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DOI: 10.3791/52293-v
Megan N. Evilsizor1,2, Helen F. Ray-Jones1,3, Jonathan Lifshitz1,2,4,5, Jenna Ziebell1,2
1Department of Child Health,University of Arizona College of Medicine - Phoenix, 2BARROW Neurological Institute,Phoenix Children's Hospital, 3Department of Biology and Biochemistry,University of Bath, 4Neuroscience Program,Arizona State University, 5Phoenix VA Healthcare System
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Questo protocollo di livello introduttivo descrive i reagenti, le attrezzature e le tecniche necessarie per completare la colorazione immunoistochimica del cervello dei roditori, utilizzando come esempio marcatori per microglia ed elementi neuronali.
L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di utilizzare l'immunoistochimica per visualizzare le proteine di interesse. Per questo esempio, IBA uno per la microglia e pan neuronale per i neuroni. Ciò si ottiene inserendo prima le sezioni preparate in una soluzione di blocco per evitare un legame non specifico.
In una seconda fase, gli anticorpi, che riconoscono le due diverse proteine di interesse, vengono posizionati sulle sezioni durante la notte. Le sezioni successive vengono lavate e incubate in anticorpi secondari per aggiungere tag fluorescenti agli anticorpi primari. I risultati della doppia marcatura possono evidenziare colorazioni microgliali all'interno di campi di neuroni.
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