Miglioramento della trasduzione virale nelle cellule natural killer utilizzando un polimero cationico

Prendiamo le cellule natural killer, o NK. Aggiungi vettori lentivirali che comprendono enzimi virali e molecole di RNA ingegnerizzate che codificano una proteina fluorescente.

Aggiungi polimeri cationici e sedimenta le cellule e i virus.

I polimeri neutralizzano le cariche negative sia sul virus che sulla cellula, facilitando la fusione della membrana.

L'RNA viene trascritto inversamente in DNA e integrato nel genoma dell'ospite, consentendo l'espressione della proteina fluorescente.

Aggiungere terreni integrati con la citochina interleuchina-2, o IL-2.

L'IL-2 innesca la segnalazione intracellulare che promuove la sopravvivenza e la proliferazione delle cellule NK, preservando l'espressione transgenica.

Trasferire la miscela in un pozzetto rivestito con anticorpi che si legano a specifici immunorecettori sulle cellule NK, innescandole a rilasciare citochine antivirali.

Quantificare le citochine rilasciate per valutare l'impatto del polimero sulla produzione di citochine.

Aggiungere coloranti fluorescenti per marcare il DNA delle cellule necrotiche.

Utilizzando la citometria a flusso, identificare le cellule vive e quantificare il segnale della proteina fluorescente per misurare l'