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Primer per immunoistochimica su Cryosectioned Rat tessuto cerebrale: Esempio colorazione per Micr...
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JoVE Journal Neuroscience
Primer for Immunohistochemistry on Cryosectioned Rat Brain Tissue: Example Staining for Microglia and Neurons

Primer per immunoistochimica su Cryosectioned Rat tessuto cerebrale: Esempio colorazione per Microglia e neuroni

Full Text
33,192 Views
07:30 min
May 12, 2015

DOI: 10.3791/52293-v

Megan N. Evilsizor1,2, Helen F. Ray-Jones1,3, Jonathan Lifshitz1,2,4,5, Jenna Ziebell1,2

1Department of Child Health,University of Arizona College of Medicine - Phoenix, 2BARROW Neurological Institute,Phoenix Children's Hospital, 3Department of Biology and Biochemistry,University of Bath, 4Neuroscience Program,Arizona State University, 5Phoenix VA Healthcare System

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo protocollo di livello introduttivo descrive i reagenti, le attrezzature e le tecniche necessarie per completare la colorazione immunoistochimica del cervello dei roditori, utilizzando come esempio marcatori per microglia ed elementi neuronali.

L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di utilizzare l'immunoistochimica per visualizzare le proteine di interesse. Per questo esempio, IBA uno per la microglia e pan neuronale per i neuroni. Ciò si ottiene inserendo prima le sezioni preparate in una soluzione di blocco per evitare un legame non specifico.

In una seconda fase, gli anticorpi, che riconoscono le due diverse proteine di interesse, vengono posizionati sulle sezioni durante la notte. Le sezioni successive vengono lavate e incubate in anticorpi secondari per aggiungere tag fluorescenti agli anticorpi primari. I risultati della doppia marcatura possono evidenziare colorazioni microgliali all'interno di campi di neuroni.

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Neuroscienze Numero 99 Immunoistochimica Iba1 Pan-neuronali Fluorescenza doppia etichettatura Microglia Neuron Ratto anticorpo

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