Name: Valorizzazione dei induzione apoptotica e autofagica da un romanzo sintetico C-1 analogico di 7-deoxypancratistatin in adenocarcinoma del seno umano e cellule di neuroblastoma con Tamoxifene (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 19 min 44 s
Description: Scopri l'induzione apoptotica e autofagica da JCTH-4, un analogo sintetico della pancratistatina, in combinazione con tamoxifene in cellule di adenocarcinoma mammario e neuroblastoma umano. Questo metodo permette di valutare la citotossicità selettiva e i meccanismi di morte cellulare.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Questo lavoro è stato sostenuto dai Cavalieri di Colombo capitolo 9671 (Windsor, Ontario), e un CIHR Frederick Banting e Best Charles Canada Graduate Scholarship assegnato a Ma Dennis. Grazie a Hodge Robert ed Elizabeth Fidalgo da Silva per la loro assistenza con la microscopia time-lapse. Grazie a voi Katie Facecchia per la modifica dei time-lapse video microscopia. Vorremmo anche ringraziare Sudipa giugno Chatterjee e Phillip Tremblay per la revisione critica di questo manoscritto. Questo lavoro è dedicato in memoria di Kevin Couvillon che ha perso la sua battaglia contro il cancro nel 2010.

<ol><li>Earnshaw, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis.+A+cellular+poison+cupboard%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Apoptosis. A cellular poison cupboard.</a> Nature. 397, 387-389 (1999).</li>
<li>Kroemer, G., Mariño, G., Levine, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+and+the+integrated+stress+response%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell%22%5BJournal%5D)">Autophagy and the integrated stress response.</a> Mol. Cell. 40, 280-293 (2010).</li>
<li>Dalby, K. N., Tekedereli, I., Lopez-Berestein, G., Ozpolat, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+prodeath+and+prosurvival+functions+of+autophagy+as+novel+therapeutic+strategies+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Targeting the prodeath and prosurvival functions of autophagy as novel therapeutic strategies in cancer.</a> Autophagy. 6, 322-329 (2010).</li>
<li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hallmarks+of+cancer%3A+the+next+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Hallmarks of cancer: the next generation.</a> Cell. 144, 646-674 (2011).</li>
<li>Fearon, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+Cancer+Syndromes%3A+Clues+to+the+Origin+and+Nature+of+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Human Cancer Syndromes: Clues to the Origin and Nature of Cancer.</a> Science. 278, 1043-1050 (1997).</li>
<li>Tsokos, M., Scarpa, S., Ross, R. A., Triche, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+human+neuroblastoma+recapitulates+neural+crest+development.+Study+of+morphology%2C+neurotransmitter+enzymes%2C+and+extracellular+matrix+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Differentiation of human neuroblastoma recapitulates neural crest development. Study of morphology, neurotransmitter enzymes, and extracellular matrix proteins.</a> The American Journal of Pathology. 128, 484-496 (1987).</li>
<li>Schwab, M., Westermann, F., Hero, B., Berthold, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroblastoma%3A+biology+and+molecular+and+chromosomal+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Neuroblastoma: biology and molecular and chromosomal pathology.</a> Lancet Oncol. 4, 472-480 (2003).</li>
<li>Jemal, A., Siegel, R., Ward, E., Hao, Y., Xu, J., Thun, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2009%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J.+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2009.</a> CA Cancer J. Clin. 59, 225-249 (2009).</li>
<li>Howell, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endocrine+prevention+of+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Best+Pract.+Res.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">The endocrine prevention of breast cancer.</a> Best Pract. Res. Clin. Endocrinol. Metab. 22, 615-623 (2008).</li>
<li>Moreira, P., Custodio, J., Morena, A., Oliveira, C., Santos, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tamoxifen+and+estradiol+interact+with+the+flavin+mononucleotide+site+of+complex+I+leading+to+mitochondrial+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Tamoxifen and estradiol interact with the flavin mononucleotide site of complex I leading to mitochondrial failure.</a> J. Biol. Chem. 281, 10143-10152 (2006).</li>
<li>Kekre, N., Griffin, C., McNulty, J., Pandey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancratistatin+causes+early+activation+of+caspase-3+and+the+flipping+of+phosphatidyl+serine+followed+by+rapid+apoptosis+specifically+in+human+lymphoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Chemother.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Pancratistatin causes early activation of caspase-3 and the flipping of phosphatidyl serine followed by rapid apoptosis specifically in human lymphoma cells.</a> Cancer Chemother. Pharmacol. 56, 29-38 (2005).</li>
<li>McLachlan, A., Kekre, N., McNulty, J., Pandey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancratistatin%3A+a+natural+anti-cancer+compound+that+targets+mitochondria+specifically+in+cancer+cells+to+induce+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Pancratistatin: a natural anti-cancer compound that targets mitochondria specifically in cancer cells to induce apoptosis.</a> Apoptosis. 10, 619-630 (2005).</li>
<li>Griffin, C., Hamm, C., McNulty, J., Pandey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancratistatin+induces+apoptosis+in+clinical+leukemia+samples+with+minimal+effect+on+noncancerous+peripheral+blood+mononuclear+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Pancratistatin induces apoptosis in clinical leukemia samples with minimal effect on noncancerous peripheral blood mononuclear cells.</a> Cancer Cell Int. 10, 6(2010).</li>
<li>Griffin, C., Karnik, A., McNulty, J., Pandey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancratistatin+selectively+targets+cancer+cell+mitochondria+and+reduces+growth+of+human+colon+tumor+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Pancratistatin selectively targets cancer cell mitochondria and reduces growth of human colon tumor xenografts.</a> Molecular Cancer Therapeutics. 10, 57-68 (2011).</li>
<li>Griffin, C., McNulty, J., Pandey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancratistatin+induces+apoptosis+and+autophagy+in+metastatic+prostate+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Pancratistatin induces apoptosis and autophagy in metastatic prostate cancer cells.</a> Int. J. Oncol. 38, 1549-1556 (2011).</li>
<li>Collins, J., Rinner, U., Moser, M., Hudlicky, T., Ghiviriga, I., Romero, A. E., Kornienko, A., Ma, D., Griffin, C., Pandey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemoenzymatic+synthesis+of+Amaryllidaceae+constituents+and+biological+evaluation+of+their+C-1+analogues.+The+next+generation+synthesis+of+7-deoxypancratistatin+and+trans-dihydrolycoricidine%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Org.+Chem%22%5BJournal%5D)">Chemoenzymatic synthesis of Amaryllidaceae constituents and biological evaluation of their C-1 analogues. The next generation synthesis of 7-deoxypancratistatin and trans-dihydrolycoricidine.</a> J. Org. Chem. 75, 3069-3084 (2010).</li>
<li>Zhang, G., Gurtu, V., Kain, S. R., Yan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+detection+of+apoptosis+using+a+fluorescent+conjugate+of+annexin+V%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Early detection of apoptosis using a fluorescent conjugate of annexin V.</a> Biotechniques. 23, 525-531 (1997).</li>
<li>Madesh, M., Hajnóczky, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VDAC-dependent+permeabilization+of+the+outer+mitochondrial+membrane+by+superoxide+induces+rapid+and+massive+cytochrome+c+release%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">VDAC-dependent permeabilization of the outer mitochondrial membrane by superoxide induces rapid and massive cytochrome c release.</a> J. Cell Biol. 155, 1003-1015 (2001).</li>
<li>Simon, H. U., Haj-Yehia, A., Levi-Schaffer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+reactive+oxygen+species+%28ROS%29+in+apoptosis+induction%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Role of reactive oxygen species (ROS) in apoptosis induction.</a> Apoptosis. 5, 415-418 (2000).</li>
<li>Batandier, C., Leverve, X., Fontaine, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opening+of+the+mitochondrial+permeability+transition+pore+induces+reactive+oxygen+species+production+at+the+level+of+the+respiratory+chain+complex+I%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Opening of the mitochondrial permeability transition pore induces reactive oxygen species production at the level of the respiratory chain complex I.</a> J Biol Chem. 279, 17197-17204 (2004).</li>
<li>Lefranc, F., Sauvage, S., Goietsenoven, G. V. an, Mégalizzi, V., Lamoral-Theys, D., Debeir, O., Spiegl-Kreinecker, S., Berger, W., Mathieu, V., Decaestecker, C., Kiss, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Narciclasine%2C+a+plant+growth+modulator%2C+activates+Rho+and+stress+fibers+in+glioblastoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Narciclasine, a plant growth modulator, activates Rho and stress fibers in glioblastoma cells.</a> Mol. Cancer Ther. 8, 1739-1750 (2009).</li>
<li>Warburg, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+origin+of+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">On the origin of cancer cells.</a> Science. 123, 309-314 (1956).</li>
<li>Heerdt, B. G., Houston, M. A., Augenlicht, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+properties+of+colonic+tumor+cells+are+a+function+of+the+intrinsic+mitochondrial+membrane+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Growth properties of colonic tumor cells are a function of the intrinsic mitochondrial membrane potential.</a> Cancer Res. 66, 1591-1596 (2006).</li>
<li>Green, D. R., Kroemer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+mitochondrial+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of mitochondrial cell death.</a> Science. 305, 626-629 (2004).</li>
<li>Casellas, P., Galiegue, S., Basile, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+benzodiazepine+receptors+and+mitochondrial+function%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem.+Int%22%5BJournal%5D)">Peripheral benzodiazepine receptors and mitochondrial function.</a> Neurochem. Int. 40, 475-486 (2002).</li>
<li>Mathupala, S. P., Rempel, A., Pedersen, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aberrant+glycolytic+metabolism+of+cancer+cells%3A+a+remarkable+coordination+of+genetic%2C+transcriptional%2C+post-translational%2C+and+mutational+events+that+lead+to+a+critical+role+for+type+II+hexokinase%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bioenerg.+Biomembr%22%5BJournal%5D)">Aberrant glycolytic metabolism of cancer cells: a remarkable coordination of genetic, transcriptional, post-translational, and mutational events that lead to a critical role for type II hexokinase.</a> J. Bioenerg. Biomembr. 29, 339-343 (1997).</li>
</ol>

Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.

Composti PST e simili hanno dimostrato di avere proprietà anti-cancro 11-15,21. Abbiamo precedentemente riportato PST naturale di destabilizzare selettivamente i mitocondri nelle cellule tumorali, che in tal modo induce apoptosi mediante il rilascio di fattori citotossici 12,14. E &#39;molto probabile che JCTH-4 agisce attraverso lo stesso meccanismo; JCTH-4 ha causato il collasso MMP in MCF7 come si è visto con colorazione TMRM (Fig. 5a), e una maggiore generazione di ROS nei mito...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del materiale </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td> SH-SY5Y linea cellulare </td><td> ATCC </td><td> CRL-2266 </td></tr><tr><td> Dulbecco Modified Eagles Medio F-12 HAM </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 51448C </td></tr><tr><td> Siero fetale bovino </td><td> Gibco BRL </td><td> 16000-044 </td></tr><tr><td> MCF7 linea cellulare </td><td> ATCC </td><td> HTB-22 </td></tr><tr><td> Mezzo RPMI-1640 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> R 0883 </td></tr><tr><td> A quanto pare umano normale linea cellulare di fibroblasti fetali (NFF) </td><td> Coriell Institute for Medical Research </td><td> AG04431B </td></tr><tr><td> Media Dulbeccòs Modified Eagle, medio alto glucosio </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30022.01 </td></tr><tr><td> Tamoxifene sale </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T9262 </td&gt; </tr><tr><td> 35 mm vetro di fondo della cultura piatti </td><td> MatTek </td><td> P35G-014-C </td></tr><tr><td> Leica DMI6000 B microscopio invertito </td><td> Leica Microsystems </td><td> N / A </td></tr><tr><td> Colorante Hoechst 33342 </td><td> Molecular Probes </td><td> H3570 </td></tr><tr><td> Leica DM IRB invertito microscopio a fluorescenza </td><td> Leica Microsystems </td><td> N / A </td></tr><tr><td> Annessina V AlexaFluor-488 </td><td> Invitrogen </td><td> A13201 </td></tr><tr><td> Trypan Blu soluzione </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T8154-20ML </td></tr><tr><td> Emocitometro </td><td> Fisher Scientific </td><td> 267110 </td></tr><tr><td> WST-1 reagente </td><td> Roche Applied Science </td><td> 11644807001 </td></tr><tr><td> Wallac Victor 3 1420 Multilabel contatore </td><td> PerkinElmer </td><td> 1420-011 </td></tr><tr><td> Tetrametilrodamina metilestere (TMRM) </td><td> Gibco BRL </td><td> T-668 </td></tr><tr><td> Glass tessuto grinder </td><td> Fisher Scientific </td><td> K8885300-0002 </td></tr><tr><td> BioRad proteine ​​test </td><td> Bio-Rad Laboratories </td><td> 500 0001Bottom della Forma </td></tr><tr><td> Amplex Red </td><td> Invitrogen </td><td> A12222 </td></tr><tr><td> Perossidasi di rafano (HRP) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P8125 </td></tr><tr><td> Spectramax Gemini XPS </td><td> Molecular Devices </td><td> 3126666 </td></tr><tr><td> Anti-LC3 anticorpo cresciuto in coniglio </td><td> Novus Biologicals </td><td> NB100-2220 </td></tr><tr><td> Anti-mouse HRP-coniugato anticorpo secondario </td><td> Abcam </td><td> ab6728 </td></tr><tr><td> Anti-coniglio HRP-anticorpo secondario coniugato </td><td> Abcam </td><td> ab6802 </td></tr><tr><td> Chemiluminescenza perossidasi substrato </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> CPS160 </td></tr><tr><td> Monodansylcadaverine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 30432 </td></tr></tbody></table>

valorizzazione dei induzione apoptotica e autofagica da un romanzo sintetico c-1 analogico di 7-deoxypancratistatin in adenocarcinoma del seno umano e cellule di neuroblastoma con tamoxifene

Enhancement of Apoptotic and Autophagic Induction by a Novel Synthetic C-1 Analogue of 7-deoxypancratistatin in Human Breast Adenocarcinoma and Neuroblastoma Cells with Tamoxifen

Il cancro al seno è uno dei tumori più diffusi tra le donne in Nord America. Molti attuali trattamenti anti-tumorali, incluse le radiazioni ionizzanti, inducono apoptosi attraverso danni al DNA. Sfortunatamente, tali trattamenti non sono selettivi per le cellule tumorali e produrre tossicità simile in cellule normali. Abbiamo riportato l&#39;induzione di apoptosi selettiva in cellule tumorali dal pancratistatin composto naturale (PST). Recentemente, un romanzo PST analogico, un derivato C-1 di 7-acetossimetil deoxypancratistatin (JCTH-4), è stato prodotto mediante sintesi de novo e presenta comparabili selettiva attività inducente l&#39;apoptosi nelle linee cellulari tumorali diverse. Recentemente, autofagia è stato implicato in neoplasie sia come pro-sopravvivenza e pro-morte meccanismi in risposta alla chemioterapia. Tamoxifene (TAM) ha sempre dimostrato l&#39;induzione di pro-sopravvivenza autofagia in numerosi tumori. In questo studio, l&#39;efficacia di JCTH-4 da solo e in combinazione con TAM per indurre la morte cellulare in significatività maternor (MCF7) e neuroblastoma (SH-SY5Y) le cellule è stata valutata. TAM solo indotto l&#39;autofagia, ma la morte delle cellule insignificante, mentre JCTH-4 da sola ha causato significativa induzione di apoptosi con alcuni induzione di autofagia. È interessante notare che il trattamento combinatoria ha prodotto un drastico aumento di induzione di apoptosi e autofagia. Abbiamo monitorato le variazioni morfologiche tempo-dipendenti MCF7 cellule in fase di TAM-indotta autofagia, JCTH-4-indotta l&#39;apoptosi e l&#39;autofagia e morte cellulare accelerata con trattamento combinatoria utilizzando microscopia time-lapse. Abbiamo dimostrato questi composti di indurre apoptosi / autofagia per spese mitocondriale in queste cellule tumorali. È importante sottolineare che questi trattamenti non ha influenzato la sopravvivenza di fibroblasti umani non tumorali. Così, questi risultati indicano che JCTH-4 in combinazione con TAM potrebbe essere usato come un sicuro e molto potente terapia antitumorale contro il cancro al seno e cellule di neuroblastoma.

Abbiamo sintetizzato un analogo romanzo di pancratistatin paragonabile attività anti-cancro come pancratistatin nativo; interessante, il trattamento con tamoxifene combinatoria ha prodotto un miglioramento drastico induzione apoptotica e autophagic da mitocondriale di mira con effetti minimi sui fibroblasti non tumorali. Così, JCTH-4 in combinazione con tamoxifene potrebbe fornire una sicura terapia antitumorale.

Valorizzazione dei induzione apoptotica e autofagica da un romanzo sintetico C-1 analogico di 7-deoxypancratistatin in adenocarcinoma del seno umano e cellule di neuroblastoma con Tamoxifene

Il cancro al seno è uno dei tumori più comuni tra le donne in Nord America. Molti degli attuali trattamenti anticancro, incluse le radiazioni ionizzanti, inducono...

L'obiettivo generale di questa procedura è valutare la tossicità selettiva e il meccanismo di morte cellulare indotto da J CTH quattro, un analogo sintetico del composto naturale pancreatostatina, sia in monoterapia che in combinazione con il tamoxifene in cellule umane di cancro al seno e di neuroblastoma. Questo viene ottenuto innanzitutto coltivando cellule di carcinoma mammario mc sette, cellule di neuroblastoma SHSY cinque Y e fibroblasti fetali normali (NFF). Il secondo passaggio consiste nel valutare la citotossicità di J CTH quattro e del tamoxifene, somministrati singolarmente o in combinazione.Trattando le cellule con questi farmaci e monitorando le variazioni morfologiche dipendenti dal tempo, caratteristiche dell'apoptosi e dell'autofagia. Successivamente, il meccanismo di induzione di apoptosi e autofagia viene studiato monitorando il potenziale della membrana mitocondriale e la produzione di specie reattive dell'ossigeno in mitocondri isolati da queste cellule tumorali. Infine, vengono utilizzate la microscopia a tempo prolungato e diversi saggi biochimici per dimostrare che JCT four induce apoptosi e autofagia in cellule di carcinoma mammario umano e di neuroblastoma

enhancement-apoptotic-autophagic-induction-novel-synthetic-c-1

Research

Ricerca

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Di tipo B a base di gelatina sistema progettato nanovectors (GENS) è stato sviluppato per la consegna del gene sistemica e trasfezione nel trattamento del cancro al pancreas. Modificato con recettore per l'epidermal growth factor (EGFR), peptide specifico sulla superficie del nanparticles, potrebbero bersaglio sul recettore EGFR e rilasciare plasmide sotto riducendo l'ambiente, come ad esempio elevate concentrazioni di glutatione intracellulare.

Consegna dei geni e trasfezione in cellule umane di cancro al pancreas con Epidermal Growth Factor Receptor mirati Nanovectors Progettato a base di gelatina

L'autofagia è un processo onnipresente che permette alle cellule di degradare e riciclare le proteine ​​e organelli. Applichiamo la microscopia a fluorescenza avanzata per visualizzare e quantificare il piccolo, ma, cambiamenti fisici essenziali connessi con l'induzione di autofagia, tra cui la formazione e la distribuzione di autophagosomes e lisosomi, e la loro fusione in autolysosomes.

Analisi quantitativa di autofagia usando 3D avanzato microscopia a fluorescenza

L'attività citotossica della fenantridina PJ-34 in cellule tumorali in mitosi è stata documentata in tempo reale dai confocale vivo. PJ-34 sradicato cancro al seno umano MDA-MB-231 cellule che ospitano in più-centrosomi nella mitosi. A differenza della normale mitosi bi-focale, l'extra-centrosomi non sono stati raggruppati in due poli del fuso in presenza di PJ-34.

Cella della morte associata a mitosi anomalo osservato da Imaging confocale in cellule vive di cancro

Tre coltura tridimensionale di cellule epiteliali mammarie su una membrana basale ricostituita è un metodo utile ricordare l'architettura in vivo del seno benigno, e per differenziare il fenotipo maligno dal fenotipo seno benigno. È importante sottolineare che questo sistema può essere applicato a studiare carcinomi invasivi in ​​altri tessuti.

Tre Culture dimensionali: strumento per studiare normale acinose Architettura vs trasformazione maligna delle cellule mammarie

Viene descritto un modulo di laboratorio fattibile per studenti universitari di biologia che esplora concetti cellulari e molecolari avanzati utilizzando colture cellulari animali. Gli studenti coltivano, caratterizzano e manipolano un modello di cellula di cancro al seno mediante esposizione ad agenti chemioterapici. La vitalità cellulare viene analizzata attraverso la conta cellulare utilizzando sia un metodo standard che innovativo.

Utilizzando il mouse cellule tumorali mammarie per insegnare concetti di biologia di base: un modulo di laboratorio semplice

Qui, descriviamo un metodo di microscopia time-lapse a lungo termine per tracciare longitudinalmente singole cellule in risposta a terapie antitumorali.

Attraverso lo specchio: Time-lapse Microscopia e longitudinale monitoraggio di singole cellule allo Studio Therapeutics anti-cancro

Questa procedura dimostrerà come abbiamo sintetizzato e caratterizzato l'attività delle cellule staminali anti-NFκB e anti-cancro di un profarmaco aspirina-fumarato.

Sintesi e caratterizzazione di un profarmaco Aspirina-fumarato che inibisce NFκB attività e della mammella cellule tumorali staminali

Qui, presentiamo un protocollo per isolare cellule di carcinoma mammario apoptotica ordinando di fluorescenza-attivato delle cellule e ulteriormente rilevare la transizione delle cellule staminali non cancro al seno al seno cancro cellule staminali-come le cellule dopo inversione di apoptosi mediante citometria a flusso.

Flusso Cytometric Detection neonata al seno cancro cellule staminali-come delle cellule dopo l'inversione di apoptosi

L'obiettivo di questo protocollo è determinare i livelli autofagici nel cancro del pancreas e nelle cellule acinose pancreatiche attraverso l'immunofluorescenza LC3 e la quantificazione dei punti LC3.

Valutazione dei livelli di autofagia in due diversi modelli di cellule pancreatiche utilizzando l'immunofluorescenza LC3

Il presente protocollo descrive una strategia completa per valutare l'azione farmacologica e il meccanismo del salidroside nell'inibire la proliferazione e la migrazione delle cellule MCF-7.

Esplorazione dell'azione farmacologica e del meccanismo molecolare del salidroside nell'inibizione della proliferazione e della migrazione delle cellule MCF-7

Scopri l'induzione apoptotica e autofagica da JCTH-4, un analogo sintetico della pancratistatina, in combinazione con tamoxifene in cellule di adenocarcinoma mammario e neuroblastoma umano. Questo metodo permette di valutare la citotossicità selettiva e i meccanismi di morte cellulare.

Valorizzazione dei induzione apoptotica e autofagica da un romanzo sintetico C-1 analogico di 7-deoxypancratistatin in adenocarcinoma del seno umano e cellule di neuroblastoma con Tamoxifene (Video) | JoVE Journal

Valorizzazione dei induzione apoptotica e autofagica da un romanzo sintetico C-1 analogico di 7-deoxypancratistatin in adenocarcinoma del seno umano e cellule di neuroblastoma con Tamoxifene

Esplora altri video