Somministrazione intranasale di siRNA al cervello del topo utilizzando un dispositivo di posizionamento

Inizia con topi anestetizzati posizionati su un dispositivo di posizionamento con la schiena parallela al supporto della schiena della sedia e perpendicolare al sedile.

I topi sono posizionati a testa in giù e in avanti e fissati con cinture per sedie.

Utilizzando una micropipetta caricata con un complesso peptide-siRNA che ha come bersaglio i neuroni, posizionare una goccia vicino a una narice, consentendo al topo di inalare la soluzione in modo naturale.

Premere delicatamente la testa del topo verso il basso durante l'inalazione per evitare che la soluzione defluisca nei polmoni.

Fare una breve pausa, quindi ripetere la somministrazione nell'altra narice.

Ripeti la procedura per i topi rimanenti.

Il complesso penetra nella mucosa nasale, da dove entra nei nervi olfattivo e trigemino e li attraversa per raggiungere il cervello.

All'interno del cervello, il complesso si lega ai recettori neuronali, subisce l'endocitosi e facilita la consegna intracellulare di siRNA.

Il siRNA entra a far parte del complesso RISC che, legandosi all'mRNA bersaglio, induce il silenziamento genico.

Per iniziare questa procedura, valutare il livello di anestesia del riflesso bipede del topo al fine di mantenere