gelificazione, impedendo l'espulsione della miscela.
La mancanza di una risposta immunitaria nel topo immunodeficiente preserva la vitalità delle cellule iniettate. Le proteine della matrice extracellulare e i fattori di crescita del gel forniscono segnali che promuovono la crescita, facilitando la formazione del tumore.
Le cellule tumorali sovraesprimono il recettore alfa-1 dei folati legato in superficie, o FOLR1.
Assumere anticorpi specifici per FOLR1. Aggiungere un colorante fluorescente e incubare, consentendo la coniugazione del colorante con gli anticorpi.
Iniettare per via endovenosa gli anticorpi marcati nel topo anestetizzato portatore di tumore.
Gli anticorpi raggiungono il tumore attraverso la circolazione e si legano a FOLR1 sulle cellule tumorali, marcando in modo fluorescente la superficie cellulare.
Eseguire l'imaging a fluorescenza in vivo. Dopo l'eccitazione,
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