Il Coniglio Blood-shunt modello per lo studio di acuta e sequele tardive di emorragia subaracnoidea: Aspetti tecnici

L'obiettivo generale di questa procedura è stabilire un modello indipendente di pressione intracranica da parte dell'esaminatore, o shunt sanguigno controllato da ICP, emorragia subaracnoidea acuta o SAH nel coniglio. Ciò si ottiene incannulando prima l'arteria succlavia. Nella seconda fase, viene eseguita l'angiografia a sottrazione digitale, quindi le sonde di neuromonitoraggio e un ago di accesso spinale vengono posizionati nella fase finale.

L'ago di accesso spinale e l'arteria succlavia sono collegati a uno shunt per indurre l'esaminatore, l'ICP indipendente controlla l'SAH acuta, in definitiva il flusso sanguigno cerebrale ICP o CBF e la risposta cardiorespiratoria dell'animale all'ASH acuta possono essere monitorati. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo neurovascolare, come ad esempio il modo in cui la lesione cerebrale precoce e il campione ritardato del vaso cerebrale contribuiscono all'esito del parto e alla mortalità. Dopo l'emorragia subica aneurismatica Iniziare posizionando il coniglio sedato in posizione supina con entrambe le zampe anteriori e posteriori fissate alla superficie operatoria.

Installare un elettrocardiogramma a tre canali in quanto tale. Posizionare tre elettrodi sottocutanei in forma triangolare sul lato ventrale del coniglio. Successivamente, disinfettare la pelle con iodio povidone o simile sul muscolo pittorico destro attorno al terzo medio della clavicola, coprire l'animale con fogli sterili.

Dopo aver infiltrato il muscolo pettorale con anestetici locali, praticare un'incisione cutanea paramous laterale ed esporre il muscolo pettorale. Dividere la fibra muscolare superiormente e inferiormente mediante dissezione smussata fino a quando l'arteria succlavia può essere visualizzata. Quindi, al microscopio, sezionare l'arteria succlavia utilizzando due micro pinze diritte e quindi legarla distalmente e posizionare una legatura attorno all'estremità prossimale esposta utilizzando quattro suture in polifilamento O e una micro pinza curva.

Quindi, usa una micro forbice curva per incidere la parete dell'arteria succlavia e incannulare l'arteria retrograda. Quindi fissare il catetere mediante legatura a doppio nodo verso la legatura prossimale e, inoltre, fissare il catetere mediante legatura a doppio nodo verso la legatura distale al fine di prevenire la torsione o la flessione arteriosa delle parti prossimali dell'arteria e per evitare scivolamenti o sanguinamenti massicci. Quindi raccogliere campioni di sangue per lo stato dell'emogasanalisi arteriosa e monitorare continuamente i parametri cardiovascolari e respiratori standard.

Posizionare un dispositivo di dimensionamento esterno sugli angoli della mandibola per calibrare l'angiogramma e consentire un confronto esatto delle misurazioni post hoc della linea di base e del diametro del vaso di follow-up. Quindi eseguire l'iniezione retrograda intra arteriosa in bolo di IOP non ionica attraverso l'arteria cannulata e lavare immediatamente la cannula con soluzione fisiologica per prevenire l'occlusione della scala. Dopo l'angiografia di sottrazione digitale al basale, riposizionare il coniglio in posizione prona, facendo attenzione a non manipolare o riposizionare il catetere intra-arterioso.

Collega il monitoraggio della pressione arteriosa e inizia a monitorare continuamente i parametri cardiovascolari e respiratori standard, tra cui elettrocardiogramma, pressione arteriosa, saturazione periferica di ossigeno, anidride carbonica espiratoria e temperatura interna. Trasferisci i dati tramite l'interfaccia di uscita analogica a un data logger con convertitore digitale analogico e memorizzali. Posizionare la testa in un supporto con un angolo di 30 gradi orientato verso il basso, quindi disinfettare la pelle sopra la testa e il collo con iodio povidone tre volte per un minuto ciascuna.

Dopo aver coperto la nuova area chirurgica con teli sterili, praticare un'incisione cutanea sulla linea mediana. Inserire un piccolo divaricatore chirurgico per realizzare tre osteotomie rotonde in base ai punti di riferimento esterni del cranio e calibrare le sonde di neuromonitoraggio. Posizionare la pressione intercranica e le punte di neuromonitoraggio del flusso sanguigno doppler laser interparenchimali e sigillare i fori della fresa con cera ossea per mantenere il fluido cranico stretto e per consentire una condizione di cranio chiuso al fine di mantenere lo stato stazionario di I-C-P-P-P e MAP.

Successivamente, inserire un ago di accesso spinale pediatrico da 22 gauge 40 millimetri transcutaneo nella cisterna magna. Quindi far scorrere l'ago verso il basso lungo la protuberanza occipitale esterna ossea fino a quando non viene rilevata una fessura. Confermare il corretto posizionamento dell'ago osservando il gocciolamento spontaneo del liquido cerebrospinale con la testa del coniglio inclinata verso il basso con un angolo di 20-30 gradi per alcuni minuti.

Ora, utilizzare un tubo di monitoraggio della pressione riempito di sangue per collegare l'ago di accesso spinale nella cisterna magna al rubinetto di arresto a tre vie collegato all'arteria succlavia precedentemente cateterizzata. Quindi aprire la connessione dello shunt tra l'arteria succlavia e l'IC sterno magna per indurre l'emorragia subaracnoidea. Dopo l'apertura dello shunt, la pressione intracranica inizia ad aumentare fino a valori vicini alla pressione arteriosa diastolica.

A quel punto, il flusso nello shunt si interrompe se il plateau intercranico viene mantenuto per più di 10 secondi, o se la pressione diminuisce spontaneamente, chiudere lo shunt dopo che la pressione intercranica ha raggiunto il suo picco, mantenere l'ago di accesso spinale in posizione fino a quando la pressione non ritorna a uno stato stazionario vicino ai valori basali. Infine, rimuovere l'ago sottile del flusso sanguigno cerebrale e le sonde di pressione intracranica. Tappare i fori della fresa con cera ossea, quindi utilizzare il solfato di neomicina per eseguire una rigorosa irrigazione della ferita e suturare la pelle.

Per prima cosa, sutura la pelle sopra i fori della fresa. Quindi, dopo il riposizionamento del coniglio in posizione supina e la rimozione del catetere dell'arteria succlavia, suturare il muscolo pettorale e la pelle. Il modello di shunt sanguigno rabbioso di SAH descritto in questo rapporto produce lesioni cerebrali precoci nell'ippocampo, nella corteccia basale e nella vascolarizzazione cerebrale già 24 ore dopo la lesione, inducendo una caratteristica distribuzione del sangue.

Inoltre, questo modello innesca gradi da moderati a gravi di vasospasmo cerebrale ritardato del terzo giorno. Dopo l'induzione dell'SAH, il tasso di mortalità della procedura è di circa il 20% a causa di arresto respiratorio o grave bradicardia al momento dell'SAH acuta durante la quale gli animali sono in anestesia completa. Da un punto di vista tecnico, questo modello di shunt sanguigno consente sia l'induzione SAH indipendente dall'esaminatore che quella controllabile.

Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di fissare saldamente questa arteria sottoclavo, prendere una grande macchina e riposizionare l'animale ed essere molto gentili e pazienti durante l'agopuntura Cy Sternum.