Imaging a bioluminescenza in un modello murino EAE
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:27 min. • May 29th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato con encefalomielite autoimmune sperimentale o EAE. Questa condizione provoca infiammazione agli occhi e al cervello.
Posizionare il mouse in un apparecchio di imaging, allineando la parte superiore della schiena al centro.
Coprire la parte inferiore del mouse con un panno nero per evitare interferenze di segnale da questa regione.
Utilizzare il software di imaging per registrare la posizione del mouse.
Prendere una siringa riempita con un reagente contenente il substrato bioluminescente e iniettarla per via intraperitoneale nel topo.
Il reagente circola ed entra nel sito di infiammazione, dove il substrato interagisce con gli enzimi specifici dell'infiammazione.
La reazione enzima-substrato produce un segnale bioluminescente.
Acquisisci immagini a intervalli di tempo regolari per monitorare questo segnale.
Il nervo ottico si trova vicino alla superficie, rendendo prominente la bioluminescenza intorno agli occhi. Al contrario, i segnali provenienti dal cervello sono deboli poiché il cranio assorbe la luce emessa.
Nell'immagine, il blu indica un'infiammazione lieve e il rosso indica un'infiammazione grave.
Per eseguire l'imaging in vivo, mantenere i topi so
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