Trattamento intracerebroventricolare con resiniferatossina per la desensibilizzazione di TRPV1 nel cervello di topo

Assumere una microsiringa riempita con resiniferatossina, un agonista ad alta affinità dei recettori TRPV1, canali ionici sensibili al dolore espressi sui neuroni sensoriali.

Passa l'ago attraverso un tubo di metallo, esponendo un'estremità corta della punta per un targeting ventricolare preciso.

Posizionare un topo anestetizzato prono e disinfettare la testa con alcol. Tenere saldamente la testa per stabilizzare il cranio.

Spostare l'ago lateralmente sul cuoio capelluto fino a quando non si aggancia alla sutura sagittale.

Spostare l'ago verso destra, quindi spostarlo rostralmente per agganciarlo alla sutura coronale.

Inserire l'ago nel ventricolo laterale destro, quindi iniettare lentamente l'RTX.

Tenere brevemente l'ago per consentire la diffusione dell'RTX, quindi ritirarlo lentamente per evitare il riflusso.

RTX si lega ai canali TRPV1 sui neuroni sensoriali nel cervello, causando un afflusso prolungato di calcio e una prolungata depolarizzazione neuronale.

Ciò innesca la desensibilizzazione di TRPV1 mediata dalla fosforilazione, seguita dall'internalizzazione di TRPV1 e dalla degradazione lisosomiale, che riduce la risposta neuronale agli stimoli del dolore.

Anestetizzare un topo con