Name: Dinamica dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale con Fast-scan Voltammetria ciclica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: Scopri la voltammetria ciclica a scansione rapida per misurare la dinamica dopaminergica presinaptica in fettine di striato. Questo metodo elettrofisiologico permette di osservare il rilascio e il reuptake della dopamina in tempo reale.

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<li>Makos, M. A., Han, K. A., Heien, M. L., Ewing, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+in+vivo+electrochemistry+to+study+the+physiological+effects+of+cocaine+and+other+stimulants+on+the+drosophila+melanogaster+dopamine+transporter%5BTitle%5D)+AND+%22A.C.S.+Chem+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Using in vivo electrochemistry to study the physiological effects of cocaine and other stimulants on the drosophila melanogaster dopamine transporter.</a> A.C.S. Chem Neurosci. 1, 74-83 (2009).</li>
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<li>Kennedy, R. T., Jones, S. R., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+observation+of+dopamine+autoreceptor+effects+in+rat+striatal+slices%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Dynamic observation of dopamine autoreceptor effects in rat striatal slices.</a> J. Neurochem. 59, 449-445 (1992).</li>
<li>Rice, M. E., Cragg, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nicotine+amplifies+reward-related+dopamine+signals+in+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Nicotine amplifies reward-related dopamine signals in striatum.</a> Nat. Neurosci. 7, 583-584 (2004).</li>
<li>Zhang, L., Doyon, W. M., Clark, J. J., Phillips, P. E., Dani, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controls+of+tonic+and+phasic+dopamine+transmission+in+the+dorsal+and+ventral%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Controls of tonic and phasic dopamine transmission in the dorsal and ventral.</a> 76, 396-404 (2009).</li>
<li>Paredes, D., Grnaholm, A. C., Bickford, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+NGF+and+BDNF+on+baseline+glutamate+and+dopamine+release+in+the+hippocampal+formation+of+the+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of NGF and BDNF on baseline glutamate and dopamine release in the hippocampal formation of the adult rat.</a> Brain. Res. 11141, 56-64 (2007).</li>
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<li>Cheer, J. F., Wassum, K. M., Heien, M. L., Phillips, P. E., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabinoids+enhance+subsecond+doapmine+relese+in+the+nucleus+accumbens+of+awake+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cannabinoids enhance subsecond doapmine relese in the nucleus accumbens of awake rats.</a> J. Neurosci. 24, 4393-4400 (2004).</li>
<li>Phillips, P. E., Stuber, G. D., Heien, M. L., Wightman, R. M., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subsecond+dopamine+release+promotes+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Subsecond dopamine release promotes cocaine seeking.</a> Nature. 422, 614-618 (2003).</li>
<li>Robinson, D. L., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+of+dopamine+concentration+transients+increases+in+dorsal+and+ventral+striatum+of+male+rats+duing+introduction+of+conspecifics%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Frequency of dopamine concentration transients increases in dorsal and ventral striatum of male rats duing introduction of conspecifics.</a> J. Neurosci. 22, 10477-10486 (2002).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Il protocollo presentato qui dimostra come preparare e utilizzare fette coronali del cervello del mouse per gli esperimenti FSCV. Anche se questo metodo è specifico per ottenere e misurare la dinamica della dopamina, neurotrasmettitori altri come l&#39;adenosina, perossido di idrogeno, noradrenalina e serotonina sono stati monitorati in vivo o in vitro con FSCV 3, 8 - 11. FSCV può essere utilizzato per monitorare alcune di queste sostanze neurochimiche altri semplici modifiche della forma d&...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome </td><td> Azienda </td><td> Numero CAS </td></tr><tr><td width="274"> Reagente </td><td></td><td></td></tr><tr><td width="274"> Cloruro di potassio </td><td> Pescatore </td><td width="142" valign="top"> 7447407 </td></tr><tr><td width="274"> Cloruro di sodio </td><td> EMD chimici </td><td width="142" valign="top"> 7647145 </td></tr><tr><td width="274"> Cloruro di magnesio </td><td width="194" valign="top"> Pescatore </td><td width="142" valign="top"> 7791186 </td></tr><tr><td width="274"> Cloruro di calcio </td><td width="194" valign="top"> Pescatore </td><td width="142" valign="top"> 10035048 </td></tr><tr><td width="274"> Bicarbonato di sodio </td><td width="194" valign="top"> EMD chimici </td><td width="142" valign="top"> 144558 </td></tr><tr><td width="274"> Fosfato di sodio, dibasico </td><td width="194" valign="top"> EMD chimicas </td><td width="142" valign="top"> 7558794 </td></tr><tr><td width="274"> D-glucosio </td><td width="194" valign="top"> Pescatore </td><td width="142" valign="top"> 50997 </td></tr><tr><td width="274"> Acido ascorbico </td><td width="194" valign="top"> Pescatore </td><td width="142" valign="top"> 50817 </td></tr><tr><td width="274"> Saccarosio </td><td width="194" valign="top"> Pescatore </td><td> 57501 </td></tr><tr><td width="274">&nbsp;</td><td width="194" valign="top">&nbsp;</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td width="274"> Materiale </td><td width="194" valign="top"> Venditore </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td width="274"> Fibra di carbonio </td><td> Goodfellow Oakdale, PA </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Capillare di vetro </td><td> AM Sistemi Carlsborg WA. </td><td> 602000 </td></tr><tr><td width="274"> In filo d&#39;argento </td><td> A-M Systems Carlsborg WA. </td><td> 787000 </td></tr><tr><td width="274"> Tungsteno elettrodo stimolante </td><td> Una plastica, Roanoke, VA </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Filo di platino </td><td></td><td></td></tr><tr><td width="274"> Cavo </td><td> Elettronica scudieri, Cornelius, O </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Loctite 404 adesivo istantaneo </td><td> Hankal Corp. Rocky Hill CT. </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Lametta </td><td> Mondo precisione Instruments Inc. FL. </td><td></td></tr><tr><td width="274"> BD spinale ago </td><td> BD Medical Systems, Franlin Lake, NJ </td><td> REF 405234 </td></tr><tr><td width="274"> Lama chirurgica </td><td> Piuma di sicurezza rasoio Co. LTD. Giappone </td><td></td></tr><tr><td width="274"></td><td></td><td></td></tr><tr><td width="274"> Software </td><td width="194" valign = &quot;top&quot;&gt; Venditore </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td width="274"> TH software </td><td> ESA Inc., Chelmsford, MA </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Strumento </td><td width="194" valign="top"> Venditore </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td width="274"> Registrazione camera di immersione </td><td> Personalizzati scientifico, Denver, CO </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Neorolog stimolo isolatore </td><td> Digitmeter, Hertfordshire, Inghilterra </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Controllo automatico della temperatura </td><td> Warner Instrument Corporation </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Microscopio (SZX7) </td><td> Olimpo </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Microscopio </td><td> Pescatore </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Vibratome 3000 sezionamento sistema </td><td> S. Louè, MO. </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Perfusione pompa </td><td> Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall - Inghilterra </td><td> H110708 </td></tr><tr><td width="274"> Micropipetta estrattore </td><td> Narishige, Tokyo, Giappone </td><td></td></tr><tr><td width="274"> ChemClamp potenziostato </td><td> Dagan Corporazioni, Minneapolis, MN. </td><td></td></tr></tbody></table>

dinamica dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale con fast-scan voltammetria ciclica

Presynaptic Dopamine Dynamics in Striatal Brain Slices with Fast-scan Cyclic Voltammetry

La vasta ricerca si è concentrata sul neurotrasmettitore dopamina a causa della sua importanza nel meccanismo d&#39;azione dei farmaci d&#39;abuso (ad esempio la cocaina e anfetamine), il ruolo che gioca in malattie psichiatriche (es. schizofrenia e Attention Deficit Hyperactivity Disorder), e il suo coinvolgimento in degenerativa disturbi come il Parkinson e la malattia di Huntington. In condizioni fisiologiche normali, la dopamina è noto per regolare l&#39;attività locomotoria, conoscenza, apprendimento, influiscono emotivo, e la secrezione ormonale neuroendocrino. Uno dei più grandi densità di neuroni dopaminergici è all&#39;interno del corpo striato, che possono essere suddivisi in due distinte regioni neuroanatomiche conosciuto come il nucleo accumbens e del caudato-putamen. L&#39;obiettivo è quello di illustrare un protocollo generale per la fetta di scansione veloce voltammetria ciclica (FSCV) all&#39;interno del corpo striato mouse. FSCV è una ben definita tecnica elettrochimica fornendo l&#39;opportunità di misurare il rilascio di dopamina e la diffusione in tempo reale discrete cervello regioni. Microelettrodi in fibra di carbonio (diametro di circa 7 micron) sono utilizzati in FSCV per rilevare l&#39;ossidazione della dopamina. Il vantaggio di utilizzare FSCV analitici per rilevare la dopamina è la sua migliore risoluzione temporale di 100 millisecondi e una risoluzione spaziale di meno di dieci micron, fornendo informazioni complementari al microdialisi in vivo.

Tramite scansione veloce voltammetria ciclica per misurare elettricamente evocate dinamiche dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale.

Dinamica dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale con Fast-scan Voltammetria ciclica

Sostanziali ricerche si sono concentrate sul neurotrasmettitore dopamina a causa della sua importanza nel meccanismo d'azione delle droghe d'abuso (ad esempio cocaina e...

L'obiettivo generale di questa procedura è illustrare un protocollo generale per la telemetria con scansione ciclica rapida in sezioni. Questo viene realizzato preparando innanzitutto il tessuto cerebrale per il taglio coronale. Successivamente, gli elettrodi vengono posizionati sulla regione cerebrale d'interesse discreta.Il passo successivo consiste nell'applicare una tensione sotto forma di onda triangolare attraverso l'elettrodo per rilevare la dopamina. Infine, un agente farmacologico di interesse viene applicato alla sezione cerebrale e ne viene osservato l'effetto sulla dinamica dopaminergica presinaptica. In definitiva, questo protocollo mostra modifiche nella dinamica dopaminergica presinaptica, come il rilascio di dopamina indotto e le velocità di captazione della dopamina mediante voltammetria ciclica ad alta velocità.Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulle dinamiche della dopamina presinaptica, può essere applicato anche ad altri sistemi, inclusi animali e neurotrasmettitori, come ratti e moscerini della frutta, e serotonina e noradrenalina, rispettivamente. A dimostrare la procedura saranno Francis Mena, MEA Khalid ed Erin oo, studenti laureati del mio l

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Un nuovo mezzo per misurare la neurotrasmissione otticamente con analoghi della dopamina fluorescenti.

Il rilascio di dopamina a singoli terminali presinaptici visualizzate con FFNs

La tecnica di misura amperometrico il rilascio di dopamina da una singola cellula rilevando la corrente ossidativo prodotta per ossidazione spontanea dopamina. Morsetto di tensione simultanea e la metodologia amperometria rivelano il rapporto meccanicistico tra il generale "attività" del trasportatore della dopamina e il ruolo di regolamentazione di questa attività sul trasporto inverso di dopamina.

Cella di misura singola di rilascio di dopamina con simultanea di tensione-clamp e Amperometria

Questo video mostra l'impianto di elettrodi e cannule in un ratto anestetizzato per misurare il rilascio di dopamina nel nucleo accumbens utilizzando un potenziostato e l'infusione di farmaci per modulare l'attività dopaminergica nell'area tegmentale ventrale.

Monitoraggio del rilascio di dopamina in un modello di ratto con manipolazione del recettore dei neuroni dopaminergici VTA

Le rapide fluttuazioni della dopamina extracellulare (DA) mediano sia l'elaborazione della ricompensa che il comportamento motivato nei mammiferi. Questo manoscritto descrive l'uso combinato della voltammetria ciclica a scansione rapida (FSCV) e della somministrazione intraorale di tastant per determinare come i tastants alterano il rapido rilascio di dopamina nei ratti svegli e in movimento libero.

Esame di Rapid dopamina Dynamics con Fast Scan voltammetria ciclica Durante intraorale sapida Amministrazione in Rats Awake

La voltammetria ciclica veloce può monitorare la neurotrasmissione dopamina in vivo nel contesto di farmaci, malattie e altre manipolazioni sperimentali. Questo lavoro descrive l'implementazione di QNsim1.0, un software per modellare le risposte dopaminiche stimolate elettricamente secondo il modello quantitativo neurobiologico per quantificare le stime della dinamica di rilascio e di reuptake della dopamina.

Modellazione di voltammetria ciclica veloce dei dati da dati neurotrasmettivali elettromagnetici a dopamina utilizzando QNsim1.0

Questa carta dettaglia l'uso di registrazioni di fisso-potenziale amperometrico utilizzando elettrodi in fibra di carbonio e tecnologia dei biosensori enzimatici per misurare il rilascio di dopamina e glutammato con elevata risoluzione temporale durante il naturale comportamento gratificante nella criceto femmina.

Misurare In Vivo i cambiamenti in neurotrasmettitori extracellulare durante naturalmente Premiando i comportamenti in criceti siriani femminili

L'obiettivo di questo protocollo è quello di manipolare direttamente i recettori dell'area tegmentale ventrale per studiare il loro contributo al rilascio di dopamina al di sottosecondo.

Infusione e stimolazione combinate con voltammetria ciclica a scansione rapida (CIS-FSCV) per valutare la regolazione del recettore dell'area tegmentale ventrale della dopamina fasica

Questa relazione dimostra una tecnica per isolamento meccanico di singoli neuroni vitali mantenendo attaccato boutons presinaptica. Vibrodissociated neuroni hanno il vantaggio di una produzione rapida, eccellente controllo farmacologico e migliorato lo spazio-clamp senza influenza dalle cellule vicine. Questo metodo può essere utilizzato per l'imaging di elementi sinaptica e di patch-clamp registrazione.

Vibrodissociation di neuroni da fettine di cervello di roditore studio di trasmissione sinaptica e Immagine terminali presinaptici

Un metodo efficace per studiare valanghe neuronale, cioè scala-invarianti spazio-temporale scoppia attività, indicativa delle dinamiche condizioni critiche nella corteccia. Valanghe emergere spontaneamente nello sviluppo di strati superficiali della corteccia cerebrale in coltura che permette di misure a lungo termine delle attività con gli array planare integrata multi-elettrodi (MEA), a condizioni ben controllate.

Multi-array di elettrodi Recordings Valanghe neuronali in Culture organotipica

L'elettrodo-tessuto interfaccia di elettrodi di registrazione neurali può essere caratterizzato con spettroscopia di impedenza elettrica (EIS) e voltammetria ciclica (CV). Applicazione di tensione capacità di registrazione di polarizzazione modifiche delle proprietà elettrochimiche della elettrodo-tessuto interfaccia e può migliorare. Tensione di polarizzazione, EIS, CV, e le registrazioni neurali sono complementari.

Tensione di polarizzazione, voltammetria ciclica, e spettroscopia di impedenza elettrica per interfacce neurali

Scopri la voltammetria ciclica a scansione rapida per misurare la dinamica dopaminergica presinaptica in fettine di striato. Questo metodo elettrofisiologico permette di osservare il rilascio e il reuptake della dopamina in tempo reale.

Dinamica dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale con Fast-scan Voltammetria ciclica

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