Umano cellule staminali pluripotenti Basato Tossicità per lo sviluppo saggi per Chemical Screening e Safety Systems Biology generazione dati

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di descrivere due sistemi di test di tossicità per lo sviluppo in vitro basati su cellule staminali embrionali umane e studi sul trascrittoma. Ciò si ottiene coltivando prima cellule staminali embrionali umane su fibroblasti embrionali di topo. Il secondo passo consiste nel lasciare che le cellule staminali embrionali umane formino corpi di Embry in cui possono generare cellule di tutti e tre gli strati germinali o differenziarle in progenitori neuroectodermici.

Successivamente, i corpi embrionali o progenitori neuroectodermici vengono trattati con composti di interesse a diverse concentrazioni durante la differenziazione. I passaggi finali consistono nel valutare la vitalità delle cellule e isolare l'RNA. In definitiva, l'analisi dei microarray del trascrittoma viene utilizzata per mostrare i cambiamenti nell'espressione dell'RNA delle cellule trattate con un composto di interesse rispetto alle cellule di controllo non trattate. Sulla base di cellule staminali neoniche umane e macro aree di DNA, abbiamo stabilito una metodologia in vitro che consente il monitoraggio degli effetti rilevanti della tossicità per lo sviluppo umano.