29 giugno 2014
Descriviamo una procedura graduale per la creazione di sovraccarico di pressione e ipertrofia ventricolare sinistra in ratti Wistar dalla costrizione dell'aorta ascendente con una piccola clip metallica. Questo modello è ampiamente utilizzato per studiare i cambiamenti di rimodellamento durante l'ipertrofia cardiaca e per identificare e valutare le strategie per la regressione di tali cambiamenti.
Ciao, sono Aji Kumar Gs della Divisione di Biologia delle Malattie Cardiovascolari Raj Gandhi, centro per le Biotecnologie dell'India. Sto lavorando sotto la guida del processo karta e in questo video dimostreremo una procedura passo-passo per la risalita della costruzione I OTE nei ratti. Nel nostro laboratorio, utilizziamo questo modello annuale per studiare la fisiopatologia e i meccanismi molecolari sottostanti nell'ipertrofia cardiaca e nell'insufficienza cardiaca progressiva.
Utilizziamo questo modello anche per studiare l'ipertensione polmonare associata a scompenso cardiaco sinistro. Quindi iniziamo E estetizziamo l'animale e manteniamolo in posizione supina. Eseguire l'intubazione endotracheale praticando un'incisione a metà strada tra due anelli tracheali e inserendo la cannula tracheale, che a sua volta è collegata a un ventilatore per roditori.
Quindi praticare un'incisione cutanea di circa due centimetri nella regione sinistra del torace tra la seconda e la terza costola e separare gli strati muscolari. Per visualizzare la costrizione dello iota della porzione ascendente dello iota è necessario eseguire utilizzando una clip di titanio di piccole dimensioni con un applicatore, opporsi alle costole e quindi suturare gli strati muscolari e la pelle in uno schema interrotto. Dopo la rimozione del tubo endotracheale, chiudere il muscolo della trachea, gli strati e la pelle e consentire all'animale di riprendersi.
La procedura è stata eseguita dopo aver ottenuto l'approvazione dal comitato istituzionale per l'etica degli animali. Prima dell'intervento, disinfettare il campo operatorio con alcol al 70% e mantenere il termoforo in modo asettico. Tenere il ventilatore per roditori e l'unità di anestesia pronti per l'intervento chirurgico.
Sterilizzare gli strumenti chirurgici in autoclave. I principali strumenti chirurgici per la costrizione isotica ascendente sono guanti sterili, pinze per pollice, forbici, lame chirurgiche, clip in titanio di piccole dimensioni e pinze per arteria applicatore con garza in caso di sanguinamento, un materiale di sutura in prolina porta ago, sutura in seta intrecciata e ago. Mantenere il ratto sotto l'ombrello di antibiotici per 24 ore ed estetizzare i ratti in una camera di induzione con il 3% di fluoro ISO miscelato con il cento per cento di ossigeno.
Rimuovi il pelo dalla scollatura e dalla regione del torace sinistro del ratto e mantieni l'animale in cima. Un termoforo. Mantenere l'anestesia con il riflesso del pedale di controllo del fluoro ISO all'1,5% per la conferma del successo dell'anestesia.
Disinfettare l'area chirurgica con una soluzione di iodio povidone seguita da alcol al 70%. Ripetere la procedura tre volte. Posizionare un telo sterile sull'animale esponendo solo il sito chirurgico.
Praticare un'incisione cutanea parallela alla trachea e separare il tessuto sottostante. Al fine di esporre la trachea. Applicare un laccio di filo di seta sotto la trachea e sollevarlo delicatamente verso l'alto.
Praticare un'incisione a metà strada tra due anelli di cartilagine e inserire la cannula tracheale. Collegare la cannula tracheale a un ventilatore per roditori. Il ventilatore deve essere impostato a una frequenza respiratoria di 50 respiri al minuto.
Volume corrente 1,7 ml e tempi di inspirazione 0,6 secondi. Fai un'incisione nella regione sinistra del torace tra la seconda e la terza costola. I muscoli intercostali devono essere separati strato per strato.
Prestare attenzione per evitare lesioni ai polmoni durante l'incisione tra le costole. Dopo aver retratto le costole, individuare con cura la parte ascendente dello iota manipolando delicatamente il tessuto adiposo. La freccia indica la parte ascendente dello iota.
Posizionare una clip in titanio di piccole dimensioni attorno allo iota ascendente con l'aiuto di un applicatore, restringendo così lo iota dal 50 al 60% del diametro originale. Dopo la costrizione iotica, riposizionare il cuore e approssimare le costole con la sutura di prolina Contemporaneamente Mettere in pausa il ventilatore per circa due o quattro secondi per rigonfiare i polmoni. Posizionare i muscoli a strati con prolina, seguiti dalla pelle con suture di seta in uno schema di sutura interrotto.
Ridurre gradualmente la frequenza respiratoria impostata sul ventilatore e osservare l'animale per la respirazione spontanea. Rimuovere la cannula tracheale una volta ristabilita la respirazione spontanea e regolare. Ora l'anestesia viene mantenuta attraverso il cono nasale.
Chiudere l'apertura tra gli anelli tracheali con suture di prolina. Chiudere gli strati muscolari e la pelle rispettivamente con suture di prolina e seta. Applicare la soluzione di iodio povidone sull'area chirurgica come iniezione di analgesia postoperatoria.
La soluzione salina intraperitoneale di Tremadol può essere somministrata per via intraperitoneale. Se i segni di disidratazione compaiono gradualmente più bassi L'anestesia in posizione off dopo che l'animale si riprende, spostato nella gabbia e somministrare amoxicillina per via orale mescolata con acqua potabile per sette giorni. L'intensità del sovraccarico di pressione prodotto dalla costrizione dello iota ascendente può essere determinata osservando il gradiente di pressione attraverso il sito di costrizione iotica mediante ecocardiografia bidimensionale.
Il pannello sinistro della figura mostra l'eco Doppler di un ratto ristretto all'aorta con un gradiente di pressione di 63 mm di mercurio. E il pannello di destra rappresenta un finto ratto controllato senza un significativo gradiente di pressione attraverso lo iota. Il pannello superiore mostra l'ecocardiografia in modalità M del ventricolo sinistro nei ratti, otto settimane dopo l'intervento chirurgico, e il pannello inferiore rappresenta il controllo fittizio, lo spessore del setto interventricolare e lo spessore della parete posteriore del ventricolo sinistro sono stati significativamente aumentati, mentre il diametro interno del ventricolo sinistro è stato significativamente ridotto nei ratti sottoposti a costrizione isotica.
Rispetto ai gruppi di controllo operati con sham, si osserva una significativa ipertrofia cardiaca nei ratti sottoposti a costrizione isotica ascendente dopo otto settimane dall'intervento chirurgico rispetto ai gruppi di controllo operati con sham. Ciao, sono Raj. Qui spieghiamo la procedura per la costrizione dello iota ascendente nel ratto.
Il vantaggio principale di questo modello è lo sviluppo graduale dell'ipertrofia cardiaca e dell'insufficienza cardiaca. Simile alla situazione clinica nell'ipertensione cronica in questa cura materna dovrebbe essere presa nell'applicazione della clip Titanic per la costrizione dello iota. La cosa più importante è che l'applicazione della clip Titanic dovrebbe essere sufficiente a produrre una costrizione critica per lo stress di 20 anni e oltre, ma non abbastanza grave da produrre insufficienza elettronica acuta ed edema polmonare e si dovrebbe anche prestare attenzione per evitare qualsiasi lesione ai polmoni durante l'incisione tra le costole.
I ventilatori devono essere posizionati per tre o quattro secondi mentre si oppongono alle costole per rigonfiare i polmoni. Quindi grazie per aver guardato questo video e buona fortuna con i tuoi esperimenti.
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In questo articolo viene descritta una procedura progressiva per indurre un sovraccarico pressorio e ipertrofia del ventricolo sinistro in ratti Wistar mediante costrizione dell'aorta ascendente. Questo modello è ampiamente utilizzato per lo studio dell'ipertrofia cardiaca e per valutare potenziali strategie di regressione.
La costrizione dell'aorta ascendente nei ratti fornisce un modello preclinico solido per l'ipertrofia cardiaca indotta da sovraccarico pressorio, consentendo la riduzione del rischio meccanicistico e la validazione degli obiettivi nella scoperta di farmaci cardiovascolari. Questo modello supporta una previsione affidabile per la ricerca traslazionale riproducendo l'insorgenza graduale dell'ipertrofia e dell'insufficienza cardiaca osservata nell'ipertensione cronica. La sua riproducibilità e le uscite quantitative lo rendono prezioso per la selezione del portafoglio e la verifica di ipotesi terapeutiche nelle fasi iniziali.
Questo modello si integra nel percorso dalla scoperta alla fase preclinica, collegando studi meccanicistici precoci con la validazione traslazionale di candidati farmaci cardiovascolari.