JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:17 min. • August 7th, 2025
Fissare un topo anestetizzato in un telaio stereotassico.
Disinfetta il cuoio capelluto rasato, quindi fai un'incisione sulla linea mediana per esporre il cranio.
Asciugare il cranio e applicare perossido di idrogeno per migliorare la visibilità del bregma.
Individua bregma e lambda, quindi identifica i siti di destinazione.
Perforare con cautela il cranio nei siti bersaglio.
Collegare la siringa piena di virus allo strumento stereotassico.
Il virus codifica Cas9 e un RNA a guida singola per l'editing del genoma nei neuroni del giro dentato, insieme a un reporter fluorescente per etichettare i neuroni infetti.
Abbassare la siringa per raggiungere il giro dentato, quindi iniettare lentamente il virus per garantire una distribuzione uniforme.
Sollevare gradualmente la siringa e ripetere l'iniezione con coordinate aggiuntive.
Mettere brevemente in pausa per evitare il riflusso, quindi ritirare lentamente l'ago.
Ripetere la procedura sull'emisfero opposto.
Infine, sutura l'incisione.
Il modello è ora pronto per ulteriori studi.
Radere la testa di un topo anestetizzato per prepararsi al sito di iniezione. Dirigere l'isoflurano al 4% nel cono del naso. Quindi, posiziona il mouse nello strumento ster
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