JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
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Prendi un apparecchio di perfusione cardiaca collegato a un sistema di acquisizione dati.
Posiziona un catetere multi-elettrodo sia per la stimolazione elettrica che per il monitoraggio del ritmo cardiaco.
Prendi un cuore di topo con una cannula inserita nell'aorta e collegalo all'apparato.
Perfondi il cuore con un tampone di perfusione ossigenato per imitare la circolazione fisiologica.
Inserisci il catetere nell'atrio e nel ventricolo destro.
Il sistema di conduzione cardiaca, composto da cellule pacemaker e fibre di conduzione, coordina la contrazione sincronizzata delle camere cardiache.
Applica la stimolazione elettrica attraverso il catetere per stabilizzare le condizioni elettrofisiologiche del cuore.
Chiudi la camera per mantenere una temperatura stabile.
Applica una stimolazione controllata per misurare l'attività cardiaca di base.
Successivamente, aumenta la frequenza di stimolazione per superare il ritmo normale del cuore, innescando ritmi irregolari che hanno origine nei ventricoli, noti come aritmia ventricolare.
Dopo la stimolazione, il ritorno del cuore a un ritmo normale suggerisce resistenza all'aritmia, mentre ritmi anomali continui indicano suscettibilità.
Inizia avviando il bagno d'acqua e inserendo la soluzione di perfusione, inclusa una miscela di ossigeno al 95% e anidride carbonica al 5%. Quindi regolare la velocità della pompa prima di collegare il cuore in modo che non rimangano bolle d'aria nella cannula durante il montaggio sull'apparecchio. Impostare la pressione di perfusione target su 80 millimetri di mercurio nelle impostazioni generali e avviare la registrazione.
Utilizzare un catetere elettrofisiologico con elettrodi in platino e una superficie dell'elettrodo di 0,5 x 0,5 millimetri, con una distanza tra gli elettrodi di 0,5 millimetri per la registrazione dei dati e la stimolazione con un generatore di stimolo digitale designato. Quindi, posizionare il catetere vicino all'area in cui verrà posizionato il cuore dopo l'attacco all'apparato. Quindi, collegare rapidamente la cannula all'apparecchio Langendorff e assicurarsi che non rimangano bolle nella cannula. Portare la pressione di perfusione a 80 millimetri di mercurio, consentendo una perfusione a pressione costante.
Inserire con cautela il catetere nell'atrio destro e nel ventricolo destro senza toccare o danneggiare il cuore e collegare il catetere alla cannula con del nastro adesivo. Quindi, iniziare la stimolazione con la durata del ciclo preparata di 100 millisecondi per un periodo iniziale di equilibrio di 20 minuti. Infine, chiudere la camera per consentire una temperatura stabile.
Iniziare applicando una stimolazione programmata tramite gli elettrodi distali o prossimali del catetere al doppio della soglia di stimolazione atriale o ventricolare per valutare i parametri elettrofisiologici. Quindi, eseguire una stimolazione extra programmata o protocolli di burst pacing in linea con le convenzioni di lambeth per valutare la genesi dell'aritmia ventricolare.