Realizzare soluzioni in laboratorio
La capacità di realizzare soluzioni con successo è un'abilità di laboratorio di base eseguita praticamente in tutti gli esperimenti biologici e chimic…
La creazione di soluzioni è una procedura essenziale coinvolta praticamente in tutti gli esperimenti biologici e chimici eseguiti in tutto il mondo.
Una soluzione è costituita da una sostanza disciolta in liquido. La sostanza disciolta è nota come soluto e il fluido sfuso come solvente. La miscela omogenea risultante è indicata come la soluzione.
Le soluzioni possono essere descritte dalla loro concentrazione di soluto, una misura di quanto soluto è presente per unità di soluzione.
Fare soluzioni può essere un'abilità di laboratorio di base, ma una tecnica scadente può significare la differenza tra un esperimento riuscito o fallito.
La prima considerazione quando si realizzano soluzioni è la sicurezza. È importante prendere le precauzioni appropriate, come indossare guanti e un camice da laboratorio, a seconda del tipo di sostanze chimiche con cui si sta lavorando.
Ci sono molti modi diversi per trovare una soluzione. Questo video dimostrerà il modo più comune per realizzare una soluzione a base d'acqua o acquosa.
Per prima cosa determina le moli di soluto di cui avrai bisogno per raggiungere la concentrazione desiderata in un dato volume di soluzione. Quindi coprire questo valore in grammi usando il peso molecolare, o il numero di grammi per mole, della sostanza chimica.
Le sostanze chimiche possono essere pesate utilizzando una bilancia digitale e una barca di pesatura.
Un cilindro graduato può quindi essere utilizzato per misurare un volume di acqua purificata che è circa tre quarti del volume finale della soluzione.
È imperativo che le soluzioni acquose siano preparate con acqua purificata piuttosto che con acqua del rubinetto. In caso contrario, non solo la soluzione può compromettere la qualità non solo della soluzione, ma potenzialmente di più esperimenti lungo la linea.
A questo punto, l'acqua purificata deve essere trasferita in un becher contenente una barra di agitazione su una piastra magnetica.
I soluti misurati possono quindi essere aggiunti all'acqua purificata mescolando. Mescolare la miscela aiuta il soluto a dissolversi. L'applicazione del calore può essere utilizzata anche per questo scopo.
Una volta che tutti i soluti sono stati sciolti in solvente, il pH della soluzione può essere regolato utilizzando un pHmetro. Per aumentare il pH, aggiungere idrossido di sodio diluito alla soluzione di agitazione. Per abbassare il pH, aggiungere acido cloridrico diluito. Assicurati di aggiungere lentamente l'acido o la base, poiché il pH può cambiare rapidamente.
La carta pH può anche essere utilizzata per misurare il pH di una soluzione, tuttavia l'uso di un pHmetro calibrato si traduce in una misurazione più accurata.
La soluzione viene quindi versata in un matraccio volumetrico utilizzando un imbuto in modo che possa essere portata al suo volume finale. L'aggiunta della quantità sufficiente per raggiungere questo volume è nota come Q.S. la soluzione.
Assicurarsi che il menisco si alllinei con il segno sul pallone volumetrico. In una soluzione acquosa, il menisco è concavo e deve essere letto nel punto più basso della curva.
Quando si eseguono ricerche biologiche, in particolare quelle che coinvolgono cellule viventi, le soluzioni potrebbero dover essere sterilizzate prima dell'uso. Questo può essere fatto con l'autoclave, che sottopone la soluzione a vapore ad alta temperatura ad alta pressione.
In alternativa, la soluzione può essere sterilizzata facendo scorrere un filtro da 0,22 micron, che escluderà eventuali cellule batteriche.
Ora che hai una comprensione fondamentale di come realizzare soluzioni, è il momento di dare un'occhiata ad alcune soluzioni comunemente utilizzate in laboratorio e alle loro applicazioni.
Nella ricerca biologica, numerose soluzioni sono progettate per imitare i fluidi fisiologici. Queste soluzioni sono tamponate, il che significa che resistono alle variazioni di pH in un intervallo specifico; di solito, il pH viene mantenuto a circa 7,4 per simulare fluidi intracellulari ed extracellulari.
La soluzione salina tamponata con fosfato, o PBS, è un tampone comunemente usato nella ricerca biologica che imita il pH fisiologico e l'osmolarità. L'osmolarità si riferisce alle moli totali del soluto in una soluzione. Ad esempio, una soluzione contenente 1 mole di NaCl ha 2 osmoli di soluto, perché gli ioni sodio e cloride si dissociano in soluzione. PBS ha concentrazioni di ioni che corrispondono strettamente a quelle delle cellule, rendendolo una soluzione isotonica, il che significa che la quantità di soluto al di fuori della cellula è equivalente a quella che si trova all'interno della cellula. PbS è costituito da diversi sali diversi in acqua, compresi i sali con gruppi fosfato che mantengono un pH costante nell'intervallo da 7,2 a 7,6.
Gli usi comuni per PBS in laboratorio includono il lavaggio delle cellule e la diluizione di biomolecole come le proteine.
Il liquido cerebrospinale artificiale o ACSF imita le concentrazioni elettrolitiche del liquido cerebrospinale. Questa soluzione deve essere preparata al momento e il pH, l'osmolarità e la composizione ionica devono essere attentamente monitorati per adattarsi alle condizioni in vivo.
ACSF è generalmente utilizzato negli studi elettrofisiologici per preparare fette di cervello e per perfonderle durante gli esperimenti. Può anche servire come soluzione extracellulare durante la misurazione del patch clamp.
La soluzione di Ringer è una soluzione salina isotonica con un pH equilibrato utilizzata nella ricerca biologica. È comunemente usato in esperimenti in vitro con organi e tessuti.
Hai appena visto l'introduzione di JoVE alla creazione di soluzioni. In questo video abbiamo recensito come realizzare una soluzione dall'inizio alla fine... compreso come determinare la quantità richiesta di soluto (A), come QS correttamente una soluzione (B) e metodi di sterilizzazione (C). Abbiamo anche esaminato alcune soluzioni comuni e le loro applicazioni nella ricerca biologica (D).
Grazie per aver guardato e ricorda di usare sempre la tecnica corretta quando fai soluzioni.
La creazione di soluzioni è una procedura essenziale coinvolta praticamente in tutti gli esperimenti biologici e chimici eseguiti in tutto il mondo.
Una soluzione è costituita da una sostanza disciolta in liquido. La sostanza disciolta è nota come soluto e il fluido sfuso come solvente. La miscela omogenea risultante è indicata come la soluzione.
Le soluzioni possono essere descritte dalla loro concentrazione di soluto, una misura di quanto soluto è presente per unità di soluzione.
Fare soluzioni può essere un'abilità di laboratorio di base, ma una tecnica scadente può significare la differenza tra un esperimento riuscito o fallito.
La prima considerazione quando si realizzano soluzioni è la sicurezza. È importante prendere le precauzioni appropriate, come indossare guanti e un camice da laboratorio, a seconda del tipo di sostanze chimiche con cui si sta lavorando.
Ci sono molti modi diversi per trovare una soluzione. Questo video dimostrerà il modo più comune per realizzare una soluzione a base d'acqua o acquosa.
Per prima cosa determina le moli di soluto di cui avrai bisogno per raggiungere la concentrazione desiderata in un dato volume di soluzione. Quindi coprire questo valore in grammi usando il peso molecolare, o il numero di grammi per mole, della sostanza chimica.
Le sostanze chimiche possono essere pesate utilizzando una bilancia digitale e una barca di pesatura.
Un cilindro graduato può quindi essere utilizzato per misurare un volume di acqua purificata che è circa tre quarti del volume finale della soluzione.
È imperativo che le soluzioni acquose siano preparate con acqua purificata piuttosto che con acqua del rubinetto. In caso contrario, non solo la soluzione può compromettere la qualità non solo della soluzione, ma potenzialmente di più esperimenti lungo la linea.
A questo punto, l'acqua purificata deve essere trasferita in un becher contenente una barra di agitazione su una piastra magnetica.
I soluti misurati possono quindi essere aggiunti all'acqua purificata mescolando. Mescolare la miscela aiuta il soluto a dissolversi. L'applicazione del calore può essere utilizzata anche per questo scopo.
Una volta che tutti i soluti sono stati sciolti in solvente, il pH della soluzione può essere regolato utilizzando un pHmetro. Per aumentare il pH, aggiungere idrossido di sodio diluito alla soluzione di agitazione. Per abbassare il pH, aggiungere acido cloridrico diluito. Assicurati di aggiungere lentamente l'acido o la base, poiché il pH può cambiare rapidamente.
La carta pH può anche essere utilizzata per misurare il pH di una soluzione, tuttavia l'uso di un pHmetro calibrato si traduce in una misurazione più accurata.
La soluzione viene quindi versata in un matraccio volumetrico utilizzando un imbuto in modo che possa essere portata al suo volume finale. L'aggiunta della quantità sufficiente per raggiungere questo volume è nota come Q.S. la soluzione.
Assicurarsi che il menisco si alllinei con il segno sul pallone volumetrico. In una soluzione acquosa, il menisco è concavo e deve essere letto nel punto più basso della curva.
Quando si eseguono ricerche biologiche, in particolare quelle che coinvolgono cellule viventi, le soluzioni potrebbero dover essere sterilizzate prima dell'uso. Questo può essere fatto con l'autoclave, che sottopone la soluzione a vapore ad alta temperatura ad alta pressione.
In alternativa, la soluzione può essere sterilizzata facendo scorrere un filtro da 0,22 micron, che escluderà eventuali cellule batteriche.
Ora che hai una comprensione fondamentale di come realizzare soluzioni, è il momento di dare un'occhiata ad alcune soluzioni comunemente utilizzate in laboratorio e alle loro applicazioni.
Nella ricerca biologica, numerose soluzioni sono progettate per imitare i fluidi fisiologici. Queste soluzioni sono tamponate, il che significa che resistono alle variazioni di pH in un intervallo specifico; di solito, il pH viene mantenuto a circa 7,4 per simulare fluidi intracellulari ed extracellulari.
La soluzione salina tamponata con fosfato, o PBS, è un tampone comunemente usato nella ricerca biologica che imita il pH fisiologico e l'osmolarità. L'osmolarità si riferisce alle moli totali del soluto in una soluzione. Ad esempio, una soluzione contenente 1 mole di NaCl ha 2 osmoli di soluto, perché gli ioni sodio e cloride si dissociano in soluzione. PBS ha concentrazioni di ioni che corrispondono strettamente a quelle delle cellule, rendendolo una soluzione isotonica, il che significa che la quantità di soluto al di fuori della cellula è equivalente a quella che si trova all'interno della cellula. PbS è costituito da diversi sali diversi in acqua, compresi i sali con gruppi fosfato che mantengono un pH costante nell'intervallo da 7,2 a 7,6.
Gli usi comuni per PBS in laboratorio includono il lavaggio delle cellule e la diluizione di biomolecole come le proteine.
Il liquido cerebrospinale artificiale o ACSF imita le concentrazioni elettrolitiche del liquido cerebrospinale. Questa soluzione deve essere preparata al momento e il pH, l'osmolarità e la composizione ionica devono essere attentamente monitorati per adattarsi alle condizioni in vivo.
ACSF è generalmente utilizzato negli studi elettrofisiologici per preparare fette di cervello e per perfonderle durante gli esperimenti. Può anche servire come soluzione extracellulare durante la misurazione del patch clamp.
La soluzione di Ringer è una soluzione salina isotonica con un pH equilibrato utilizzata nella ricerca biologica. È comunemente usato in esperimenti in vitro con organi e tessuti.
Hai appena visto l'introduzione di JoVE alla creazione di soluzioni. In questo video abbiamo recensito come realizzare una soluzione dall'inizio alla fine... compreso come determinare la quantità richiesta di soluto (A), come QS correttamente una soluzione (B) e metodi di sterilizzazione (C). Abbiamo anche esaminato alcune soluzioni comuni e le loro applicazioni nella ricerca biologica (D).
Grazie per aver guardato e ricorda di usare sempre la tecnica corretta quando fai soluzioni.
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Q1: What are the main components of a solution?
A solution consists of a solute, the substance being dissolved, and a solvent, the bulk liquid in which it dissolves. Together, these form a homogenous mixture. Solutions are characterized by their solute concentration, which measures how much solute is present per unit of solution. Understanding these components is essential for accurate solution preparation in laboratory work.
Q2: Why is purified water essential when making aqueous solutions?
Purified water must be used instead of tap water because tap water contains impurities that can compromise solution quality and affect experimental results. Using tap water in aqueous solutions can potentially damage multiple experiments downstream. A graduated cylinder should measure roughly three-quarters of the final solution volume in purified water before adding solutes to ensure proper preparation.
Q3: How do you calculate the amount of solute needed for a solution?
First, determine the moles of solute required to achieve your desired concentration in a given volume. Convert this value to grams using the molecular weight, which represents grams per mole of the chemical. Weigh the solute using a digital balance and weigh boat. Understanding concentration and measuring volumes accurately ensures reproducible results across experiments.
Q4: What does QS'ing a solution mean and why is it important?
QS'ing refers to adding quantity sufficient to reach the final desired volume of solution. The solution is poured into a volumetric flask using a funnel, and the meniscus must align with the mark on the flask. In aqueous solutions, the meniscus is concave and should be read at its lowest point to ensure accurate final volume and concentration.
Q5: What are two methods for sterilizing solutions in the laboratory?
Solutions can be sterilized by autoclaving, which subjects the solution to high-temperature steam under high pressure, or by filtration through a 0.22 micron filter to exclude bacterial cells. Sterilization is particularly important when preparing solutions for biological research involving living cells. Both methods effectively eliminate microbial contamination before experimental use.
Q6: How does phosphate buffered saline differ from other laboratory solutions?
Phosphate buffered saline (PBS) is a buffered solution that resists pH changes in the range of 7.2 to 7.6, mimicking physiological pH and osmolarity. PBS contains multiple salts with phosphate groups and has ion concentrations matching those of cells, making it isotonic. Common laboratory uses include washing cells and diluting biomolecules such as proteins in biological research.
Q7: What is the role of pH adjustment in solution preparation?
After solutes dissolve in solvent, pH can be adjusted using a calibrated pH meter for accuracy or pH paper for quick measurement. To raise pH, add dilute sodium hydroxide; to lower pH, add dilute hydrochloric acid slowly, as pH can change rapidly. Proper pH adjustment is critical for solutions used in biological research, where maintaining physiological conditions ensures experimental validity.