Distacco della retina Modello in Roditori da iniezione sottoretinico di ialuronato di sodio

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di creare distacchi di retina sperimentali con un'altezza di distacco riproducibile e sostenuta senza emorragia sottoretinica. Ciò si ottiene con il primo inci, la congiuntiva temporale al limbus posteriore per separare la congiuntiva dalla sclera. Nella seconda fase, la punta di un ago calibro 30 viene utilizzata per eseguire un'incisione sclerale autosigillante e una puntura corneale.

Successivamente, la minzione di sodio viene iniettata nello spazio sottoretinico per staccare la retina neurosensoriale dall'epitelio pigmentato retinico sottostante. Nella fase finale, la colla cianoacrilica viene posizionata sulla ferita sclerale e la congiuntiva viene riattaccata nella sua posizione originale, riducendo il rischio di perdite di urina di sodio hall. Infine, il fondo oculare viene esaminato utilizzando un vetro di copertura per confermare la creazione di un distacco di retina in bolo senza emorragia sottoretinica.

I metodi esistenti per ridurre il distacco di retina nei roditori possono comportare variabilità nell'altezza e nella persistenza del distacco di retina, portando a misurare tassi di mortalità cellulare incoerenti. Con questa tecnica è possibile creare un distacco di retina bolloso e persistente riproducibile con un ridotto rischio di emorroidi sottoretiniche, consentendo un modello affidabile di distacco di retina nei roditori. Il distacco di retina sperimentale nei roditori è relativamente semplice da eseguire, ha un decorso temporale ragionevole ed è abbastanza simile alla malattia umana.

Quindi è un ottimo modello per studiare i meccanismi di morte delle cellule dei fotorecettori e le terapie per prevenire la perdita della vista. Nelle malattie degenerative della retina In quanto si sa che la morte delle cellule fotorecettrici varia nella retina distaccata, è vantaggioso creare un distacco riproducibile senza emorragia sottoretinica. Questo perché l'aumento della durata del distacco della retina o l'insorgenza di emorragie sottoretiniche possono influenzare la morte delle cellule dei fotorecettori.

Dopo aver anestetizzato un topo di otto settimane, tagliare i baffi dell'animale, quindi dilatare la pupilla con una soluzione contenente il 5% di fenilrina e lo 0,5% di tropico al microscopio chirurgico. Tagliare la clia animale, applicare l'anestesia topica, soluzione oftalmica di propano cloridrato allo 0,5%. Posizionare il topo in posizione laterale con il naso rivolto verso il chirurgo, quindi incidere la congiuntiva temporale al limbus posteriore, separando la congiuntiva dalla sclera utilizzando un paio di pinze.

Afferra la congiuntiva al limbus per controllare l'occhio. Quindi tenendo un ago calibro 30 con uno smusso rivolto verso l'alto. Usa la punta dell'ago per creare un tunnel attraverso la sclera, penetrando la sclera nella coroide senza penetrare la retina.

Quindi, tenendo l'ago calibro 30 parallelo all'iride, pungere la cornea per ridurre la pressione intraoculare. Ora puntando lo smusso verso il basso. Inserire un ago calibro 33 collegato a una siringa Hamilton da 10 microlitri nello spazio sottoretinico e iniettare 3,5 microlitri di urina di sodio.

Questo staccherà circa il 50% della retina neurosensoriale dall'epitelio pigmentato retinico sottostante. Usando una pinza, spingere la cornea attorno alla puntura corneale per far defluire l'umore acqueo dalla puntura corneale, quindi utilizzare una lancia chirurgica di cellulosa per confermare l'assenza di perdite dalla ferita sclerale per ridurre il rischio di perdite di urina di sodio. Posizionare la colla cianoacrilica sulla ferita sclerale e poi attaccare nuovamente la congiuntiva nella sua posizione originale.

Utilizzare un vetro di copertura per controllare il fondo oculare e confermare la creazione di un distacco di retina in bolo senza emorragia sottoretinica. Infine, applicare un unguento antibiotico sull'occhio per ridurre il rischio di infezione. Tenere il mouse su un termoforo per evitare l'abbassamento della temperatura corporea.

A seguito di bassa pressione sanguigna. Rimetti l'animale nella sua gabbia dopo che si è svegliato dall'anestesia. Per valutare la persistenza del distacco di retina effettuato da questo protocollo, sono state eseguite sezioni criogeniche nei giorni tre, sette e 14 dopo l'induzione del distacco.

Sono stati utilizzati sei occhi per ogni punto temporale, ematina ed eosina. La colorazione è stata utilizzata per visualizzare le sezioni che mostravano ciascuna un bolo. Distacco di retina in avvicinamento al cristallino.

Nessun occhio ha mostrato segni di infezione o lesioni alle lenti. Una volta padroneggiato, questo intervento chirurgico può essere eseguito in circa cinque minuti Durante il tentativo di questa procedura, è importante eseguire ogni passaggio delicatamente per evitare di causare perdite di sodio, emorragia sottoretinica ad alta illuminazione o lesioni del cristallino, che possono influenzare la morte delle cellule recettoriali nella retina distaccata. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come creare un distacco di retina sperimentale nei roditori con un'altezza di distacco riproducibile e sostenuta senza emorragia sottoretinica.