Name: Corneale Preparazione donatore di tessuti per di Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Impara la preparazione manuale del tessuto endoteliale per la cheratoplastica endoteliale con membrana di Descemet. Questa tecnica controllata migliora la sicurezza e la ripetibilità della dissezione per il trapianto corneale.

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1 Impostazione del campo sterile <ol><li> Don adeguato abbigliamento compreso tappo e la maschera. Indossare occhiali protettivi quando in camera di trasformazione. </li><li> Preparare la zona di trasformazione. Quando si utilizza un locale, mantenere il funzionamento continuo del ventilatore per creare pressione positiva nella camera. </li><li> Raccogliere tutte le forniture. Controllare le date di scadenza, integrità della confezione, e indicatore di sterilizzazione. </li><li> Lavarsi le mani e indossare guanti non sterili. </li><li> Aprite i kit sterili per stabilire un campo sterile. Quando si utilizza un locale per il trattamento, posizionare i kit sul tavolo e asettico aprire le avvolge. Non utilizzare le esterne 1 ½ pollici di involucro come parte del campo sterile in quanto questo segmento è considerato non sterile. </li><li> Usando una tecnica asettica, aperto e rilasciare gli elementi sterili sul campo sterile se non è già parte del pacchetto premade. </li><li> Spostare microscopio in modo che sia al di sopra del campo sterile, attivare la sorgente luminosa del microscopio, e regolare oculari come necessario. </li><li> OBTtessuto corneale ain a essere spogliato (nei mezzi di conservazione) e posto vicino alla zona di lavorazione sterile preparata. Allentare il tappo della camera d&#39;osservazione e lasciare riposare sulla parte superiore della visualizzazione di base della camera senza fili impegnati. Eliminare i guanti non sterili. </li><li> Aprire un paio di guanti sterili e camice sterile con un asciugamano. </li><li> Eseguire lavaggio chirurgico. Indossare camice sterile, quindi guanti sterili. </li><li> Scatole strumento aperto in modo che tutte le forniture sono accessibili. Aprire umidità telo impermeabile per creare l&#39;area di lavoro. </li><li> Collegare l&#39;ago a una siringa da 5 cc. Utilizzando un emostatico, preparare il ago G 30 disponendo una curva 1 mm dalla smussatura, e un&#39;altra curva 1 mm dalla base (per formare una forma a &quot;S&quot;). </li><li> Montare la siringa di vetro per il trypan macchia blu inserendo lo stantuffo nella siringa e il dito stringendo lo stantuffo. Allega cannula. </li><li> Fissare la cannula per la bottiglia di soluzione salina bilanciata (BSS). </li><li> Separare il pugno trapano dal blocco vuotoe mettere da parte. Centra il blocco vuoto all&#39;interno del campo visivo del microscopio. </li><li> Portare il blocco vuoto a fuoco regolando le impostazioni del microscopio. </li></ol> 2 Procedura di donatore di tessuti Preparazione <ol><li> Sollevare il coperchio della camera di visualizzazione utilizzando un foglio quadrato come una barriera. Con la mano opposta e con pinze, afferrare delicatamente cornea da sclera RIM per eliminare cornea. Sostituire il coperchio della camera di osservazione. </li><li> Completamente deprimere la siringa di aspirazione, quindi posizionare cornea lato epiteliale verso il basso sul blocco vuoto e assicurarsi che sia centrato. (Figura 1) </li><li> Posti a sedere leggermente inferiore al blocco vuoto con i posti di guida. Engage vuoto rilasciando lentamente pistone della siringa di aspirazione. Rimuovere l&#39;anello di posti a sedere e mettere da parte. (Figura 2). </li><li> Eseguire una trapanazione parziale di segnare attraverso la membrana di Descemet. </li><li> Regolare microscopio zoom e messa a fuoco in modo che il tessuto sia ben visualizzato. </li><li&gt; Inclinare il blocco vuoto e utilizzare una lancia tampone sterile posto al limbus per rimuovere eccesso di terreno. (Figura 3) </li><li> Posizionare abbastanza macchia al limbus a macchiare il bordo della membrana di Descemet segnato. Lasciare che la macchia di rimanere sull&#39;endotelio per 60-90 sec. (Figura 4) </li><li> Rimuovere macchia: <ol><li> Inclinare il blocco vuoto per versare la macchia della cornea e sul tampone di garza. </li><li> Utilizzare le lance chirurgici per rimuovere l&#39;eccesso macchia dalla zona limbare della cornea, facendo attenzione a non toccare l&#39;endotelio. (Figura 5) </li></ol></li><li> Utilizzare alcune gocce di BSS per sciacquare la cornea di soluzione colorante, e lance tampone sterile per rimuovere l&#39;eccesso BSS. (Figura 6) </li><li> Mettere 1-2 gocce di BSS sul cerchio sclera per impedire tessuto da essiccazione. Ripetere, se necessario, durante tutta la procedura. </li><li> Eseguire dissezione parziale della membrana di Descemet: <ol><li> Cominciando dove collegare il tubos al blocco vuoto, utilizzando pinze aperte, mettere una punta al bordo del segno partitura e la membrana leggermente separati di Descemet e l&#39;endotelio lontano dal stroma. (Figura 7). </li><li> Membrana separata di Descemet e l&#39;endotelio non più di 1 mm dal bordo segnato e continuare la dissezione a 360 ° intorno. (Figura 8). </li><li> Nota la posizione di eventuali micro lacrime mettendo un punto sul blocco vuoto con il marcatore pelle. NOTA: Se il trapano non penetrare completamente attraverso la membrana di Descemet, utilizzare il bordo smussato del preparato 30 ago G per completare il punteggio attraverso la membrana di Descemet, se necessario, seguita da una seconda applicazione di colorazione, se necessario. Se adesività della membrana di Descemet ostacola la dissezione parziale, rimuovere l&#39;endotelio di fuori dell&#39;area trephinated come necessario. </li></ol></li><li> Usare pinze per rimuovere eventuali tag endoteliali che si sovrappongono il marchio punteggio. </li> &lt;li&gt; Si consideri la posizione del micro lacrime precedentemente segnalati e ruotare il blocco vuoto in modo che il più grande è a ore 6. Questo diventerà il cardine del lembo. </li><li> Utilizzando le pinze, afferrare la membrana di Descemet alle ore 12. Separare delicatamente la membrana di Descemet dallo stroma mediante pelatura verso la cerniera. Creare la cerniera bloccando la separazione 2 mm dal marchio punteggio. NOTA: i bordi periferici del lembo inizieranno a scorrere durante la separazione. (Figura 9). </li><li> Adagiare il lembo posteriore in posizione sul stroma. Utilizzare BSS e tampone lance per unscroll l&#39;endotelio e riportarlo alla sua posizione originale. (Figura 10A-C) </li><li> Rimuovere il liquido residuo dal tra la membrana di Descemet e stroma con lance tampone sterile in modo che il lembo rimane in posizione. (Figura 11) </li><li> Utilizzare lance tampone sterile per assorbire l&#39;umidità in eccesso dalla sclera vicino alla cerniera. Utilizza l&#39;indicatore pelle per disegnare unn punta di freccia sul cerchio sclera che punta al centro della cerniera, rimuovere l&#39;inchiostro in eccesso con un tampone sterile lancia. (Figura 12) </li><li> Rilasciare vuoto premendo il pistone della siringa collegata al blocco vuoto. Mentre il vuoto è disinserito, utilizzare pinze per rimuovere cornea dal blocco vuoto. </li><li> Sollevare il coperchio della camera di visualizzazione utilizzando un foglio quadrato come una barriera. Posizionare la cornea nella camera di osservazione, lato endoteliale, e sostituire il coperchio della camera di osservazione. </li><li> Ripetere i passaggi precedenti procedura con compagno di cornea, se applicabile. Usare una garza per pulire il blocco vuoto prima di elaborare il secondo tessuto. </li><li> Serrare il coperchio della camera di osservazione (s) e rimuovere il tessuto dalla zona di lavorazione. </li><li> Abbattere il campo sterile da cessione di articoli secondo Biologicamente Piano di gestione dei rifiuti. Rimuovere i guanti contaminati, e abito. Lavarsi le mani e indossare guanti non sterili. </li><li> Eseguire post-cut valutazione lampada a fessura e la microscopia speculare della cornea (s)e registrare i risultati. </li></ol>

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Hassan Tausif e il dottor Navasuja Chandrasekaran hanno nulla da rivelare. Drs. Mian, Shtein, e Woodward sono dirigenti medici per la Banca degli Occhi del Michigan. Mr. Mavin, il signor Tito, e la signora Johnson sono dipendenti di Midwest Banche degli Occhi.

Lo strato di cellule endoteliali corneali gioca un ruolo fondamentale nel mantenimento della chiarezza della cornea attraverso la disidratazione. Malattie delle cellule endoteliali possono provocare significativa compromissione visiva. DMEK mira a sostituire le cellule endoteliali malate con un innesto donatore costituito da membrana e strato di cellule endoteliali di Descemet. Donatori preparazione dei tessuti con un DM intatta e adeguata conta delle cellule endoteliali sono fondamentali per la sopravvivenza del tessut...

Cheratoplastica endoteliale (EK) si è rapidamente sostituito cheratoplastica perforante (PKP), come la procedura di scelta per il trattamento di malattie endoteliali rappresentano oltre il 50% di tutti i trapianti eseguiti negli Stati Uniti nel 2012 6. PKP è limitata dalla riabilitazione visiva prolungato con alta astigmatismo e l&#39;instabilità di rifrazione, la perdita di integrità globo e le complicanze legate sutura. Procedure primi EK generazione, tra cui Profondo lamellare endoteliale Cheratoplastica (DLEK) coinvolto dissezione manuale di stroma corneale con trapianto di tessuto dello spessore del donatore parziale. Queste procedure sono riusciti a trapianto endoteliale tessuto del donatore, pur mantenendo una superficie corneale integro ma erano tecnicamente impegnativo e portato a limitata acuità visiva meglio corretta a causa di un irregolare della cornea lamellare 1 interfaccia. La procedura EK attuale di scelta è di Descemet Stripping Endothelial Keratoplasty (DSEK) che offre clar cornealelità con recupero più rapido della visione, minimizza postoperatorio errore di rifrazione e astigmatismo, e diminuisce il rischio di deiscenza della ferita traumatica, pur mantenendo la superficie corneale 7. Questa procedura comporta la rimozione della membrana di Descemet e l&#39;endotelio malata e la sostituzione con parziale donatore spessore del tessuto corneale comprendente un nuovo strato di cellule endoteliali. La cornea del donatore è sezionato con un microcheratomo per preparare il tessuto posteriore, essendo trapiantato 8. Preparazione del tessuto donatore dall&#39;occhio-banche è stato determinante per la rapida crescita e, probabilmente, il successo di questa procedura. Il prossimo aumento di 16 volte nelle procedure DSEK negli Stati Uniti tra il 2005 e il 2012 corrisponde a quasi la metà del tessuto in corso di preparazione da parte delle banche degli occhi-6. Anche se DSEK può migliorare l&#39;acuità visiva a 20/40 o meglio, la maggior parte dei pazienti non raggiungono 20/20 a causa di interfaccia stromale foschia e maggiore lucedisperdere l&#39;aggiunta di donatore del tessuto stromale 7. La tecnica chirurgica EK è progredita al di Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) che prevede il trapianto di membrana unico donatore di Descemet (DM) ed endotelio. Questa procedura ha una maggiore percentuale di pazienti che raggiungono 20/20, più veloce recupero visivo, e un minor rischio di rigetto endoteliale 9. Tuttavia, la preparazione del tessuto del donatore è più difficile a causa delle dimensioni più sottili innesto.

<table><tbody><tr><td>VisionBlue</td><td>D.O.R.C., Zuiland, Paesi Bassi</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Barron punzone a vuoto</td><td>Katena, Denville, New Jersey</td><td>K20-2112</td><td></td></tr></tbody></table>

corneale preparazione donatore di tessuti per di descemet membrane endothelial keratoplasty

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Di Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) è una forma di trapianto di cornea in cui solo uno strato di singola cellula, l&#39;endotelio corneale, insieme alla sua membrana basale (membrana di Descemet) viene introdotto sul stroma posteriore del destinatario 3. A differenza di Descemet Stripping Automated Endothelial Keratoplasty (DSAEK), dove viene introdotto stroma donatore aggiuntivo, viene creata alcuna interfaccia innaturale stroma-to-stroma. Come risultato, la naturale anatomia della cornea è conservato il più possibile consentendo un migliore tempo di recupero e acuità visiva 4. Cheratoplastica endoteliale (EK) è la procedura di scelta per il trattamento della disfunzione endoteliale. I vantaggi di EK includono un rapido recupero della visione, la conservazione dell&#39;integrità oculare e il minimo cambiamento di rifrazione a causa di uso di una piccola incisione periferica 1. DSAEK utilizza tessuto del donatore preparato con parziale stroma spessore e endotelio. La rapida success e l&#39;utilizzo di questa procedura può essere attribuito alla disponibilità di eye-banca preparati tessuti pretagliati. I vantaggi di preparazione eye-banca del tessuto del donatore includono l&#39;eliminazione del bisogno di attrezzature specializzate in sala operatoria e la disponibilità di back up tessuto del donatore in caso di perforazione del tessuto durante la preparazione. Inoltre, la preparazione ad alto volume di tessuto del donatore da parte di tecnici eye-Banca può fornire una migliore qualità del tessuto del donatore. DSAEK può aver limitato migliore acuità visiva corretta a causa della creazione di una interfaccia stromale tra il donatore e il ricevente della cornea. L&#39;eliminazione di questa interfaccia con il trapianto di membrana unico donatore di Descemet e l&#39;endotelio nella DMEK possono migliorare i risultati visivi e ridurre le complicanze dopo EK 5. Simile a DSAEK, successo a lungo termine e l&#39;accettazione di DMEK dipende dalla facilità di disponibilità di pretagliati, eye-banca preparato tessuto del donatore. Qui vi presentiamo un approccio graduale alla preparazione dei tessuti del donatore che possono ridurre alcuni barriERS oculari banche affrontano nella fornitura di innesti DMEK.

La corretta separazione dei DM e endotelio da stroma è essenziale nella preparazione di tessuti pretagliati per DMEK. Cinquanta cornee dei donatori con una età media di 65 ± 6 anni (range 55-75), la morte di tempo di elaborazione di 5,9 ± 2,3 giorni (range 1-10) e la densità delle cellule endoteliali (ECD) di 2.616 ± 321 cellule / mm 2 ( gamma 2,049-3,247) sono stati utilizzati per valutare la fattibilità e la riproducibilità della tecnica di preparazione chirurgica da due tecnici della banca degli occhi. Il ...

Cheratoplastica endoteliale è una tecnica chirurgica in continua evoluzione come risultato progressi nel trapianto di innesti sottili con ogni successione 1. Qui vi presentiamo una tecnica per la dissezione dei tessuti manuale controllato per consentirne la sicura separazione e ripetibile di endotelio e la membrana di Descemet da donatori pulsanti corneosclerale per il trapianto 2.

Corneale Preparazione donatore di tessuti per di Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

L'obiettivo generale di questa procedura è preparare il tessuto endoteliale Demas per l'inserimento del DMEC. Ciò si ottiene eseguendo prima una trapanazione parziale e applicando la macchia per visualizzarla. Successivamente, viene eseguita una dissezione parziale a 360 gradi sulla linea TATed tra lo stroma S e la membrana del dema.Quindi la membrana di Dema viene staccata manualmente dal letto stromale, lasciando attaccata solo una piccola cerniera. Infine, la membrana di Demas viene restituita al letto stromale e viene rimosso qualsiasi liquido residuo tra di loro. In definitiva, la kerplastica endoteliale della membrana Demas che utilizza preparati di tessuto pretagliati è una forma sicura e ripetibile di dissezione manuale controllata dei tessuti utilizzata per trattare la malattia endoteliale.Il vantaggio principale della banca degli occhi che prepara il tessuto donatore di plastica endoteliale a membrana decimata è che riduce il rischio di perdita di tessuto nella preparazione e migliora l'efficienza in sala operatoria per il chirurgo. In generale, i chirurghi in ciascuna di queste tecniche possono avere difficoltà all'inizio perché possono avere difficoltà a evitare di stra

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Il documento descrive una tecnica semplificata per corneale accise e di sviscerare i tessuti della retina dal globo oculare di donatori cadaveri umani. La tecnica qui descritta aiuterà a accise tessuti di buona qualità da usare per il trapianto, a fini chirurgici o di ricerca senza danneggiare altri tessuti del globo oculare.

Una tecnica semplificata per<em&gt; In situ</emEscissione&gt; della cornea e l&#39;eviscerazione del tessuto retinico dal globo oculare umano

Endoteliale trapianto di cornea è una tecnica chirurgica per il trattamento di patologie corneali posteriori. Dissezione microcheratomo meccanico per preparare risultati in tessuto più sottili, innesti più simmetrici con minore perdita di cellule endoteliali ed i risultati migliori. Dissezioni può essere effettuata presso la banca degli occhi prima dell'intervento trapianto di cornea.

Preparazione del tessuto corneale dei donatori per Keratoplasty Endothelial

Riportiamo una tecnica per la realizzazione di micropockets all'interno membrane elettrofilate in cui studiare il comportamento delle cellule. In particolare, si descrive una combinazione di microstereolithography e elettrofilatura per la produzione di PLGA (Poly (lattide-co-glicolico)) dispositivi biomateriale corneali dotati microfeatures.

Combinazione di Microstereolithography e Electrospinning per la Produzione di Membrane Equipaggiato con nicchie per la rigenerazione della cornea

I topi sono stati utilizzati come modello per studiare molte forme di trapianto, incluso il trapianto di cornea.  In questo rapporto descriviamo un modello murino sia per il trapianto di cornea acuto che per quello tardivo.

Murini trapianto di cornea: Un modello per studiare la forma più comune di trapianto di organi solidi

Nel trapianto endoteliale viene proposta una procedura completamente laser. La tecnica chirurgica si basa sull'utilizzo di un laser a femtosecondi per preparare il tessuto donatore. La tecnica di saldatura laser viene quindi utilizzata per fissare l'endotelio del donatore nella posizione corretta.

Un &quot;All-laser&quot; Endothelial Transplant

Un esempio di terapia genica adenovirale nelle cornee umane in coltura di organi diabetici viene presentato verso la normalizzazione della guarigione ritardata delle ferite e l'espressione marcatamente ridotta dei marcatori delle cellule staminali epiteliali in queste cornee. Descrive anche l'ottimizzazione di questo processo in colture epiteliali limbari arricchite con cellule staminali.

Adenovirale Terapia genica per diabetici cheratopatia: Effetti sulla guarigione delle ferite e Stem Cell Marker Expression in Human Organ cornee-coltura e le cellule epiteliali Limbal

Questo protocollo descrive un romanzo tridimensionale in vitro modello, cui sono coltivate cellule stromal corneale e cellule neuronali differenziate insieme per assistere nell'esame e nella comprensione delle interazioni tra i due tipi cellulari.

Ingegneria tissutale corneale: Un In Vitro modello delle interazioni Stromal-nervo della Cornea umana

Descriviamo l'uso della microscopia a coerenza ottica a campo completo come metodo per la valutazione di alta qualità dello stroma del donatore corneale. Questo protocollo può essere utilizzato per identificare caratteristiche indicative di salute o malattia e mira a migliorare lo screening e la selezione dei tessuti donatori e quindi i risultati della cheratoplastica.

Microscopia a coerenza ottica a campo intero per l'analisi istologica delle caratteristiche stromali negli innesti corneali

Qui, presentiamo un protocollo per staccare le cellule endoteliali corneali (CEC) dalla membrana di Descemet (DM) utilizzando un laser neodymium:YAG (Nd:YAG) come modello di malattia ex vivo per la cherata toropatia (BK).

Sviluppo di un modello sperimentale non invasivo e assistito dal laser della perdita di cellule endoteliali corneale

Questo protocollo descrive i passaggi critici necessari per stabilire e coltivare colture di cellule endoteliali corneali da espianti di tessuto umano o o novino. Viene inoltre presentato un metodo per la subcultura delle cellule endoteliali corneali su biomateriali membranosi.

Crescita degli strati cellulari endoteliali umani e ovini sulle membrane biomateriali

Descemet's Stripping Only è una procedura sperimentale in cui i pazienti con guttae corneale centrale derivanti dalla distrofia corneale endoteliale di Fuchs hanno la membrana di Descemet spogliata per le cellule periferiche per rigenerare lo strato endoteliale. Presentiamo una nuova metodologia che simula il DSO nelle cornee umane distrofiche ex vivo con guarigione accelerata stimolata da eFGF1 (NM141).

Un modello di coltura di organi corneali umani dello stripping di Descemet solo con guarigione accelerata stimolata dal fattore di crescita dei fibroblasti ingegnerizzato 1

Impara la preparazione manuale del tessuto endoteliale per la cheratoplastica endoteliale con membrana di Descemet. Questa tecnica controllata migliora la sicurezza e la ripetibilità della dissezione per il trapianto corneale.

Corneale Preparazione donatore di tessuti per di Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty

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