I modelli chirurgici di reflusso gastroesofageo con Mice

L'obiettivo generale di questa procedura è creare modelli di reflusso gastroesofageo nei topi. Innanzitutto, viene mostrata la preparazione di un modello di reflusso gastrico, viene presentata la configurazione di un modello di reflusso misto, seguita dalla dimostrazione della preparazione di un modello di reflusso duodenale. In definitiva, il grado di danno esofageo indotto dai diversi modelli di reflusso può essere valutato mediante analisi istologica.

In generale, gli individui nuovi a questo farmaco avranno difficoltà a causa delle piccole dimensioni dell'esofago di topo per impostare il modello di reflusso gastrico. Dopo aver confermato il corretto livello di anestesia con il pizzico delle dita, utilizzare un tagliacapelli per radere l'area chirurgica e applicare un unguento sugli occhi dell'animale. Utilizzando la soluzione di Betadine, sterilizzare la pelle esposta.

Quindi praticare un'incisione di due centimetri sulla linea mediana superiore partendo dal processo xifoideo verso il basso verso l'ano. Quindi, apri la cavità addominale attraverso la linea mediana e usa un paio di forbici per rimuovere lo xifoide. Separare e tagliare i tessuti connettivi tra il fegato e lo stomaco.

Quindi legare e recidere il fascio di vasi tra la milza e il fondo. Quando il fondo oculare è stato completamente liberato, ruotare leggermente il tessuto verso sinistra per esporre il lato sinistro della giunzione gastroesofagea. Quindi, utilizzando un paio di forbici affilate, praticare un'incisione longitudinale di cinque millimetri sul muscolo lungo l'esofago distale per esporre l'epitelio.

Apri l'epitelio nella stessa direzione con tre incisioni per tagliare la maggior parte dei quattro stomachi. Successivamente, utilizzando un ago a punta conica, posizionare una sutura di prolina a otto O, prima attraverso l'esofago e poi attraverso i quattro ventri con un'accurata opposizione da mucosa a mucosa. In questa dimostrazione viene utilizzata una sutura a sei o prolina per migliorare la sua capacità, continuare a posizionare suture equidistanti, da tre a quattro millimetri di distanza dall'esofago attraverso i quattro stomaco fino a quando l'intera area è legata da un punto all'altro come illustrato dopo che l'ultima sutura è stata posizionata, utilizzare soluzione salina normale per liberare la cavità addominale da qualsiasi sangue e contenuto gastrico rimanente.

Quindi chiudere la parete addominale con punti di sutura in seta e la pelle con clip metalliche per impostare il modello a reflusso misto. Dopo aver esposto la giunzione gastroesofagea come appena dimostrato, separare delicatamente il lato dorsale dell'esofago dai vasi sanguigni dietro l'esofago. Passare una piccola punta di cotone tra l'esofago e i vasi sanguigni.

Quindi praticare due incisioni longitudinali di cinque millimetri sulla giunzione gastroesofagea e due incisioni longitudinali di cinque millimetri sul bordo anti-mesenterico lungo l'estremità prossimale del duodeno, adiacente ai pili. Successivamente, utilizzando suture in prolene ATO interrotte, sono state posizionate da tre a quattro suture sul lato dorsale e da due a tre suture sul lato anteriore per anastomosi le incisioni con un'accurata opposizione da mucosa a mucosa. Quindi rimuovere la punta tagliata, lavare la cavità addominale con soluzione fisiologica normale e chiudere la parete addominale e la pelle come appena dimostrato per impostare il modello di reflusso duodenale.

Dopo aver preparato un modello di reflusso misto come appena dimostrato, sollevare con cautela lo stomaco per esporre la parte posteriore del tessuto, quindi esporre i vasi sanguigni sul lato dorsale dell'esofago, legare e tagliare i vasi sanguigni, legare il duodeno al pori e legare e tagliare anche il mesenterio. Quindi rimuovere l'intero stomaco, lavare la cavità addominale con soluzione fisiologica normale e chiudere la parete addominale e la pelle. Al termine di ciascuno degli interventi chirurgici, posizionare gli animali su un termoforo con monitoraggio fino a quando, non si saranno completamente ripresi Quattro settimane dopo l'intervento, l'architettura dell'epitelio esofageo mostrerà danni da reflusso come osservato in queste immagini del tratto digestivo superiore.

Nei topi con reflusso gastrico misto o duodenale, l'epitelio diventa più spesso e la papilla si allunga rispetto agli animali di controllo, iperproliferazione delle cellule epiteliali e infiltrazione del tratto digestivo superiore da parte di cellule infiammatorie. Segni comuni di esofagite sono osservati nel modello di reflusso. Anche gli animali: una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in 20-30 minuti se eseguita correttamente.