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DOI: 10.3791/51197-v
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This study investigates the dynamics of stress granules (SGs) in primary cells, focusing on their formation and response to stress. By visualizing tagged components of SGs, researchers can monitor their behavior in live cells.
Granuli di stress (SGS) sono granuli citoplasmatici RNA contenenti particelle in fase di stallo ribonucleoproteiche (RNP), e importante nella risposta cellulare alle varie sollecitazioni. Dinamica di SG possono essere seguite in cellule vive visualizzando la localizzazione di un componente taggato di SG in cellule primarie transfettate dopo stress.
L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di studiare la dinamica dei granuli ribonucleoproteici nelle cellule primarie, in particolare la formazione di granuli di stress. Ciò si ottiene coltivando prima cellule come topolini, embrionali, fibroblasti o neuroni ippocampali da animali di interesse. In una seconda fase, un componente marcato dei granuli di stress viene trasfettato per consentirne la visualizzazione.
Successivamente, le cellule vengono indotte dallo stress e monitorate con la microscopia confocale time-lapse. I risultati ottenuti mostrano la dinamica di G 3 BP uno contenente granuli di stress nei miti o nei neuroni specchio e ippocampali in base alla loro visualizzazione diretta. Questi metodi possono aiutare a rispondere a domande chiave sulla risposta allo stress in cellule come i neuroni.
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