Tutta vitreo Umore dissezione per l'analisi Vitreodynamic

L'obiettivo generale di questo procedimento è mostrare una tecnica efficace per isolare nuclei vitreali interi e intatti, insieme ai relativi cortex, da occhi di suino post mortem e nucleati. Questo risultato si ottiene innanzitutto rimuovendo mediante dissezione la congiuntiva peri-limbare ed esponendo la sclera. Nel secondo passaggio, si crea un lembo sclerale a tutto spessore, che viene poi ampliato.

Il coroide viene quindi separato dalla sclera e il tessuto corioretinico viene staccato dal vitreo. In definitiva, l'intera dissezione del nucleo e della corteccia vitreali intatti può essere utilizzata per studiare le proprietà fisiche, biomeccaniche e chimiche dell'umore vitreo. Il principale vantaggio di questa tecnica rispetto ad altri metodi esistenti, come le dissezioni parziali del vitreo, è che essa consente l'isolamento dell'intero nucleo e della corteccia vitreali intatti, mantenendo la struttura anatomica del vitreo. Iniziare fissando l'occhio enucleato, attraverso i tessuti eccedenti circostanti, su un piano di dissezione in polistirolo.

Una volta assicurato l'occhio, utilizzare pinzette fini e forbici microchirurgiche per incidere la congiuntiva a livello del limbus ed eseguire una dissezione ottusa staccandola dalla sclera. Tagliare la congiuntiva lungo il limbus mentre si procede con la dissezione ottusa, per consentire un'ulteriore dissezione. Rimuovere quindi tutta la congiuntiva, lasciandone solo una piccola quantità, tutto intorno all'occhio, in modo da esporre la maggior superficie possibile di sclera.

Successivamente, utilizzare il bisturi per effettuare delicatamente un'incisione sclerale lunga circa cinque millimetri, parallela e posta tre millimetri posteriormente al limbo, fino a quando la coroide fortemente pigmentata diventa visibile, in modo da creare un lembo sclerale. Quindi, dissezionare con cautela in modo ottuso il tessuto lungo il piano tra la sclera e la coroide, fino a quando è possibile spingere delicatamente la coroide verso l'interno per ampliare lo spazio tra i due tessuti. Utilizzando forbici microchirurgiche affilate, effettuare un'altra incisione sclerale perpendicolare alla prima, in modo da creare un'incisione a forma di T.

Quindi continuare a dissezionare in modo ottuso in senso circonferenziale per rimuovere il tessuto sclerale dalla coroide sottostante, e spingere delicatamente la coroide lontano dalla sclera per allargare il lembo. Dissezionare delicatamente e in modo ottuso la coroide dalla sclera finché l'incisione effettuata perpendicolarmente al limbo raggiunge il nervo ottico e l'incisione effettuata parallelamente al limbo copre almeno 45 gradi della circonferenza oculare. Utilizzare questo lembo per ripetere la dissezione ottusa sull'altro lato dell'occhio.

Quindi rimuovere entrambi i lembi sclerali per esporre un'ampia area della coroide. A questo punto, proseguire l'incisione lungo la circonferenza dell'occhio in modo ottuso. Separare la coroide dalla sclera mediante dissezione e rimuovere il tessuto residuo di coroide e retina all'interno della regione esposta.

Eseguire un'incisione nella coroide a partire dal nervo ottico. Quindi utilizzare una pinzetta per staccare delicatamente il tessuto dal corpo vitreo sottostante. Proseguire con dissecazione ottusa e staccare la coroide finché non si ottiene l'intero corpo vitreo intatto.

Quindi utilizzare il margine sclerale attaccato alla cornea per posizionare l'intero vitreo nella posizione desiderata. A questo punto, il vitreo dovrebbe essere ancora attaccato alla sclera anteriore e al cristallino. Infine, staccare delicatamente il vitreo dall'interno della sclera e attorno al cristallino.

Per rimuovere tutta la sclera, utilizzare uno strumento ottuso per asportare delicatamente la lente dal vitreo, come necessario. Seguire il protocollo appena dimostrato porterà a una dissezione del vitreo di successo, con il nucleo e la corteccia intatti, come evidenziato dai residui di retina aderenti alla corteccia del vitreo. In questa immagine, l'umore vitreo intero e intatto può quindi essere utilizzato in diversi modi per specifici esperimenti su viremia.

Ad esempio, in questo caso è stata studiata la velocità di diffusione dell'ossigeno in un umor vitreo integro e la corrispondente costante di tempo in presenza della corteccia vitrea. La diffusione dell'ossigeno è avvenuta in un intervallo di tempo più lungo. Non dimenticare che lavorare con materiali taglienti può essere pericoloso e che occorre sempre adottare precauzioni, come la manipolazione e lo smaltimento corretti, durante l'esecuzione di questa procedura.