Un saggio di legame High Throughput MHC II per l'analisi quantitativa dei peptidi epitopi

L'obiettivo generale di questa procedura è quantificare il legame di peptidi corti con due proteine immunitarie MHC umane utilizzando un saggio su piastra a 3 84 pozzetti ad alto rendimento. Ciò si ottiene eseguendo prima i saggi di legame della competizione nella fase di soluzione con i peptidi di interesse. Nella seconda fase, il peptide equilibrato MHC due complessi viene catturato con un anticorpo anti MHC due immobilizzato su piastre ELIZA ad alto legame.

Successivamente, i complessi catturati vengono incubati con la streptavidina marcata con l'oppio e quindi la streptavidina non legata viene lavata via e l'oppio catturato viene attivato. In definitiva, la fluorimetria risolta nel tempo può essere utilizzata per quantificare i livelli del peptide di controllo catturato MHC two. Questo metodo può fornire informazioni preliminari sul potenziale immunogenico delle proteine bersaglio.