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DOI: 10.3791/51998-v
Stanley Borowicz1, Michelle Van Scoyk2, Sreedevi Avasarala2, Manoj Kumar Karuppusamy Rathinam2, Jordi Tauler2, Rama Kamesh Bikkavilli2, Robert A. Winn2,3
1Department of Hematology and Oncology,University of Illinois at Chicago, 2Department of Pulmonary, Critical Care, Sleep, and Allergy,University of Illinois at Chicago, 3Jesse Brown Veterans Affairs Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Il saggio di formazione di colonie di agar morbido è un metodo utilizzato per confermare la crescita in vitro indipendente dall'ancoraggio cellulare. L'obiettivo di questo protocollo è quello di illustrare un metodo rigoroso per la rilevazione del potenziale tumorigenico delle cellule trasformate e degli effetti soppressivi tumorali delle proteine sulle cellule trasformate.
L'obiettivo generale di questa procedura è quantificare la crescita indipendente dall'ancoraggio cellulare. Ciò si ottiene placcando prima uno strato di agar sulla piastra di coltura cellulare e lasciandolo indurire. Il secondo passo consiste nell'impiattare una miscela di cellule in agar sopra lo strato di agar precedente.
Successivamente, le cellule possono formare colonie per un periodo di alcune settimane. Il passaggio finale consiste nella colorazione delle colonie per la visualizzazione e la quantificazione. In definitiva, il saggio di formazione di colonie di agar morbido viene utilizzato per mostrare la crescita indipendente di Anchorage come indicazione della trasformazione cellulare.
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