Un sistema di rilevazione basato su cartuccia microfluidica per l'immunoglobulina E allergene-specifica
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:31 min. • July 8th, 2025
Iniziare con una cartuccia microfluidica dotata di serbatoi di stoccaggio e pompe unidirezionali che erogano i reagenti attraverso canali in una zona di reazione.
La zona di reazione contiene più punti immobilizzati con allergeni distinti.
Caricare il tampone di lavaggio, il tampone bloccante, gli anticorpi secondari coniugati con perossidasi e un substrato di perossidasi chemiluminescente negli appositi serbatoi.
Aggiungere un campione di siero contenente immunoglobuline E o IgE allergene-specifiche.
Avviare l'analisi all'interno di un analizzatore a chemiluminescenza.
All'interno della zona di reazione, il buffer di blocco scorre e blocca i siti di interazione non specifici.
L'introduzione del siero permette alle IgE di interagire con gli allergeni immobilizzati.
Il lavaggio elimina le IgE non legate.
Successivamente, gli anticorpi secondari coniugati con la perossidasi fluiscono e interagiscono con le IgE immobilizzate.
Il lavaggio successivo rimuove gli anticorpi non legati.
L'analizzatore introduce quindi il substrato chemiluminescente e il perossido di idrogeno.
La perossidasi ossida il substrato, emettendo luminescenza.
L'intensità della luminescenza in ogni punto fornisce u
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