Rimozione di Oligoelementi per Cupric nanoparticelle di ossido di uranio da In Situ Recupero Bleed Acqua e il suo effetto sulla vitalità cellulare

L'obiettivo generale di questa procedura è esaminare il trattamento con nanoparticelle di ossido rameico come processo di rimozione dei contaminanti nella produzione, nel spurgo dell'acqua e nel valutarne la citotossicità utilizzando cellule umane in coltura. Ciò si ottiene trattando prima l'acqua di spurgo di produzione con nanoparticelle di ossido rameico. Le variazioni di concentrazione dei singoli elementi vengono valutate prima e dopo il trattamento.

Successivamente, i terreni di coltura cellulare concentrati vengono diluiti con acqua di spurgo di produzione non trattata o ossido rameico. Acqua di spurgo di produzione trattata con nanoparticelle oltre a supplementi standard di coltura cellulare per preparare il sanguinamento di produzione non trattato con terreni di prova, mezzi acquosi e ossido rameico, sanguinamento di produzione trattato con nanoparticelle. Il terreno acquoso viene quindi applicato alle cellule renali ed epatiche umane e alla coltura e la vitalità viene misurata nell'arco di sette giorni.

In definitiva, l'M-T-T-S-A dimostra la rimozione di arsenico, selenio, vanadio e uranio dalla produzione. Il sanguinamento dell'acqua da parte delle nanoparticelle di ossido rameico è associato a una maggiore vitalità delle cellule renali ed epatiche umane. Questo è il primo studio a studiare la rimozione di contaminanti specifici utilizzando nanoparticelle di ossido di rame, valutando al contempo i cambiamenti di citotossicità associati alla rimozione in un formato di coltura cellulare.

Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti è che il campione ambientale, così come esiste in natura, viene testato insieme alle nanoparticelle in un formato idro putt economico. Le nanoparticelle di ossido rameico testate in questo studio possono essere applicate ad altri sistemi di acque sotterranee come le acque sotterranee domestiche associate a piccole comunità. La rigenerazione delle nanoparticelle di ossido rameico crea meno rifiuti e riduce al minimo i problemi di smaltimento dei rifiuti.

Per iniziare questa procedura, preparare le nanoparticelle di ossido rameico e raccogliere l'acqua di spurgo di produzione o PBW come descritto nel protocollo di testo per trattare il PBW con nanoparticelle di ossido rameico a 50 milligrammi delle nanoparticelle preparate in un tubo conico da 50 millilitri, seguito da 50 millilitri di PBW sigillare il tubo e reagire per 30 minuti su un agitatore orbitale da banco a una centrifuga a 250 giri/min, le provette del campione a 250 volte G per 30 minuti alterano la velocità e il tempo della centrifuga a seconda della nanoparticella per garantire che le nanoparticelle diventino compatte nella provetta da centrifuga Dopo la centrifugazione, filtrare il surnatante utilizzando una siringa da 0,45 micron. I campioni filtrati vengono quindi inviati per l'analisi elementare Per preparare i terreni di coltura cellulare. Innanzitutto, usa l'acqua RO del laboratorio.

Questi includono PBW Next trattato con nanoparticelle di PBW o ossido CIC al 100%, 75%, 50% e 25% a 25 millilitri di 10 X-E-M-E-M concentrato a 190 millilitri di ro. Così come ciascuna delle concentrazioni di PBW trattate e non trattate. Regolare il pH di ciascuna soluzione a 7,4 con idrossido di sodio o acido cloridrico.

Quindi integrare ogni concentrazione di terreni PBW plus non trattati e trattati, nonché i mezzi di controllo RO con componenti standard elencati nel protocollo di testo. Dopo ogni concentrazione di terreno PBW plus non trattato e non trattato e di acqua di controllo RO più terreno, l'osmolalità viene regolata. Una goccia di ciascuna soluzione viene applicata su un disco di carta privo di soluti e il disco viene posto in un OSM ter a pressione di vapore.

L'osmolalità viene quindi regolata tra 290 e 310 milli osmoli per chilogrammo aggiungendo acqua RO. Infine, filtrare ogni soluzione utilizzando un'unità filtrante sottovuoto da 22 micron a punto zero e conservarla a quattro gradi Celsius. Preparare una coltura di cellule renali embrionali umane e cellule di carcinoma epatocellulare umano due o tre giorni prima di essere piastre.

Nel 96. Piastre a pozzetti secondo i produttori e le istruzioni dopo aver rimosso le cellule dai loro piatti di coltura, utilizzando la centrifuga di tripsina a 1000 volte G per cinque minuti e decantare la tripsina. Aggiungere cinque millilitri di soluzione salina tamponata con fosfato o PBS e mescolare le cellule per ottenere una soluzione a singola cellula.

Quindi applicare 20 microlitri della soluzione a cellula singola su un emocitometro per ottenere una conta cellulare per millilitro di soluzione dopo la centrifugazione. Anche in questo caso, come prima e con la decantazione, il PBS utilizzava il risciacquo delle cellule alla quantità appropriata di un X-E-M-E-M per regolare la concentrazione delle cellule a 500 cellule per 100 microlitri per pozzetto. Successivamente, riempire i pozzetti perimetrali della piastra con 200 microlitri di PBS per controllare l'evaporazione.

Posizionare le celle a una densità di 500 celle per pozzetto, aggiungendo 100 microlitri a ciascun pozzetto ad eccezione dei pozzetti perimetrali. Incubare le cellule per 24 ore a 37 gradi Celsius, consentendo loro di riprendersi prima di eseguire la linea di base. Letture MTT della densità cellulare.

Eseguire le letture MTT di base della densità cellulare rimuovendo il terreno di semina dalla prima colonna e aggiungendo 100 microlitri di MTT ai pozzetti per un'ora. Dopo un'ora. Rimuovere l'MTT e aggiungere 100 microlitri di dimetilsolfossido per sciogliere l'MTT Informason prodotto dalle cellule vitali.

Quindi leggere la densità ottica della prima colonna a una lunghezza d'onda di assorbimento di 570 nanometri. Per ottenere una lettura di base, aggiungere una soluzione per piastra. Sostituire il terreno di semina con 100 microlitri di un mezzo di controllo X-E-M-E-M RO e di ciascuna delle concentrazioni di PPW plus trattate e non trattate.

Incubare le cellule nelle loro concentrazioni di prova o nelle soluzioni di controllo per un totale di sette giorni al giorno. Dopo la lettura MTT di base, rimuovere le soluzioni di controllo e di prova dalla colonna successiva della rispettiva piastra e ripetere il protocollo MTT. Ripeti il protocollo ogni giorno per una media di sette giorni.

I risultati OD sono stati ogni riga e riportano in funzione del tempo per generare una curva di crescita di sette giorni per valutare l'effetto della chelazione del rame sulla vitalità cellulare e sull'ossido rameico. Il PBW più i terreni trattati con nanoparticelle seguono la stessa procedura tranne che a 100 micromolari d penicillina per controllare e testare le soluzioni prima di aggiungere le soluzioni alle rispettive piastre. Come passaggio finale, eseguire l'analisi dei dati utilizzando un software grafico scientifico, il trattamento con nanoparticelle di ossido rameico ha rimosso arsenico, selenio, uranio e vanadio dalla speciazione PBW.

I risultati della modellazione supportano i risultati analitici che proteggono che nel PBW il 99% dell'arsenico, il 94% del selenio e il 99% del vanadio sono presenti come specie negative in grado di assorbire le nanoparticelle di ossido rameico. Tuttavia, solo il 35,5% delle specie di uranio disciolto sono caricate negativamente, il che limiterebbe l'assorbimento dell'uranio all'ossido rameico. La vitalità delle nanoparticelle è stata compromessa in modo dipendente dalla concentrazione nelle cellule coltivate in PBW plus terreni non trattati, mentre il trattamento con nanoparticelle di ossido rameico ha migliorato la vitalità cellulare in entrambe le linee cellulari.

La crescita cellulare di Heck e hep il quinto giorno nei terreni di controllo mostra cellule confluenti ben attaccate dall'aspetto sano. Al contrario, diamine e cellule coltivate in non trattate. PBW più i media sono meno confluenti mostrati, distacco e appaiono arrotondati o malsani.

Inoltre, diamine, e le cellule sono cresciute in ossido di capic. I terreni PBW plus trattati con nanoparticelle hanno mostrato una migliore cofluenza, attaccamento e salute rispetto alle cellule coltivate in terreni PBW plus non trattati Seguendo questa procedura. Altri metodi di test di tossicità, come la citometria a flusso, potrebbero essere utilizzati per rispondere a ulteriori domande sui cambiamenti meccanicistici, sulla citotossicità delle miscele prima e dopo il trattamento.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come testare l'efficacia di rameico e nanoparticelle nella rimozione di acqua, contaminanti e i suoi effetti sulla coltura cellulare. Tuttavia, è importante ricordare di monitorare le concentrazioni di rame nelle acque trattate.