Trattabili infezioni cellula di mammifero con protozoo-innescate batteri

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di raccogliere e quantificare i batteri trattabili in fluorescenza da un ospite intermedio per la successiva infezione delle cellule ospiti dei mammiferi. Qui la Legionella mala che esprime GFP viene utilizzata per infettare il protozoo ospite naturale acan ameba e i monostrati castellani. Gli el mala vengono quindi raccolti mediante lisi selettiva e la concentrazione di batteri viene quindi calcolata utilizzando una formula basata sulla diluizione dell'emissione di fluorescenza del protozoo.

I batteri innescati vengono quindi utilizzati per infettare i monostrati delle cellule di mammifero. Infine, il numero di batteri infettivi nelle cellule dei mammiferi viene determinato utilizzando una combinazione di microscopia a fluorescenza, citometria a flusso e lisati di placcatura per recuperare le unità formanti colonie. I dati risultanti dimostrano un vantaggio patogeno ottenuto per i batteri che sono stati coltivati in cellule protozoarie nella fase di priming rispetto allo stesso ceppo che è stato coltivato in terreno artificiale.