T-labirinto alternanza forzata e sinistra-destra Attività discriminazione per la Valutazione di lavoro e la memoria di riferimento nel Mice

Viene mostrata l'app Automatic teammates modificata con sistema di tracciamento. Questa app è costruita con rotaie di plastica bianca dotate di pareti alte 25 centimetri. L'MA è suddiviso in sei aree da un filo automatico diretto verso l'area A. Una di queste è un compartimento STA.

S due è una similarità tra i compagni di squadra. A uno sotto A due sono rispettivamente il braccio sinistro e quello destro. Le aree P uno e P due confrontano i passaggi di collegamento provenienti dalle aree A uno o A due con A uno, in modo che il topo possa tornare al compartimento statico.

Le porte si aprono automaticamente verso il basso in questo filmato come dimostrazione, mentre una delle porte viene azionata manualmente. Questi operatori migliorati ci permettono di utilizzare l'INB micro SSIS nella fisiologia molecolare e nella tecnica genica durante le prestazioni dei compagni di squadra. La N, seguita da un punto, viene dispensata come periodo incrociato utilizzato come ricompensa alimentare, spingendo una bottiglia del distributore di cibo seguita dalla bottiglia scartata.

È possibile osservare il periodo che viene rilasciato dal distributore di cibo sul vassoio alimentare e successivamente scartato sotto il terreno; il topo viene rilevato dal sensore e registrato da un computer. In pratica, il programma del sistema di tracciamento video dispensa automaticamente il periodo, pertanto non è necessario intervenire fino al termine della sessione. La telecamera CCD è montata sopra l'operatore per consentire al computer di acquisire il comportamento del topo come immagine in tempo reale; l'app Parus è illuminata con 100 lux per centimetro quadrato.

Si raccomanda di posizionare l'apparecchiatura in una stanza insonorizzata per ridurre i rumori provenienti dalle stanze circostanti. Iniziare una settimana prima delle sessioni operative a pesare giornalmente la massa corporea e assegnare a ciascun topo un punteggio relativo alla velocità di adattamento al periodo e all'insieme del training su piastre, fornendo un periodo standard di alimentazione a base di CHO per mantenere l'80%-85% del peso corporeo libero da alimentazione durante tutto l'esperimento. Il giorno successivo al raggiungimento del peso target, trasferire tutte le gabbie contenenti i topi nella stanza insonorizzata almeno 30 minuti prima dell'inizio della prima prova, evitando l'esposizione diretta alla luce della stanza. A causa delle luci recenti, evitare di posizionare le gabbie sugli scaffali superiori.

Prima di posizionare il mouse negli operatori, è necessario prima pulire gli operatori con una linguetta, aprendo così la propria acqua ipoclorosa superiore per prevenire un bias basato sui segnali ProAct. Oggi sei spiriti vicini per ogni mouse al centro, insieme ai sei Comandamenti e uno per ogni periodo in ciascun vassoio dei distributori di cibo. Posizionare tutti i mouse singolarmente in gabbia nel Perus e lasciarli liberi.

Esplorare i Perus con tutti i dos o entro 30 minuti dall'inizio. Un giorno dopo l'arbitrato, i topi saranno sottoposti a un prelievo di sangue giornaliero con la porta chiusa e il deposito del pellet nel treno alimentare. Posizionare il topo nel braccio sinistro; se il topo consuma il pellet entro cinque minuti AOPs, trasferire il topo nel braccio destro e ricominciare la pre-allenamento. Questa procedura di allenamento viene ripetuta fino a cinque volte al giorno e proseguita finché il topo non avrà consumato il pellet.

Oltre l'80% dei periodi, il topo viene posizionato nel compartimento statico. Le porte vengono aperte e al topo viene data la possibilità di scegliere per primo un braccio velocemente e di ritornare autonomamente al compartimento iniziale. Successivamente, al topo viene data la possibilità di scegliere in futuro.

Ora il braccio opposto al quarto braccio viene morso. Successivamente, il topo ritorna autonomamente nella scatola statica e la procedura viene ripetuta. Questo viene ripetuto fino a 10 volte al giorno sia nei topi di controllo che in quelli sperimentali.

Questi criteri consentono di testare ulteriormente i topi nel compito di ritenzione ritardata inserendo ritardi di 3, 10, 30 o 60 secondi tra la prima scelta e la scelta completa di sostantivi. Questo è un foglio di lavoro per registrare le informazioni relative a questo compito: identificativo univoco del topo, genotipo, schema del foro all'orecchio e spazio per registrare i dati raccolti manualmente con il programma informatico Land. Selezionare l'ID del progetto di inserimento online Plug TM.

Ad esempio, sessione di inserimento del nome della linea master. Ad esempio, data del test, parametri di ingresso come formula con immagine acquisita dalla telecamera C, istante di taglio e dimensioni dell'operatore. Successivamente, inserire l'ID della prova.

Ad esempio, il numero della stazione deve essere associato al nome del file di riferimento o a questo compito e deve essere indicato tramite un menu a discesa, inserendo il numero di scelta, il tempo limite per errore della macchina e il tempo di penalità. Successivamente, impostare i valori di nitidezza e contrasto sull'immagine acquisita, seguiti da una breve immagine binaria speciale. Infine, dopo aver verificato che le regioni di interesse apprezzabili siano state raccolte, è possibile completare il modello in modo che il programma sia pronto per il collaudo.

Prendere delicatamente il topo e posizionarlo nel compartimento iniziale. Fare clic sul pulsante di avvio per attivare la scelta forzata. Durante l'avvio, è possibile visualizzare immagini in tempo reale e binarie nonché lesioni nell'intestino.

In questo caso, il braccio superiore era ED nel campo oggi con il braccio destro, il topo è entrato nella pagina e la porta era aperta. La scelta completa verso il basso avvia il periodo che è stato consegnato al braccio sinistro. Poiché il topo è entrato nel braccio sinistro, la risposta è stata registrata come corretta.

Il risultato delle risposte viene visualizzato nella finestra luminosa inferiore del monitor. In questo caso, le immagini in tempo reale riprodotte mostrano che gli uccelli, quando presentati con determinate parole, chiudono il becco e il ciclo giallo indica il periodo di incrocio. Un topo viene sottoposto a 10 prove consecutive in una sessione al giorno.

Il mouse viene allenato quotidianamente per ottenere una percentuale media di risposte corrette dell'80%. La percentuale di risposte corrette, la latenza delle risposte, il tempo per completare la sessione, la distanza percorsa e il numero di errori di omissione vengono calcolati automaticamente dal programma. Al termine di ogni sessione, l'animale viene restituito alla sua gabbia di mantenimento. Pulire la piastra del distributore, asciugare le piastre con un tovagliolo di carta e quindi risciacquare con acqua pulita, priva di sostanze contaminanti, per evitare bias legati a residui odorosi. Se si desidera sottoporre i topi di controllo o sperimentali a un'ulteriore prova di mantenimento con ritardo, è sufficiente selezionare il file ritardato nelle impostazioni del programma e avviare la sessione successiva.

La procedura è in qualche modo simile al compito di post-azione, ma sia da sinistra a destra che da destra a sinistra, è sempre Ed As nel compito di mantenimento del posto e nel programma applicativo. Selezionare un nome di file diverso per questo compito e il nome del mouse dal menu a tendina, posizionare un mouse nel compartimento di partenza. Fare clic sul pulsante di avvio e la scelta guidata inizia ora.

In questo caso, il braccio selezionato viene sempre morso con il Periodo. Un topo di solito esegue da 10 a 20 prove consecutive in una sessione al giorno. I topi vengono addestrati quotidianamente fino a raggiungere il criterio di una percentuale media di risposte corrette dell'80%.

I risultati vengono calcolati automaticamente dopo i topi. Sulla base di questi criteri, possono essere effettuate sessioni aggiuntive con i topi per valutare la memoria di ritenzione, introducendo un ritardo tra le sessioni, oppure per valutare l'attività comportamentale. Cambiando la posizione del livero nel braccio opposto tra prove e sessioni, il video viene assegnato alla persona che corregge questo processo mediante un alfa etero M complesso e controllato dal tipo LI nel compito di automazione forzata.

Il risultato dimostrativo della memoria di lavoro con un ceppo mutante ma con CBR compromesso nel compito del disco mostra che i topi mutanti eseguono questo compito senza alcun problema e, anche dopo un ritardo di un mese, non hanno dimostrato alcun deficit nell'apprendimento del bus. Tuttavia, i mutanti hanno mostrato una prestazione compromessa. Il Test dei Compagni di Squadra è uno dei test comportamentali più utilizzati per valutare la memoria procedurale e la memoria di riferimento.

Nei roditori, abbiamo migliorato l'apparato di test, che presenta diversi vantaggi. Innanzitutto, le porte scorrevoli si aprono automaticamente e il topo può entrare autonomamente nella scatola S dopo ogni prova. Questa automazione del MA riduce il tempo e lo sforzo necessari per azionare manualmente le serrande e i distributori di cibo.

E nel nostro laboratorio, un esperimento può coinvolgere fino a quattro collaboratori contemporaneamente. In secondo luogo, l'apparato ci permette di utilizzare tecniche che richiedono collegamenti elettrici alla testa, come la microdialisi in vivo, l'elettrofisiologia in vivo o l'optogenetica in vivo, poiché le porte scorrevoli si aprono verso il basso. Infine, il labirinto è progettato in modo che il topo possa muoversi solo in avanti lungo gli altri percorsi, e non all'indietro, il che potrebbe favorire un movimento più fluido dell'animale.

In questo video, abbiamo presentato questo apparato automatico modificato e i nostri protocolli qui è il Dott. Hiro Pash. Nel nostro laboratorio, Hirotaka dimostrerà i protocolli utilizzando questo apparato automatizzato modificato in questo filmato. Hirotaka, qual è stata la tua prima impressione del test dei compagni di squadra utilizzando questo apparato migliorato?

La mia prima impressione è stata che l'apparecchiatura e il programma software fossero molto facili da utilizzare e che il test potesse essere eseguito rapidamente. Pensa che chiunque possa utilizzare questi operatori e questo programma oppure è necessario un tipo particolare di formazione? Sono parzialmente d'accordo.

Chiunque può imparare a utilizzare gli operatori. Non è necessaria una formazione specifica per eseguire le procedure di prova. Ci sono suggerimenti o aspetti a cui si dovrebbe prestare attenzione durante l'esecuzione del test?

Sì. Presto attenzione a mantenere la motivazione per il cibo somministrato in massa controllando quotidianamente il peso corporeo. Le differenze individuali nella motivazione possono causare variazioni nelle prestazioni dei compagni di squadra.