La forzata mouse test Swim
January 29th, 2012
Il test di nuoto forzato è convalidato come un approccio sperimentale per valutare il potenziale efficacia antidepressiva nei roditori. Animali da laboratorio sono collocati in una vasca di acqua e fuga comportamento relativo alla mobilità è quantificato. Le procedure comuni per la versione del mouse di questa prova sono descritti.
Il test di nuoto forzato del topo è un test comune utilizzato per prevedere l'efficacia degli antidepressivi. Questo filmato mostra le procedure della versione murina del test di nuoto forzato. La versione del mouse è diversa dalla versione wrap e non deve essere utilizzata in modo intercambiabile.
Nel test di nuoto forzato, i topi vengono posti in una vasca piena d'acqua. Il topo rimane nella vasca per sei minuti. I comportamenti del soggetto vengono registrati durante questo periodo.
Al termine del periodo di prova di sei minuti, il soggetto viene tirato fuori dall'acqua. Al termine del test, le registrazioni visive vengono trasferite su un computer o un monitor video. Per l'analisi in osservatore misura il tempo che un topo trascorre lottando durante gli ultimi quattro minuti della sessione di sei minuti.
I farmaci antidepressivi aumentano la quantità di tempo trascorsa lottando. Ciò si riflette in periodi di immobilità più brevi. Ciao, mi chiamo Sean del laboratorio del Dr.Todd Gould presso la School of Medicine dell'Università del Maryland.
Ciao, sono Chantelle dello stesso laboratorio. In questo video, ti mostreremo come eseguire e valutare la versione del mouse del test di nuoto forzato. Il test di nuoto forzato del topo viene utilizzato per valutare la potenziale efficacia dei trattamenti antidepressivi.
Quindi tuffiamoci, che ne dite? Utilizziamo serbatoi cilindrici trasparenti realizzati con un materiale robusto, come il plexiglass, le dimensioni del serbatoio sono selezionate per evitare che i topi scappino e tocchino il fondo con i piedi o la coda. Riempire il serbatoio con acqua del rubinetto fino al livello predeterminato e contrassegnato, regolare la temperatura dell'acqua.
Dovrebbe essere compreso tra 23 e 25 gradi Celsius. I serbatoi dell'acqua devono essere predisposti per la videoregistrazione. Nel nostro laboratorio, eseguiamo il test di nuoto forzato con quattro o cinque soggetti alla volta tra le vasche.
Posizioniamo dei divisori per evitare che i soggetti si osservino a vicenda. Questi divisori forniscono anche un contrasto di fondo con i topi. Per i topi albini, il nero fornisce un buon contrasto per le registrazioni video.
Per ceppi di topi di colore più scuro, è appropriato uno sfondo bianco o crema. Prima di iniziare l'esperimento, avviare la macchina del rumore bianco. Assicurati che non sia troppo rumoroso.
Dovrebbe mascherare solo eventuali rumori intermittenti. Porta i soggetti nella stanza degli esperimenti. Per acclimatarsi questo periodo è generalmente di almeno un'ora.
Le condizioni nella sala sperimentale devono essere mantenute costanti e prive di rumori, variazioni dei livelli di luce e altre possibili interruzioni. Una volta terminato il periodo di assuefazione, il test può essere avviato. È importante registrare il nome della sessione Innanzitutto, tieni i topi per la coda e posizionali delicatamente nella vasca.
È importante farlo lentamente in modo che gli animali possano orientarsi quando toccano la superficie dell'acqua. Al termine del periodo di prova di sei minuti, registrare in video l'identificazione degli animali e interrompere la registrazione. Rimuovi i topi nello stesso ordine in cui sono stati avviati e asciugali delicatamente con carta assorbente prima di rimetterli nella gabbia.
L'acqua nei serbatoi non deve essere riutilizzata. Ora che abbiamo completato i test, passiamo al punteggio dei comportamenti nel test Mass Force Swim. La variabile principale che viene valutata è la quantità di tempo in cui gli animali rimangono immobili durante la prova.
Generalmente nel test di nuoto forzato del topo, vengono valutati gli ultimi quattro minuti della sessione totale di sei minuti. La ragione di ciò è il fatto che la maggior parte dei topi, indipendentemente dal trattamento, è continuamente mobile nelle prime fasi del test. Questa attività mette in ombra qualsiasi potenziale effetto del trattamento.
Come puoi vedere in questo video, i topi sono molto attivi durante le fasi iniziali del test. Questa attività diminuirà dopo i primi due minuti per ogni tempo trascorso con il mouse. Il cellulare è misurato da un cronometro sullo schermo controllato da un game pad.
L'altro cronometro conta alla rovescia i 240 secondi. La mobilità del tempo di prova è definita come qualsiasi movimento diverso da quelli necessari per bilanciare il corpo e mantenere la testa sopra la quota finale dell'acqua. Vediamo ora un esempio di punteggio di una prova.
Per prima cosa copriamo gli altri topi che non vengono valutati per evitare confusione. I topi generalmente galleggiano facilmente nell'acqua. Tuttavia, manifestano ancora piccoli movimenti per bilanciare i loro corpi e mantenere la testa fuori dall'acqua.
Questi comportamenti non sono un tentativo di fuga e non dovrebbero essere valutati come mobilità. Inoltre, dopo un singolo attacco di mobilità, i topi, anche se essenzialmente immobili possono ancora andare alla deriva nell'acqua a causa dello slancio acquisito in precedenza, anche questi movimenti non dovrebbero essere valutati come mobilità. Passiamo ora a un altro video.
Il mouse in questo video mostra i periodi di mobilità e immobilità come etichettati sullo schermo, un osservatore registrerà il tempo di mobilità. Sebbene sia teoricamente possibile misurare direttamente il tempo di immobilità, è più facile rilevare e misurare i movimenti attivi piuttosto che la mancanza di tali movimenti. Tradizionalmente viene riportato il tempo di immobilità.
Il tempo di immobilità è determinato sottraendo il tempo di mobilità da 240 secondi. Segnare il quarto test di nuoto richiede molto allenamento e pratica. Per raggiungere alti livelli di affidabilità, è importante creare uno standard di vita interno e formare ogni nuovo osservatore fino a raggiungere alti livelli di affidabilità.
In questo video, spieghiamo la versione per mouse del test di nuoto forzato. Buona fortuna per i tuoi esperimenti futuri.
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Panoramica
Il test del nuoto forzato è un metodo validato per valutare la potenziale efficacia antidepressiva nei roditori. Questo test prevede il posizionamento dei topi in un serbatoio di acqua e la quantificazione del loro comportamento di mobilità legato alla fuga.
Componenti chiave dello studio
Area di scienza
- Neuroscienza
- Scienze comportamentali
- Psicofarmacologia
Sfondo
- Il test del nuoto forzato è comunemente utilizzato nella ricerca preclinica.
- Aiuta a prevedere l'efficacia dei trattamenti antidepressivi.
- I topi sono utilizzati per le loro somiglianze comportamentali con gli esseri umani.
- Esistono diverse versioni del test, incluse quelle per topi e ratti.
Obiettivo dello studio
- Dimostrare le procedure della versione per topi del test del nuoto forzato.
- Evidenziare le differenze tra le versioni per topi e ratti.
- Fornire una guida visiva per i ricercatori che conducono il test.
Metodi utilizzati
- I topi sono posizionati in un serbatoio pieno d'acqua per sei minuti.
- Le osservazioni comportamentali vengono registrate durante la durata del test.
- La mobilità legata alla fuga viene quantificata per valutare l'efficacia antidepressiva.
- Le procedure sono standardizzate per garantire la riproducibilità.
Principali risultati
- Il test fornisce informazioni sulle risposte comportamentali dei topi.
- I risultati possono indicare la potenziale efficacia degli antidepressivi.
- La variabilità nel comportamento può fornire informazioni sui meccanismi alla base della depressione.
- Le procedure standardizzate migliorano l'affidabilità dei risultati.
Conclusioni
- Il test del nuoto forzato è uno strumento prezioso nella ricerca antidepressiva.
- Comprendere il comportamento dei topi in questo contesto può portare a trattamenti migliori.
- Studi futuri possono basarsi su questi risultati per esplorare nuove vie terapeutiche.
Domande frequenti
Executive Industry Relevance
The mouse forced swim test is a widely used preclinical behavioral assay for evaluating antidepressant efficacy, providing a quantitative readout of escape-related mobility that supports target validation and mechanistic de-risking in early discovery. Its standardized procedure enables reproducible assessment of compound effects on depressive-like states, informing go/no-go decisions in antidepressant pipeline prioritization. The test’s simplicity and minimal equipment requirements facilitate scalable implementation across discovery workflows.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Interrogates therapeutic hypotheses by measuring antidepressant-induced changes in mobility behavior, supporting target engagement validation.
- Operational Value: Enables functional validation of CNS targets through dose-response assessment of antidepressant compounds.
- Predictive Value: Contributes to preclinical confidence by correlating increased struggle time with potential clinical efficacy.
Screening & Assay Development
- Assay Readiness: Produces quantifiable mobility measurements over the last four minutes of a six-minute session, enabling standardized compound screening.
- Reproducibility: Standardized water temperature (23–25°C), tank dimensions, and observer training ensure consistent results across laboratories.
- Scalability: Compatible with parallel testing of four to five subjects using dividers to prevent social interference, supporting medium-throughput evaluation.
Translational & Preclinical Research
- Disease Relevance: Models depressive-like states through immobility behavior, allowing assessment of mechanism-based antidepressant candidates.
- Translational Continuity: Mobility scoring aligns with clinical endpoints by quantifying active coping behaviors predictive of treatment response.
- Risk-Adjusted Advancement: Reliable immobility data supports preclinical go/no-go decisions by reducing false-positive progression.
Pipeline & Workflow Integration
The mouse forced swim test functions as a discovery-stage behavioral assay that bridges target validation and lead identification, providing mechanistic insights before progression to preclinical efficacy studies.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing by isolating the effect of compounds on escape-related behavior, clarifying pathway involvement in mood regulation.
- Screening: Delivers quantitative mobility outputs that enable comparison of test compounds against controls and reference antidepressants.
- Analytics: Mobility time measurement, derived from active movement detection, provides a reliable, scorer-dependent readout for inter-group comparisons.
- Translational Research: Connects to preclinical validation by offering a behavioral proxy for antidepressant response, informing mechanism-of-action studies.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable behavioral platform for CNS target assessment across multiple discovery campaigns.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in target validation by reducing mechanistic ambiguity in antidepressant screening.
- Operational Value: Ensures assay standardization through fixed duration, temperature control, and blinded scoring protocols.
- Strategic Value: Improves capital efficiency by enabling early de-risking of antidepressant candidates before resource-intensive studies.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization by identifying compounds with robust mobility-enhancing effects.
Implementation Considerations
- Requires behavioral neuroscience expertise in rodent handling and ethological scoring.
- Dependent on controlled environmental instrumentation, including temperature-regulated water tanks and video recording systems.
- Necessitates cross-team standardization of observer training to achieve inter-rater reliability in mobility scoring.
- Involves adaptation considerations for different mouse strains, including background contrast optimization for video tracking.
- Limited by potential confounding factors such as stress reactivity and motor impairment, which must be controlled through complementary assays.
