Probe-based Endomicroscopy laser confocale del tratto urinario: La Tecnica

Lo scopo del seguente esperimento è quello di dimostrare la microscopia in vivo utilizzando l'endomicroscopia laser confocale basata su sonda in un paziente sottoposto a resezione transuretrale di un tumore della vescica. Ciò si ottiene utilizzando prima la cistoscopia a luce bianca per visualizzare l'intero urotelio della vescica e per notare eventuali lesioni della mucosa anormali o sospette. Come seconda fase, viene instillato un agente di contrasto intra ally che fornisce il contrasto di fluorescenza necessario per la visualizzazione con l'endomicroscopio laser confocale, nella terza fase viene eseguita la microscopia in vivo di ciascuna area di interesse e vengono annotate le caratteristiche microarchitettoniche e vascolari cellulari del tessuto.

In definitiva, i risultati della microscopia in vivo possono essere confrontati con l'analisi istopatologica delle biopsie delle regioni di interesse. A dimostrare la procedura sarà il Dr. Joseph Leal, il chirurgo urologo, che ha sviluppato l'applicazione dell'endomicroscopia laser confocale basata su sonda per il tratto urinario in sala operatoria. Dopo che il soggetto è in posizione litotomica, iniziare inserendo un cistoscopio rigido attraverso l'uretra utilizzando la cistoscopia standard a luce bianca per sorvegliare le regioni della vescica sotto luce bianca.

Contrassegnare le regioni di interesse per l'endomicroscopia laser confocale con un anello di resezione. Altre modalità di imaging ottico macroscopico, come la cistoscopia fluorescente e l'imaging a banda stretta possono essere utilizzate in questa fase per identificare ulteriori aree di sospetto, ora inseriscono un catetere urinario sterile nella vescica utilizzando un catetere da 60 millilitri. Puntare la siringa, instillare il mezzo di contrasto diluito per gravità.

Quindi, bloccare il catetere urinario per trattenere l'agente di contrasto in dimora. Dopo cinque minuti, scolare l'agente dalla vescica. Quindi versare da 240 a 300 millilitri di soluzione fisiologica normale nella siringa da 60 millilitri per eliminare qualsiasi contrasto residuo dalla vescica per l'iniezione endovenosa di fluoresceina.

Aspirare un millilitro di fluoresceina in una siringa. Collegare la siringa al punto di accesso endovenoso e iniettare da 0,5 a un millilitro di fluoresceina per via endovenosa come bolo, lavando la linea con soluzione fisiologica. Dopo l'iniezione del mezzo di contrasto, rimuovere dalla confezione una sonda di imaging per endomicroscopia laser confocale sterile e collegarla all'unità di scansione laser.

Quindi, riscaldare e calibrare la sonda di imaging secondo le istruzioni del produttore, quindi reinserire il cistoscopio rigido con una lente a zero gradi nella vescica. Ora fai avanzare la sonda di imaging per endomicroscopia confocale lungo il canale di lavoro del cistoscopio con la punta appena oltre il cistoscopio sotto luce bianca. Individuare le regioni di interesse precedentemente contrassegnate mentre la sonda di imaging esegue la scansione della regione di interesse.

Registra le immagini per analisi future. Quindi utilizzare la mano dell'operatore per manipolare l'imaging al microscopio endoscopico confocale. Sonda per contatto diretto o rapido delle regioni di interesse per il sezionamento ottico delle regioni di interesse.

Aumentare e diminuire delicatamente la pressione sulla sonda di imaging mantenendo il contatto diretto per raggiungere i tumori situati all'interno della vescica. Utilizzare un gomito e un ponte AL standard per facilitare la deflessione della sonda di imaging per il contatto diretto con la regione di interesse. Se lo si desidera, è possibile ottenere biopsie a freddo da qualsiasi regione di interesse corrispondente che è stata scansionata con l'endomicroscopia laser confocale.

Al termine dell'imaging, rimuovere la sonda di imaging per endomicroscopia confocale dal canale di lavoro. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di lavare la fluoresceina in eccesso dall'interno della vescica prima dell'imaging e di mantenere un contatto di 90 gradi tra una sonda e la superficie della mucosa. Questa prima immagine proviene da una cistoscopia rappresentativa a luce bianca con un tumore papillare colorato intravascolare.

Si noti la sonda di imaging da 2,6 millimetri visibile nella parte inferiore dell'immagine. Queste due immagini sono immagini rappresentative di endomicroscopia laser confocale ottenute da due diversi tumori della vescica utilizzando rispettivamente fluoresceina intravescicale ed endovenosa. Dato che le sonde di imaging possono essere scambiate tra i diversi tipi di cistoscopi laser confocali, l'endomicroscopia può essere combinata con altre modalità di imaging emergenti, che possono migliorare l'accuratezza diagnostica di entrambe le tecnologie da sola, inclusa la cistoscopia fluorescente come mostrato qui e l'imaging a banda stretta come mostrato qui.

Quindi questo metodo può fornire informazioni sul cancro alla vescica. Può essere applicato ad altri sistemi, come i carcinomi uroteliali del tratto superiore, che possono essere difficili da diagnosticare in biopsia.