JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:37 min • August 7th, 2025
Prendi un topo anestetizzato in posizione supina con una maschera per inalazione per fornire l'anestesia.
Per la somministrazione intranasale di farmaci basata su pipetta, assumere una micropipetta contenente un farmaco radiomarcato.
Inserire la micropipetta attraverso un'apertura nella maschera e somministrare il farmaco nella cavità nasale.
La cavità è rivestita da epitelio respiratorio e olfattivo, entrambi contenenti ciglia che eliminano attivamente le sostanze, limitando così la ritenzione di farmaci.
Le molecole del farmaco trattenute viaggiano attraverso i nervi per raggiungere il cervello.
Per la somministrazione intranasale del farmaco tramite incannulamento inverso, posizionare il mouse al microscopio e praticare un'incisione sul collo.
Esporre la trachea, inciderla, inserire una cannula e collegarla alla maschera per mantenere l'anestesia.
Esporre l'esofago, praticare un'incisione e inserire una cannula diretta verso la cavità nasale.
Legare la cannula e collegarla a una siringa contenente il farmaco radiomarcato.
Somministrare il farmaco contro la direzione del movimento ciliare, aumentando la ritenzione e migliorando il trasporto del farmaco.
Per la somministrazione intranasale tramite micropipetta in una struttura di radioisotopi isolata, fissare un topo anestetizzato a una tavola di sughero in posizione supina e somministrare 25 microlitri di soluzione di inulina di carbonio-14 in dosi da uno a due microlitri alternativamente nelle narici sinistra e destra dell'animale.
Per l'erogazione dell'incannulamento inverso dal lato delle vie aeree attraverso l'esofago, posizionare il topo anestetizzato sotto un microscopio da dissezione e praticare un'incisione cutanea di 1,5 sopra la gola. Usa una pinza per espandere l'incisione fino a quando la trachea non è esposta e fai un'incisione di 1 millimetro nella trachea esposta. Inserire una cannula 1,2 nella posizione pre-contrassegnata nell'incisione e fissare l'estremità opposta della cannula all'interno di una maschera per inalazione.
Successivamente, usa una pinza per esporre l'esofago da sotto la trachea. Usa le forbici per praticare un'incisione di 1 millimetro nell'esofago e inserisci una seconda cannula da 1,4 nella posizione pre-contrassegnata verso l'estremità posteriore della cavità nasale.
È importante inserire la cannula ad una lunghezza adeguata in base al peso dell'animale da esperimento, e regolare la lunghezza della cannula in altre.
Legare la cannula esofagea e collegare un ago calibro 27 a una siringa da 1 millilitro riempita con una soluzione di somministrazione collegata a una micropompa a siringa programmabile. Quindi erogare 25 microlitri di inulina di carbonio-14 a una velocità costante di 5 microlitri al minuto fino a quando l'intero volume della soluzione è stato somministrato.
Una velocità di diffusione lenta ma costante è importante per la ritenzione di quanta più soluzione farmacologica possibile all'interno della cavità nasale.