March 1st, 2014
Questo articolo presenta un protocollo di prova paura condizionata contestuale e cued utilizzando un sistema di video analisi per valutare paura apprendimento e memoria nei topi.
Il test di condizionamento contestuale e acuto alla paura è un test comportamentale ampiamente utilizzato per valutare la capacità di apprendimento di Lawrence. Ricorda le associazioni tra un'esperienza aggressiva e i segnali ambientali. Tuttavia, in questo test ci sono alcune differenze metodologiche tra il luogo di lavoro, che possono comportare la difficoltà di confrontare i dati e di duplicare i risultati.
Per ottenere dati più stabili e validi, è importante standardizzare il più possibile il protocollo di test. In questo dimostriamo il protocollo del test sul campo. Il test di funzionamento della paura è un test semplice, sensibile e affidabile per valutare la memoria.
Questo test viene spesso utilizzato per comprendere il meccanismo neuro e molecolare e l'apprendimento e la memoria, e anche per valutare la funzione cognitiva di potenziali modelli murini di disturbi psichiatrici come il disturbo post stress e la schizofrenia. Nel test di fronte al comportamento, che viene misurato come indice di apprendimento e memoria viene valutato dall'analisi degli osservatori umani, sono stati utilizzati alcuni sistemi automatizzati per analizzare automaticamente il comportamento di utilizzo. Sviluppiamo un sistema di analisi delle immagini utilizzando un programma software basato su immagini FG e immagini A.
Stiamo distribuendo tale programma software e può essere scaricato gratuitamente a questo indirizzo. In questo presentiamo il nostro protocollo di test e il sistema di analisi automatizzato. In primo luogo, mostriamo come proteggere l'operatore dell'app come immagine del programma software.
In secondo luogo, dimostriamo i protocolli dettagliati del test, tra cui il test del contesto di condizionamento e il test Q per il dispositivo che utilizza il sistema. Infine, presentiamo i risultati attuali che indicano che il sistema FD con immagine N può produrre risultati altamente affidabili. Ora cominciamo.
Inizia velocemente il test di condizionamento della paura. Un topo viene posto in una camera con pavimento di pendenza. L'OID viene presentato come revisore.
Coda dell'auditor per 30 secondi. Successivamente, viene fornita una scossa elettrica. Questo abbinamento di una coda dell'auditor e della scossa del piede viene dato tre volte per migliorare l'associazione tra la coda dell'auditor e la scossa del codice elettrico.
Durante il test, il comportamento di congelamento viene misurato come indice di apprendimento associato e memoria ingiusta. In secondo luogo, dopo 24 ore, il topo viene inserito nella stessa camera di condizionamento e viene valutato per il comportamento di fuga. Per misurare contestualmente la paura, il topo viene quindi trasferito in G di forma diversa senza alcuna coda uditiva e, successivamente, viene presentata la coda uditiva.
In questo test, il comportamento di congelamento viene utilizzato come indice di memoria di paura acuta. Durante il test, il comportamento del mouse viene registrato attraverso una telecamera collegata a un computer. Il comportamento è giudicato come congelamento o non congelamento.
Con il programma software di immagine, il programma può calcolare la percentuale di tempo di congelamento e la distanza del traffico. Qui ad esempio, l'analisi dell'immagine viene dimostrata durante il test. Le immagini dal vivo vengono acquisite a una lunghezza al secondo.
L'immagine del crea un'immagine binaria da ogni immagine dal vivo per ogni coppia. Con fiamme successive, la quantità di area attraverso la quale il mouse si è mosso viene calcolata dall'immagine del programma. Quando l'area è al di sotto di una certa soglia, il comportamento viene giudicato come congelamento, che viene generalmente definito come una completa assenza di qualsiasi movimento se non per la respirazione e difficile da battere.
Il comportamento di blocco che dura meno della soglia di tempo definita non viene considerato blocco. Il valore di soglia deve essere impostato in anticipo in modo da ottenere la migliore corrispondenza tra i tempi di congelamento misurati dall'immagine Z e le osservazioni umane. Quando la quantità di area è uguale alla soglia o a X tre Z, il comportamento è considerato non congelante.
Qui dimostriamo il nostro protocollo di test nei topi utilizzando questo sistema di analisi video. In questo protocollo, l'operatore è costruttivo su una griglia quadrata a camera con griglie metalliche e scoperta con un'immagine di piombo trasparente. FD è in grado di distinguere il soggetto scuro da uno sfondo bianco in ogni immagine video acquisita.
Ma questo processo ci consente di analizzare il comportamento di congelamento del soggetto che la camera deve essere posizionata su un pavimento bianco per analizzare il comportamento dei topi neri, buoni o neri diretti. Il comportamento di congelamento dei topi in alluminio può anche essere analizzato dall'immagine D utilizzando griglie metalliche nere Secondo una regola nera, le luci a diodi emettitori di luce sono attaccate alla vela sopra l'apparato. La regola della griglia è illuminata su 100 tetti dalle luci a LED.
Un altoparlante collegato al generatore di rumore bianco è montato sulla vela sopra il coperchio. Un rumore bianco di 55 viene presentato come una coda uditiva. Le griglie sono collegate a un generatore di scosse elettriche per erogare scosse elettriche.
Il test del vento d'urto è fissato a 0,3 milioni di coppie prima dell'inizio del test. L'intensità di corrente sulla griglia deve essere controllata da un metallo perché il test d'urto può essere diminuito da un accumulo di fe e urina nei topi, la camera di prova è posta in un telaio insonorizzato per ridurre al minimo il rumore esterno. Durante la prova, l'appellato si trova in un suono diverso da quello in cui vengono eseguite le prove di cono e di contesto.
È composto da una camera che ha proprietà diverse dalla camera di coniatura. Fornendo un contesto normale, è necessario modificare il più possibile i codici sensoriali in modo che il topo percepisca il contesto Nobel come non correlato alla camera di contingenza. In questo protocollo, l'apparecchio è una camera triangolare acri con una regola acri piatta e il piombo trasparente.
Un altoparlante è montato sulla vela sopra il piombo per presentare su o tre code. Questa coda è lo stesso segnale che è stato fornito ai topi al momento dell'hawing. Il livello di illuminazione del pavimento è impostato per studiare l'aspetto.
Ogni camera è un cubo con una cabina di ricarica montata a vela, una telecamera per monitorare il comportamento del mouse. Prima dell'inizio di ogni test, le pareti e i pavimenti in acrilico vengono puliti con una lingua in modo da immergersi in acqua ad altissima densità e le griglie vengono pulite con etanolo al 70%. Per evitare una distorsione basata sul taglio olfattivo, le griglie vengono pulite con Ethan invece di acqua lorda super hype per ingiuriare che le griglie non deducono la loro conduttività elettrica a causa degli ultimi due o quattro topi, un pacchetto di casa in una stanza di contenimento a temperatura controllata per ridurre i possibili aumenti del trasporto in gabbia sul comportamento e per adattare i topi all'ambiente sperimentale.
La gabbia contenente i topi è stata trasferita in una sala d'attesa insonorizzata almeno 30 minuti prima dell'inizio di ogni test. Tutti gli esperimenti devono essere eseguiti durante lo stesso periodo di tempo per ridurre al minimo le variazioni di comportamento che possono essere prodotte dai test in momenti diversi. I topi di ciascun gruppo devono essere testati in un contrappeso per ridurre i potenziali effetti del tempo sperimentale.
Nell'ordine di test del soggetto sulle prestazioni comportamentali, l'immagine D può controllare un massimo di quattro apparecchi di test dai topi contemporaneamente mentre il ricercatore per risparmiare tempo e digitale per dedurre i potenziali effetti della procedura sperimentale sul comportamento del topo. Prima dell'inizio della sessione continua, eseguire il software applicativo A FD. Selezionare il menu della spina FD relativo e FD online e impostare i valori dei parametri impostati passo dopo passo come segue.
Passaggio uno, l'ID del progetto specifica la cartella in cui si desidera memorizzare la data dei file. Passaggio due, tipo di nome della sessione. Tutte le parole nella casella della sessione sono la data sperimentale e il testo di riferimento da archiviare in cui l'ora di inizio e la durata del rumore bianco e dello shock alimentare sono scritti nella casella di riferimento.
Il testo di deferenza su file deve essere preparato nella cartella di deferenza nell'immagine, la cartella in anticipo. Terzo passaggio impostazioni dei parametri. Immettere i valori dei parametri come la durata, il tempo e i criteri di congelamento, come mostrato nel filmato.
Passaggio quattro, ID soggetto. Inserisci l'identificazione del soggetto. Passaggio cinque, le impostazioni della fotocamera contrastano la luminosità e il contrasto dell'immagine acquisita.
Passaggio sei, impostazioni della soglia. Per prima cosa per misurare la distanza percorsa dalle immagini consecutive, regolare il valore principale di soglia del programma, che è impostato per segmentare le immagini in particelle nere e sfondo bianco. La distanza percorsa viene calcolata tra ogni set con le coordinate XY per il baricentro con la particella nelle immagini consecutive.
Secondo a major per il comportamento dalle immagini consecutive, solo assumendo x valore extra del programma che è impostato per segmentare le immagini in particelle nere sotto lo sfondo e quindi calcolare la quantità di area di regioni non sovrapposte tra le particelle di cui viene mostrata la coppia di finestre di assunzione di immagini consecutive la regione non sovrapposta. Modificare il valore espresso sulla quantità di valore della regione deve essere inferiore al valore del grido ING quando il mouse mostra il comportamento. Questi valori devono essere regolati in modo che i dati per affaticamento dell'immagine corrispondano a quelli della squadra umana stessa.
Passaggio sette, impostare per catturare il campo ha specificato il campo, quale camera che si desidera catturare dopo aver fatto clic con il pulsante rettangolo nella casella degli strumenti per rettangolare attorno al pavimento di esso. Camera nella finestra dell'immagine dal vivo. Quindi seleziona il romanzo da camera e fai clic sul pulsante di impostazione per infine fare clic sul pulsante Completa.
Dopo che le impostazioni dei parametri sono state definite, il test preparatorio dovrebbe essere somministrato utilizzando topi di pratica prima del primo test della data per determinare se il sistema di analisi dell'immagine e quali generatori di shock acustico funzionano con quei problemi spostare la gabbia a pettine contiene i topi di pratica per l'oscurità del test del suono dall'adiacente all'oscurità in attesa e posizionare ogni topo nella camera di condizionamento immediatamente dopo aver posizionato i topi nella camera, fare clic sulla parte inferiore iniziale dell'immagine di Z.I topi possono esplorare completamente la camera per 120 secondi. Successivamente. Un rumore bianco come coda uditiva viene presentato per 30 secondi e durante gli ultimi due secondi del suono, viene dato uno shock alimentare ai topi. Questa procedura viene ripetuta tre volte in seduta per rafforzare l'associazione tra la coda e lo shock alimentare.
Le maschere vengono lasciate con la camera per 90 secondi dopo l'ultimo accoppiamento. Stabilire ulteriormente l'associazione tra il contesto della camera e l'esperienza passiva. Dopo 480 secondi, i topi vengono riportati nella gabbia di casa e la gabbia viene riportata sullo scaffale della stanza di attesa.
Dopo ogni test, pulire accuratamente le camere e la griglia. Quindi fare clic sul pulsante di analisi successiva e ripetere la sessione nei mouse di prova. Circa 24 ore dopo il preoccupante spostamento della gabbia continua ai topi in una sala d'attesa insonorizzata.
La tenuta incombe almeno 30 minuti prima dell'inizio di ogni test. Immagine lunga del e impostare i valori dei parametri del software allo stesso modo del condizionamento. Tuttavia, imposta la durata fino a 300 secondi e seleziona 35 testi da archiviare per il test contestuale.
35 Il testo su file è vuoto. Posiziona il mouse nella camera di condizionamento e fai clic sul fondo iniziale. I topi possono esplorare completamente la camera per 300 secondi senza alcuna presentazione di stimoli.
Dopo 300 secondi, metti i topi nella loro gabbia domestica e pulisci le camere. Quindi fare clic sul fondo dell'analisi successiva e ripetere la procedura nell'immagine lunga dei mouse di test di D e impostare i valori dei parametri nello stesso modo del testo continuo tuttavia di riferimento per archiviare questo test e impostare il tempo di durata fino a 360 secondi. Questo è un testo di riferimento da archiviare per questo test.
Posiziona ogni topo nella camera triangolare e fai clic sul pulsante di avvio dell'immagine Z.I topi devono tutti esplorare la camera nei primi tre minuti. Non vengono presentati né rumore bianco né shock del piede. Questa camera ha diverse proprietà che forniscono un nuovo contesto e sono correlate alla camera continua.
In questa camera in genere deve muoversi molto e non mostrare comportamenti. Alla fine dei primi tre minuti, il rumore bianco che viene presentato a Concho viene fornito ai topi per tre minuti. Durante la presentazione dell'auditor, l'auditor mette in coda i topi o mostra un comportamento scritto dopo 360 secondi, riporta i topi nella loro gabbia domestica e riporta la gabbia sullo scaffale della stanza di attesa.
Dopo il test, pulire accuratamente le camere. Quindi fare clic sul fondo dell'analisi successiva e ripetere la procedura utilizzando i mouse di prova. Questo video mostra che il passaggio di congelamento analizzato dall'immagine del sistema sembra essere più strettamente correlato al pensiero misurato da un osservatore umano.
L'osservazione è stata confermata dai dettagli che hanno mostrato che la percentuale di leasing misurata dal fisico dell'immagine in ciascun test era altamente correlata o punteggio di pensiero dall'osservatore umano. Inoltre, questa cifra dimostra che le differenze tra le percentuali di congelamento misurate dalle osservazioni umane e l'immagine del sistema in essa era la più piccola. Questi risultati hanno indicato che la percentuale di congelamento misurata dall'immagine del sistema era simile a quella ottenuta dall'osservazione umana e che l'accuratezza che misura la quantità di ragione dall'immagine Z è elevata. Ok.
Ti è piaciuto? Come vedi dal test, l'analisi comportamentale standard può essere eseguita facilmente. Ci sono alcuni suggerimenti e punti importanti per l'utilizzo dell'immagine del sistema, quindi lascia che chieda a ika a riguardo. Ok.
Innanzitutto, come ti sei sentito riguardo alla procedura di test dell'immagine del sistema? Penso che la nostra procedura di test sia molto semplice e l'immagine del sistema sia uno strumento utile per misurare la ragione, il comportamento in modo accurato e rapido. Chiunque può facilmente utilizzare un programma software con una formazione precedente Di conseguenza, questo sistema può essere utilizzato per valutare la propria memoria in molti mesi in breve tempo, il che ci farà risparmiare tempo e in seguito.
Capisco. Allora c'è qualcosa a cui dovremmo stare attenti quando conduciamo il test? Sì, perché l'operatore afferma che è importante ottenere l'immagine più nitida da misurare con precisione con il comportamento, e quindi è necessario regolare la lunghezza della fotocamera e le cose di scrittura belo.
Anche nello studio del programma, è necessario impostare attentamente i valori sessuali e i criteri di ragione per giudicare se il comportamento può essere ificato o meno come ragione. È importante che il risultato sia stato immediato, il programma come con pensato di loro dall'osservazione umana Come mostrato nel presente risultato. Ok. Come puoi vedere, questo può essere un articolo, fornire informazioni dettagliate sulla procedura di test e sull'uso del programma software.
Speriamo che questo possa essere un articolo. Promuovere la comprensione del test e contribuire alla standardizzazione del protocollo.
Questo articolo presenta un protocollo per un test di condizionamento della paura contestuale e indotta mediante l'utilizzo di un sistema di analisi video per valutare l'apprendimento e la memoria della paura nei topi. Lo studio mira a standardizzare le metodologie per migliorare l'affidabilità delle valutazioni comportamentali nella ricerca neuroscientifica.