JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:24 min. • August 7th, 2025
Inizia con un modello murino di corpo calloso-demielinizzato protetto e anestetizzato.
Questo topo mostra mielina danneggiata attorno agli assoni del corpo calloso.
Disinfettare l'area chirurgica, riaprire l'incisione pre-suturata ed espanderla per creare una cavità sottocutanea.
Ora, prendi una pompa osmotica riempita di farmaco terapeutico, un piccolo dispositivo di rilascio del farmaco impiantabile che è collegato a una cannula per infusione cerebrale tramite un catetere.
Posizionare la pompa osmotica all'interno della cavità sottocutanea.
Pulisci il foro stenopeico del cranio prestabilito.
Inserire la cannula attraverso il foro stenopeico, posizionandola in prossimità del corpo calloso.
Applicare un adesivo per fissare la cannula e staccare la linguetta rimovibile.
Sutura l'incisione e lascia che il topo si riprenda.
La pompa osmotica rilascia il farmaco attraverso la cannula a una velocità controllata per un periodo prolungato.
Le molecole del farmaco rilasciate si diffondono e raggiungono il corpo calloso.
All'interno del corpo calloso, il farmaco attiva le cellule produttrici di mielina, che promuovono la rimielinizzazione e confermano la somministrazione neuroterapica del farmaco.
Fissare nuovamente i topi sull'apparato stereotassico. Aprire l'incisione chirurgica precedentemente suturata ed espandere l'incisione fino alle scapole. Separare la pelle dal tessuto connettivo sottocutaneo in corrispondenza della scapola utilizzando una pinza emostatica o una pinzetta per aprire una cavità e posizionare la pompa osmotica nella cavità. Con un batuffolo di cotone, strofinare delicatamente ed esporre il foro stenopeico sulla superficie del cranio creato quando si stabilisce il modello di demielinizzazione.
Inserire la cannula per infusione cerebrale attraverso il foro stenopeico perpendicolarmente e fissarla al cranio con un adesivo per tessuti. Togli la linguetta rimovibile sopra la cannula per infusione cerebrale con un paio di forbici. Cucire l'incisione o fissarla con un adesivo per tessuti. Metti l'animale in una gabbia da solo dopo l'intervento chirurgico.