Valutazione della topologia immunologica delle sinapsi attraverso l'imaging di cellule vive

Prendi una capsula da microscopio con tampone contenente cellule endoteliali umane trasfettate e trattate con superantigene, con i superantigeni complessati a molecole MHC di classe II.

Queste cellule artificiali presentanti l'antigene co-esprimono diverse proteine fluorescenti sulle loro membrane e sul citoplasma.

Successivamente, introdurre i linfociti T, che interagiscono con i superantigeni sulle cellule endoteliali tramite i recettori delle cellule T, formando una giunzione cellula-cellula stabile, una sinapsi immunologica.

Ciò innesca il riarrangiamento del citoscheletro dei linfociti T, avviando la diffusione cellulare e l'estensione dell'actina, con conseguente formazione di protrusioni simili all'invasoma, o ILP, arricchite con actina, adesione e molecole di segnalazione.

Le molecole di adesione legano specifici recettori sulle cellule endoteliali, rafforzando l'interazione.

La

formazione di sinapsi attiva le vie di segnalazione dei linfociti T, aumentando i livelli intracellulari di calcio e stabilizzando le ILP.

Le ILP inducono una flessione localizzata della membrana nelle cellule endoteliali, formando anelli superficiali transitori.

Al microscopio a fluorescenza, anali