Name: Riparazione di un critico di dimensioni modello Difetto cranica Usando derivate da tessuto adiposo cellule stromali raccolte da Lipoaspirate (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-10-31T10:03:00.000+00:00
Duration: 11 min 31 s
Description: Scopri come isolare cellule stromali da tessuto adiposo per rigenerazione ossea in vivo. Questo metodo utilizza un modello murino con difetto calvarico critico di 4 mm per valutare la differenziazione osteogenica.

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Vorremmo ringraziare il Dott. Commons George e il Dr. Dean Vistnes per il loro sostegno e la collaborazione della nostra ricerca. Questo lavoro è supportato dal National Institute of Dental Research e borse di craniofacciale 1 R21 DE019274-01, R01EB009689 e RC2 DE020771-02, la Fondazione di quercia e Hagey Laboratorio di Medicina Rigenerativa di Pediatric MTL Dr. Hyun è supportato dal San Giuseppe Mercy Hospital GME .

1. Cella di isolamento e di espansione <ol><li> Tutti consenso del paziente e protocolli sperimentali sono stati esaminati e approvati dalla Stanford University Institutional Review Board (protocollo # 2188 e # 9999). </li><li> Ottenere umano tessuto adiposo sottocutaneo di procedure elettive di cui lipoaspirazione locale / anestesia generale. </li><li> Ci saranno due strati nella lipoaspirate (Figura 1A). Il surnatante contiene la maggior parte del materiale trattato cellulare. Lo strato inferiore è principalmente iniettato salina. Adiposo cellule stromali può essere raccolta da uno strato, ma la resa è molto maggiore dal supernatante. </li><li> Per isolare la frazione stromale vascolare (SVF), lavare il lipoaspirate ampiamente con uguali volumi di 1X tampone fosfato salino (PBS) contenente 2,5% betadine (x2), seguita da volume uguale di PBS 1X (x1) senza betadine. Lasciare che il lavaggio a precipitare. </li><li> Fate attenzione a mantenere sterile technique tutto il processo, come contaminazione con tessuti umani trasformati può accadere. </li><li> Aspirare lo strato inferiore e gettare dopo ogni lavaggio. </li><li> Dispensare 15 ml di tessuto adiposo in 50 ml BD Falcon tubi conici. </li><li> Digerire il tessuto adiposo con un volume uguale (15 ml) di filtrato 0,075% collagenasi di tipo II in soluzione salina bilanciata di Hank (HBSS) a 37 ° C a bagnomaria per 60 minuti con agitazione costante (circa 180 scuote / min) - ventilare ogni tubo ogni 15 min. </li><li> Neutralizzare l&#39;attività enzimatica con 15 ml di PBS contenente 10% (Fetal Bovine Serum) FBS, e centrifugare a 1000 rpm per 5 min a 4 ° C per ottenere una alta densità SVF pellet. Il pellet sarà un mix di derivate da tessuto adiposo cellule stromali ed eritrociti. </li><li> Scartare il sopranatante senza disturbare il pellet. </li><li> Risospendere il pellet in 10 ml di mezzo di crescita tradizionali (Eagle modificato da Dulbecco Medium [DMEM] / 10% FBS / 1% di penicillina-streptomicina soluzione). </li><li> Filtro sospensione<html> sione attraverso un filtro 100 micron cella in nylon per rimuovere i detriti cellulari. </li><li> Combina 3 tubi in uno pulito da 50 ml. Centrifugare a 1000 rpm per 5 min a 4 ° C. </li><li> Scartare il sopranatante senza disturbare il pellet. </li><li> Risospendere il pellet in 5 ml di mezzo di crescita tradizionali </li><li> Combina due conicals 50 ml per un 10 cm Piatto o cinque conicals 50 ml per una piastra di 15 cm. </li><li> Stabilire colture primarie notte a 37 ° C/21% di O 2, 5% di CO 2. </li><li> Dopo l&#39;incubazione per una notte, lavare i piatti estesamente con PBS per rimuovere residui non aderenti globuli rossi. Le popolazioni di cellule risultanti sono derivate da tessuto adiposo cellule stromali. </li><li> Mantenere le cellule a livello sub-confluenti livelli per evitare differenziazione spontanea a 37 ° C/21% O 2, 5% di CO 2 in terreni di coltura. Le cellule generalmente necessario dividere ogni tre o quattro giorni in terreni di crescita regolari quando piastrate al 50% di confluenza. </li></ol>ve_title &quot;&gt; 2. Scaffold Preparazione <ol><li> Impalcature sono state fatte dal Dr. Min Lee presso l&#39;Università di California, Los Angeles - Scuola di Odontoiatria. </li><li> Ponteggi PLGA sono state fabbricate da 85/15 poli (lattico-co-glicolico) (viscosità intrinseca = 0,61 dl / g, Birmingham Polymers) mediante colata solvente ed un processo di lisciviazione particolato. </li><li> PLGA / cloroformio soluzioni sono state miscelate con saccarosio diametro 200-300 micron per ottenere 92% di porosità (frazione di volume), e compressi in fogli sottili in uno stampo Teflon. </li><li> Dopo liofilizzazione overnight, ponteggi sono stati immersi in tre cambi di bidistillata (dd) H 2 O per sciogliere il saccarosio, e delicatamente rimosso dalla piastra Teflon con un fine-punta di spatola. </li><li> Dopo la percolazione particolato, tutti scaffold stati disinfettati per immersione nel 50%, 60% e 70% di etanolo per 30 minuti ciascuno, seguiti da tre risciacqui di DDH 2 O. </li><li> Tutti i ponteggi sono stati essiccati sotto una cappa a flusso laminare. </li><li> Dopo ponteggio fabbricazione, scaffolds stati rivestiti con apatite. <ol class="ualpha"><li> SBF (fluido corporeo simulato) soluzione è stata preparata con concentrazioni di ioni che erano 5 volte quello del plasma umano. Tutte le soluzioni sono sterili filtrata attraverso una membrana da 0,22 micron PES (Nalgene). Immediatamente prima del processo di rivestimento, essiccato ponteggi PLGA sono stati sottoposti a scarica a bagliore, argon-plasma etching (Harrick scientifico) per migliorare la bagnatura e l&#39;uniformità di rivestimento. </li><li> Etched ponteggi PLGA sono state poi incubate in SBF a 37 ° C all&#39;interno di una camicia d&#39;acqua incubatore per 12 ore, seguita da Mg 2 + e HCO 3 - libera SBF 2 per un&#39;altra hr 12 a 37 ° C sotto leggera agitazione. </li><li> Rivestite ponteggi PLGA stati sciacquati delicatamente con sterile DDH 2 O per lavare via l&#39;eccesso di soluzione di cloruro di sodio, essiccati in una cappa a flusso laminare e disinfettati con etanolo al 70%. </li><li> Integrità del rivestimento di apatite è stata analizzata con un microscopio elettronico a scansione (SEM). Apatite rivestito scaffolds sono stati montati su stubs SEM (Ted Pella) e ricoperti di carbonio per migliorare la conducibilità. La modalità di elettroni secondari è stata applicata durante la SEM (FEI / Phillips XL-30) osservazione. Dispersione di energia dei raggi X dello spettro è stato ottenuto per confermare la composizione elementare delle strutture apatite. </li></ol></li></ol> 3. Semina cellulare <ol><li> Giunti sub-confluenza livelli, lavare le cellule con PBS (x2) e Tripsinizzare. </li><li> Contare le cellule di quantificare per la semina </li><li> Seme sul pre-tagliati scaffold mm di diametro 4,0 con 1,5 x 10 5 cellule. <ol class="ualpha"><li> Luogo individuale impalcatura in un pozzetto di una piastra a 96 pozzetti </li><li> Risospendere le cellule in terreno di crescita regolari con una concentrazione di circa 1,5 x 10 5 cellule per 20 l di supporti </li><li> Dispensare 20 pl direttamente sul patibolo e il luogo in incubatore per colture cellulare per 30 minuti. </li><li> Dopo 30 minuti, aggiungere 200 microlitri di media e permettere alle cellule di incubaresul patibolo notte prima dell&#39;intervento </li><li> Non è necessario per assicurare l&#39;adesione delle cellule sull&#39;impalcatura come seminare un numero sufficiente di cellule garantirà che la maggioranza si attaccherà sul ponteggio. Questo è stato validato nel nostro laboratorio in vivo con bioluminescenza e l&#39;analisi istologica. </li></ol></li></ol> 4. Creazione di difetti cranica e impianto in vivo <ol><li> Anesthetize adulti (60 giorni di età) CD-1 topi nudi con cocktail anestetico. (Ketamina / xilazina / acepromazina) al 50% di concentrazione (diluizione 1:1 con 0,9% NaCl) o per raccomandata regime anestetico per i protocolli delle istituzioni. Questi topi sono atimico in modo che i hASCs non provocare una reazione immunitaria. <ol class="lalpha"><li> Dosaggio: ketamina cloridrato (80 mg / kg), xilazina (2,5 mg / kg) Acepromazine (2,5 mg / kg) </li><li> Durata di entrata in vigore: circa 30 min </li></ol></li><li> Chirurgicamente drappo l&#39;animale e sterilizzare l&#39;chirurgicasito con Betadine e alcool (x3) e coprire gli occhi di topo con unguento prima di fare una incisione mediana sagittale nel cuoio capelluto dell&#39;animale per esporre l&#39;osso parietale destra. Rimuovere il pericranium dal parietale destro con raschiatura smussato (Figura 1B). </li><li> Creare un unilaterale da 4 mm a tutto spessore difetto il diritto non sutura parietale associata utilizzando una sterile diamantata punta trapano. Estrema cautela deve essere presa per non disturbare la sottostante dura mater (Figura 1B), come lo spessore del mouse cranica è &lt;0,3 millimetri. </li><li> Prima dell&#39;impianto, risciacquare scaffold con PBS sterile per impedire il trasferimento di medie fattori di crescita derivati. </li><li> Posizionare il patibolo nel difetto. </li><li> Infine, suturare la pelle chiusa e monitorare l&#39;animale per stabiliti protocolli post-operatorie. </li><li> Utilizzare analgesia stabilito come indicato dai protocolli animali vostra cura, se necessario dopo l&#39;intervento-per esempio. buprenorfina 0,1 mg / kg. </li></ol> 5. Quantificazione di Formazione osteoide <ol><li> Dopo microCT stata eseguita sul mouse, l&#39;immagine tridimensionale è stata ricostruita utilizzando software MicroView come descritto in precedenza 1. </li><li> Utilizzo di Adobe Photoshop, le immagini erano dimensionati per una altezza standard. </li><li> Utilizzando la funzione di bacchetta magica, i pixel sono stati misurati del difetto cranica. </li><li> Guarigione percentuale del difetto è stata determinata mediante successive scansioni CT misurare la superficie cranica difetto e determinare il numero di pixel e dividendolo per il numero di pixel del difetto originale </li><li> Di conseguenza, se il microCT non è disponibile, in alternativa si utilizza Adobe Photoshop e raccogliendo il calvaria a tempi determinati per istologia. </li><li> Utilizzando le macchie istologiche come anilina blu e Pentachrome che denotano la formazione osteoide, più sezioni lungo l&#39;arco del difetto deve essere macchiato </li><li> Utilizzo di Adobe Photoshop, ritagliare tutte le aree che non sononel difetto cranica </li><li> Utilizzare la funzione di bacchetta magica e determinare il numero di pixel di formazione ossea de novo nella zona del difetto e confrontare ai controlli o altre variabili. </li></ol> 6. Risultati rappresentativi Il tessuto adiposo è in grado di servire un ruolo fondamentale nella generazione di cellule progenitrici per l&#39;applicazione clinica. Tessuto adiposo ha un vantaggio unico in quanto vi è una fornitura prontamente disponibile che può essere raccolta in una procedura relativamente semplice che coinvolge minima morbilità e mortalità. Una volta che il tessuto è raccolto e raccolto, il nostro protocollo è descritto nella Figura 2. Adipose cellule stromali sono isolate attraverso una serie di fasi di lavaggio, digestione con collagenasi e centrifugazione. Una volta che le cellule vengono piastrate in coltura, possono essere espansi, inseriti in vari protocolli di differenziazione in vitro, oppure direttamente in vivo. Il cREAZIONE DI 4 mm critico-dimensione dei difetti cranica fornisce una facilmente accessibile e riproducibile nel modello in vivo per testare la capacità osteogenico differenziazione dei nostri derivate da tessuto adiposo cellule stromali. Attraverso l&#39;uso di microCT, siamo in grado di seguire la formazione di tessuto scheletrico in vivo e monitorare l&#39;avanzamento dei nostri interventi (Figura 3). Il critico-dimensione dei difetti cranica non guarirà entro la durata di vita degli animali e si vede circa il 90% del difetto rimane brevetto circa 8 settimane. Lo stesso ponteggio (vedi la discussione) ha osteogeniche proprietà induttivi e ha dimostrato la capacità di indurre un po &#39;di rigenerazione ossea. I risultati tipici di posizionamento scaffold senza cellule mostra che circa un terzo del difetto avrà de novo formazione ossea a 8 settimane. Con l&#39;aumento della adipose cellule stromali, completamente due terzi o più del difetto mostrerà la rigenerazione ossea a circa 8 settimane anche se vi è Variability tra ogni animale e chirurgia. La formazione di tessuto scheletrico può essere quantificata mediante istologia e risultati tipici mostrano una eccessiva formazione di osteoide in campioni con ASC in blu di anilina e la colorazione Pentachrome (Figura 3C). Inoltre, abbiamo dimostrato che le cellule impiantate umani contribuiscono alla sottostante de novo formazione ossea attraverso l&#39;uso di hASCs GFP-marcati che mostrano colorazione in vivo dopo 2 settimane vicino alla zona di formazione ossea de novo nel difetto cranica (Figura 3D) . Inoltre, utilizziamo immunoistochimica con anticorpo umano specifico per dimostrare la sopravvivenza delle cellule umane e contributo nella zona del difetto (Figura 3E). <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/4221/4221fig1.jpg" /> Figura 1 A -. La lipoaspirate ha due strati. Lo strato superiore contiene gli adipociti e la maggior parte del prprocessa materiale cellulare, mentre lo strato inferiore contiene la soluzione salina utilizzata durante la procedura di lipoaspirazione. B - la creazione del difetto cranica attraverso una incisione sulla linea mediana pericranium per isolare l&#39;osso parietale destro, successiva creazione di un 4 mm critica difetto imprese cranica senza interruzioni della dura sottostante dura. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/4221/4221fig2.jpg" /> Figura 2. Panoramica della raccolta e applicazione lipoaspirate dall&#39;isolamento del adipose cellule stromali alla loro espansione, la differenziazione e l&#39;uso in vitro e in vivo. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/4221/4221fig3.jpg" /> Figura 3. A-microCT che mostra in vivo la guarigione del difetto dimensione critica cranica con l&#39;applicazione di ASC attraverso un hydroxyapatitie ponteggio (riga in basso). I controlli includono nessuna impalcatura e difetti (riga in alto) e il difetto con il posizionamento del ponteggio senza celle (riga centrale) B - Quantificazione di guarigione ossea dal microCT mostra guarigione significativamente aumentata nel gruppo ASC. C - Istologia mostrando una eccessiva formazione di osteoide del gruppo ASC (riga in basso) con blu di anilina e colorazione Pentachrome. Per anilina blu, le macchie osteoidi blu scuro e per Pentachrome, le macchie osteoidi giallo. D - hASCS marcate con GFP sono state seminate su un ponteggio e posta in un difetto cranica e sacrificati dopo 2 settimane. La colorazione è stata eseguita con un GFP anticorpo marcato per mostrare le cellule umane che contribuiscono alla rigenerazione nella zona del difetto. E -. Umano immunoistochimica dell&#39;antigene nucleare che mostra la prevalenza di cellule umane nella zona del difetto a 2 settimane <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4221/4221fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per ingrandire la figura</a> .

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</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Poiché l&#39;isolamento di adiposo cellule stromali 2 da lipoaspirate, queste cellule sono state differenziate in una varietà di linee cellulari. Il tessuto adiposo è di origine mesodermica e, quindi, cellule stromali multipotenti derivate da tessuto adiposo sarà probabilmente più efficace con l&#39;applicazione nei confronti di un lignaggio mesodermica. La capacità di generare tessuto scheletrico è particolarmente importante data la carenza di siti donatori per un innesto di osso autologo e le limitazioni in...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reagente: </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Commenti (opzionale) </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Lipoaspirate Harvest </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Gibco </td><td> 10010-023 </td><td></td></tr><tr><td> Sale di Hank soluzione equilibrata </td><td> Cellgro </td><td> 21-023-CV </td><td></td></tr><tr><td> Collagenasi </td><td> Sigma </td><td> C6885-500mg </td><td></td></tr><tr><td> Cella Filtro 100 micron </td><td> BD Falcon </td><td> 352360 </td><td></td></tr><tr><td> Steri-top 500 ml 0,22 micron filtro </td><td> Millipore </td><td> SCGPT05RE </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Difetto cranica </td></tr><tr><td> Z500 Brushless MicromotorsUM50C </td><td> NSK </td><td> NSKZ500 </td><td></td></tr><tr><td> Circolare Knife 4,0 millimetri </td><td> Xemax chirurgico </td><td> CK40 </td><td></td></tr></tbody></table>

riparazione di un critico di dimensioni modello difetto cranica usando derivate da tessuto adiposo cellule stromali raccolte da lipoaspirate

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

Craniofacciale scheletrica riparazione e rigenerazione offre la promessa di formazione de novo tessuto attraverso una cella approccio che utilizza cellule staminali. Derivate da tessuto adiposo cellule stromali (CSA) hanno dimostrato di essere una fonte abbondante di cellule staminali multipotenti in grado di subire osteogenico, differenziazione condrogenico, adipogenico e miogenico. Molti studi hanno esplorato il potenziale osteogenico di queste cellule in vivo con l&#39;uso di biomateriali impalcature varie consegna cellulare. È stato dimostrato che utilizzando un osteoconduttiva, rivestimento in idrossiapatite poli (lattico-co-glicolico) (HA-PLGA) scaffold seminati con ASC, un difetto critico dimensioni cranica, un difetto che è definita dalla sua incapacità di subire spontanea guarigione sulla durata di vita dell&#39;animale, può essere efficacemente mostrare robusta rigenerazione ossea. Questo modello in vivo dimostra la base di approcci translazionale volta la rigenerazione del tessuto osseo - il cellularecomponente e matrice biologica. Questo metodo serve da modello per l&#39;applicazione clinico finale di una cellula progenitrice verso la riparazione di un difetto specifico tessuto.

Questo protocollo descrive l&#39;isolamento di adiposo cellule stromali di lipoaspirate e la creazione di un millimetro 4 critico imprese difetto cranica per valutare rigenerazione scheletrico.

Riparazione di un critico di dimensioni modello Difetto cranica Usando derivate da tessuto adiposo cellule stromali raccolte da Lipoaspirate

La riparazione e la rigenerazione dello scheletro craniofacciale offrono la promessa di una formazione tissutale de novo attraverso un approccio basato sulle cellule che utilizza le cellule staminali.

L'obiettivo generale di questa procedura è isolare cellule stromali multipotenti dal tessuto adiposo al fine di indurre la differenziazione osteogenica, utilizzando un modello di difetto calvarico in vivo in un topo. Questo risultato si ottiene innanzitutto isolando le cellule progenitrici dallo strato vascolare stromale del tessuto adiposo, che può essere ottenuto a seguito di una procedura di liposuzione. Il passaggio successivo consiste nel preparare un'impalcatura tridimensionale e quindi seminare le cellule su tale scaffold.L'ultimo passaggio consiste nella creazione di un difetto calvarico di dimensioni critiche in un modello murino, all'interno del quale vengono posizionati lo scaffold e le cellule. Alla fine, i risultati dimostrano che le cellule stromali multipotenti isolate dal tessuto adiposo possiedono il potenziale per la rigenerazione scheletrica in vivo. Le applicazioni di questa tecnica coprono un ampio spettro di possibili utilizzi clinici a causa della scarsità di tessuto disponibile per la rigenerazione scheletrica.Mentre gli innesti ossei autologhi rappresentano lo standard di riferimento, la mancanza di siti donatori e la morbosità del sito donatore limitano qu

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Le cellule staminali perivascolari (PSC) sono una nuova classe di cellule staminali per la rigenerazione tissutale scheletrico simili alle cellule staminali mesenchimali (MSC). CSP possono essere isolati mediante FACS (fluorescenza selezione cellulare attivata) da tessuto adiposo prelevati durante le normali procedure di liposuzione, poi combinato con un osteoinduttiva impalcatura per ottenere la formazione...

L&#39;uso di cellule staminali per la rigenerazione ossea perivascolari

Nel 2001, i ricercatori della UCLA hanno descritto l'isolamento di una popolazione di cellule staminali adulte, chiamate cellule o ASC staminali derivate da tessuto adiposo, dal tessuto adiposo. Questo articolo descrive l'isolamento di ASC da lipoaspirato utilizzando un protocollo digestione enzimatica manuale mediante collagenasi.

Isolamento Manuale di cellule staminali derivate da tessuto adiposo da lipoaspirato umani

L'eterogeneità trascrizionale all'interno delle cellule stromali umane di derivazione adiposa può essere definita a livello di singola cellula utilizzando marcatori di superficie cellulare e geni osteogenici.  Descriviamo un protocollo che utilizza la citometria a flusso per l'isolamento di sottopopolazioni cellulari con aumentato potenziale osteogenico, che può essere utilizzato per migliorare la ricostruzione scheletrica craniofacciale.

Isolamento e arricchimento di Human derivate da tessuto adiposo cellule stromali di Osteogenesi avanzata

Le cellule stromali derivate dal tessuto adiposo possono essere utili per ingegnerizzare nuovi tessuti dalle cellule di un paziente. Presentiamo un protocollo per l'isolamento di una sottopopolazione di cellule stromali umane di derivazione adiposa (ASC) con aumentato potenziale osteogenico, seguito dall'applicazione delle cellule in un saggio di guarigione calvariale in vivo.

Isolamento rapido di BMPR-IB + derivate da tessuto adiposo cellule stromali per l&#39;uso in un cranica difetto di guarigione Modello

Qui, presentiamo un protocollo per visualizzare formazione del vaso sanguigno in vivo e in tempo reale in 3D impalcature da microscopia multifotonica. Angiogenesi in impalcature geneticamente è stato studiato in un modello di difetto critico calvarial murino dell'osso. Più nuovi vasi sanguigni sono stati rilevati nel gruppo di trattamento rispetto ai controlli.

Visualizzando l'angiogenesi da microscopia multifotonica In Vivo in geneticamente 3D-PLGA/nHAp impalcatura per Calvarial riparazione di difetti ossei critici

Lo scopo di questo studio è di segnalare un protocollo per il trattamento artroscopico di lesioni osteocondrali dell'astragalo utilizzando microfratturate e purificato le cellule staminali adiposo-derivate.

Microfratturate autologo e nel tessuto adiposo purificato per l'amministrazione artroscopica di lesioni osteocondrali dell'astragalo

Il numero di nuovi biomateriali ingegnerizzati per la riparazione di lesioni dell'osso grande è in continua espansione con l'obiettivo di migliorare la guarigione ossea e superare le complicazioni connesse con trapianto osseo. Qui, presentiamo una strategia multidisciplinare per test di biocompatibilità pre-clinico di biomateriali per riparazione ossea.

Profilo di compatibilità biologica sui biomateriali per la rigenerazione ossea

Qui, presentiamo un protocollo per la produzione di una frazione di vascolare stromal derivate da tessuto adiposo e la sua applicazione per migliorare le funzioni del ginocchio eseguendo la rigenerazione della cartilagine-come il tessuto in pazienti umani con l'osteoartrite.

Protocollo clinico di produrre tessuto adiposo-derivato Stromal frazione vascolare per potenziale rigenerazione della cartilagine

Qui, presentiamo un protocollo per ottenere frazione vascolari stromali da tessuto adiposo attraverso una serie di processi meccanici, che includono emulsificazione e centrifugazioni multiple.

Micronizzazione meccanici di Lipoaspirates per la terapia rigenerativa

Descriviamo le procedure chirurgiche dettagliate dei difetti compositi della sutura calvaria-osso nei ratti, insieme alle indagini sulle prognosi a breve e lungo termine del modello. Il nostro obiettivo è quello di costruire un modello standardizzato per lo sviluppo di terapie rigenerative di sutura.

L'istituzione di difetti compositi di sutura calvariare-osso nei ratti: un modello standardizzato per l'indagine sulla terapia rigenerativa della sutura

Scopri come isolare cellule stromali da tessuto adiposo per rigenerazione ossea in vivo. Questo metodo utilizza un modello murino con difetto calvarico critico di 4 mm per valutare la differenziazione osteogenica.

Riparazione di un critico di dimensioni modello Difetto cranica Usando derivate da tessuto adiposo cellule stromali raccolte da Lipoaspirate (Video) | JoVE Journal

Riparazione di un critico di dimensioni modello Difetto cranica Usando derivate da tessuto adiposo cellule stromali raccolte da Lipoaspirate

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