Frequenza di miscelazione Scanner rilevamento magnetico per l'imaging particelle magnetiche in Planar Campioni

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di utilizzare scansioni di rilevamento magnetico misto bidimensionali per analizzare campioni biologici sottili contenenti particelle nanomagnetiche. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della biochimica e della diagnosi medica, come l'analisi di sezioni di tessuto che impiegano particelle nanomagnetiche come composto livellante. Il vantaggio principale di questa tecnica è che permette un incontro della distribuzione delle particelle nanomagnetiche.

A dimostrare la procedura saranno Eul-Gyoon Lim, Jae-chan Jeong e Jiho Chang, tre ricercatori del mio laboratorio. La testa di misura p-FMMD deve essere progettata in conformità con i protocolli di testo. I dettagli sono forniti su tutte le specifiche di cablaggio e avvolgimento.

Il montaggio e la configurazione sono descritti in dettaglio nel protocollo di testo. Ciò include la regolazione del bilanciamento delle alte frequenze e della tensione indotta. Successivamente, viene impostata l'elettronica di misura, che include la sezione di eccitazione, le sezioni del driver a bassa e alta frequenza e la sezione di rilevamento dell'FMMD.

Successivamente, vengono configurati il preamplificatore, il primo demodulatore, l'amplificatore intermedio con filtraggio, il secondo demodulatore e l'amplificatore finale con filtraggio. Infine, lo scanner 2D viene montato e interfacciato con un computer di controllo. Per questa procedura, avere particelle di magnetite con diametri di 50 nanometri e 100 nanometri e particelle di maghemite di 1 micron di diametro.

Lavare le soluzioni madre di particelle in acqua e raccogliere le particelle utilizzando un magnete. Scartare l'acqua e lavarli ciascuno altre due volte. Quindi, diluire le particelle in soluzioni di 25 milligrammi per millilitro utilizzando acqua distillata.

Dalla soluzione di particelle a 100 nanometri, fare una serie di diluizioni di cinque volte per concentrazioni di cinque, uno, 0,2 e 0,04 milligrammi per millilitro. Quindi, perforare pezzi di carta assorbente usando un punzone per biopsia. Quindi, immergere i punzoni di carta nelle diverse soluzioni di particelle a 100 nanometri per 30 secondi.

Dopo l'ammollo, lasciare asciugare i fustellatori di carta all'aria. Quindi, prepara pezzi ritagliati di nitrocellulosa di due per 18 millimetri. Immergere un pezzo di nitrocellulosa in una soluzione di particelle non diluita di un micron di diametro per 10-15 secondi e asciugare con aria non riscaldata.

Immergere l'altro pezzo di nitrocellulosa in due soluzioni di diverse concentrazioni per creare un gradiente di concentrazione e asciugarlo come l'altro. Infine, utilizzando l'azione capillare, caricare un tubo capillare con 30 microlitri di soluzione di particelle non diluita di 50 nanometri di diametro. Quindi, caricare un secondo capillare con 10 microlitri di una diluizione 20 volte delle stesse particelle.

La direzione di scansione deve essere la più corta delle due dimensioni planari. Impostare il punto iniziale e la lunghezza di scansione utilizzando i segni del righello sulla tavolozza. Inserire questi valori nel software di scansione, quindi impostare l'offset di scansione in modo che sia leggermente inferiore alla risoluzione spaziale ottenibile.

Quindi, impostare la velocità di scansione tenendo conto della riduzione del segnale che si verifica a causa del filtro passa-basso. Utilizzare un valore compreso tra uno e sette millimetri al secondo. Ora, imposta la distanza di passo.

Il tempo totale di scansione viene calcolato utilizzando una formula fornita nel protocollo di testo. Prima della scansione, fissare il campione con del nastro adesivo. Per la scansione, generare un file NVD per il programma di controllo del movimento.

Aprire il programma di controllo del movimento PMC e caricare il file NVD. Premere il pulsante Home per impostare i punti di origine meccanica. Chiudere il programma di controllo del movimento e tornare al programma dello scanner.

Quindi, esegui le scansioni. Per queste scansioni, l'intensità del segnale è stata analizzata in funzione della concentrazione di perle magnetiche e la velocità di scansione è stata di 10 millimetri al minuto. È stata trovata una forte correlazione tra la concentrazione della perlina e il segnale.

La relazione tra la velocità dello stadio di scansione e l'intensità del segnale è stata verificata utilizzando pallini di carta imbevuti di perline magnetiche. Segnali più alti sono stati ottenuti a velocità di scansione inferiori. Il confronto della scansione p-FMMD con un'immagine ottica di un campione di membrana di nitrocellulosa ha mostrato chiaramente l'utilità di p-FMMD come scanner MPI.

L'ampiezza della scansione è dovuta principalmente al profilo di sensibilità della testina di misura. Allo stesso modo, due capillari riempiti con diverse concentrazioni di particelle magnetiche sono stati fotografati e scansionati mediante p-FMMD. Chiaramente, le concentrazioni che differiscono di un fattore 20 sono facilmente distinguibili.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come analizzare 10 campioni contenenti particelle nanomagnetiche con la tecnica FMMD. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in circa un'ora se eseguita correttamente. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della biochimica e della diagnostica medica per esplorare la distribuzione delle particelle nanomagnetiche che piuttosto citano anticorpi specifici nel sistema degli organi.