Un modello in vitro per lo studio dell'attraversamento patogeno della barriera emato-encefalica e dell'infezione delle cellule cerebrali
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:41 min. • July 8th, 2025
Prendi un modello in vitro di barriera emato-encefalica, o BEE, che comprende due compartimenti separati da una membrana porosa.
Il compartimento superiore o luminale contiene cellule endoteliali microvascolari. Queste cellule esprimono giunzioni strette, imitando l'endotelio della barriera emato-encefalica che limita il passaggio di cellule e molecole.
Il compartimento inferiore o abluminale contiene neuroni, astrociti e microglia, che rappresentano il parenchima cerebrale.
Introdurre un virus neurotropo nel compartimento luminale per simulare un'infezione trasmessa per via ematica e incubare.
Il virus viene endocitoizzato dalle cellule endoteliali, subisce un traffico intracellulare all'interno delle vescicole e viene rilasciato sul lato abluminale.
Dopo l'incubazione, rimuovere la camera superiore. Campionare il terreno dal lato abluminale per valutare la quantità virale, confermando il successo dell'attraversamento dello strato endoteliale.
Aggiungere il terreno fresco e incubare di nuovo.
Il virus entra nelle cellule neurali attraverso l'endocitosi, si replica e rilascia la progenie virale.
Quantificare l'aumento della carica virale extracellulare per confermare la neuroinvasi
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