Una tecnica in vivo per tracciare il traffico di cellule T indotte da anticorpi bispecifici nei tumori

Prendi un topo anestetizzato e immunocompromesso che porta uno xenotrapianto tumorale sottocutaneo che sovraesprime un antigene associato al tumore o TAA.

Iniettare retroorbitalmente le cellule T effettrici che esprimono l'enzima luciferasi.

Somministrare per via sottocutanea l'interleuchina 2, una citochina che supporta la sopravvivenza delle cellule T effettrici.

Iniettare retroorbitalmente anticorpi bispecifici ingegnerizzati per contenere i siti di legame per le cellule T e tumorali. Consenti al mouse di riprendersi.

Gli anticorpi e le cellule T raggiungono il tumore attraverso la circolazione.

Gli anticorpi si legano al CD3 sulle cellule T e al TAA sulle cellule tumorali, inducendo le cellule T effettrici a rilasciare tossine che avviano l'apoptosi nelle cellule tumorali e rilasciano chemochine che reclutano più cellule T nel tumore.

Anestetizzare il topo, iniettare retroorbitalmente un substrato di luciferasi e procedere all'imaging in vivo.

La luciferasi all'interno delle cellule T ossida il substrato, emettendo bioluminescenza.

Osservare la bioluminescenza nel tempo. L'entità del segnale è correlata all'entità dell'infiltrazione delle cellule T all'interno del tumore.

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