Cromosoma Timing Replica combinazione con fluorescente In situ Ibridazione

Questo approccio sperimentale combina l'incorporazione di BRDU con l'ibridazione fluorescente in C due. Analizzare quantitativamente i tempi di replicazione dei cromosomi dei mammiferi. Innanzitutto, incorporare BRDU nelle cellule vive e raccogliere i cromosomi in metafase.

Quindi eseguire il DNA fish combinato con la colorazione sequenziale degli anticorpi BRDU per identificare i singoli cromosomi replicanti. Successivamente, utilizzare la microscopia fotografica per acquisire immagini dei segnali dei pesci e dell'incorporazione di BRDU nelle singole figure mitotiche. Utilizzando il software di visione cito, calcolare l'area e l'intensità dei pixel rappresentati dai segnali BRDU o DPI su ciascun cromosoma isolato.