Utilizzo di un test ELISA a sandwich per determinare il contenuto di glicoproteine immunogeniche in un vaccino

0 visualizzazioni • 5:42 min. • July 8th, 2025

Iniziare con una piastra del test passivata rivestita con anticorpi monoclonali specifici per la glicoproteina immunogenica antirabbica e un agente bloccante per prevenire interazioni non specifiche.

Introdurre vaccini di riferimento diluiti in serie e testare vaccini antirabbici con contenuto di glicoproteine decrescente. Sigillare la piastra per evitare contaminazioni.

Durante l'incubazione, le glicoproteine immunogeniche interagiscono con gli anticorpi monoclonali rivestiti attraverso uno specifico sito antigenico.

Dopo l'incubazione, rimuovere la pellicola, aspirare il surnatante e lavare la piastra.

Sovrapposizione con anticorpi monoclonali specifici per glicoproteina coniugati con enzimi che si legano a un diverso sito antigenico sulla glicoproteina, formando un immunocomplesso.

Aggiungere una soluzione contenente un substrato e un cromogeno. Quando il substrato interagisce con l'enzima, provoca l'ossidazione del cromogeno, cambiando il colore della soluzione.

Aggiungere una soluzione di arresto per inattivare gli enzimi.

Misurare l'assorbanza e generare una curva di riferimento utilizzando i valori di riferimento del vaccino.

Identificare la regione in cui esiste una relazio

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