A Step-by-step Metodo per la ricostituzione di un Transporter ABC in particelle lipidiche Nanodisc

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di incorporare un trasportatore A, b, C. In questo caso, il trasportatore del maltosio malf GK two in particelle di nano disco di membrana solubili. Ciò si ottiene mescolando prima la proteina MSP dell'impalcatura di membrana con il trasportatore e la corretta quantità di lipidi nelle cellule detergenti.

Il secondo passo consiste nell'aggiungere perle di polistirolo e far oscillare delicatamente la miscela durante la notte, il detersivo viene progressivamente assorbito sulle perline, permettendo la formazione delle particelle del nano disco. Successivamente, le perle vengono rimosse per sedimentazione. Il passaggio finale consiste nel separare i dischi correttamente formati dagli aggregati e dalle proteine dell'impalcatura non assemblate mediante cromatografia a filtrazione su gel.