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DOI: 10.3791/54162-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article describes a method for assessing the competition between bacterial and fungal pathogens for adherence to virus-infected HeLa cell monolayers. The technique allows for the examination of interactions among various prokaryotes, eukaryotes, and viruses.
Un metodo è descritto qui per la determinazione dell'associazione e della competizione inter-regno (batterica e fungina) per l'adesione ai monostrati di cellule HeLa infettate da virus. Questo protocollo può essere esteso a più combinazioni di procarioti, eucarioti e virus.
L'obiettivo generale di questo esperimento è misurare gli effetti che le cellule pre-infettate con HSV hanno sul successivo attacco di patogeni opportunisti batterici e fungini, ad esempio Staphylococcus aureus e Candida albicans. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave per quanto riguarda il ruolo che l'infezione virale cronica svolge nella regolazione dei rispettivi membri del microbioma ospite. Il vantaggio principale di questa tecnica è che l'interazione di più organismi può essere esaminata e quantificata nella fase iniziale per la formazione del biofilm, ovvero l'aderenza.
Le implicazioni di questa tecnica si estendono al controllo dei patogeni opportunisti colonizzanti, perché la precondizione dell'infezione da HSV con diffusione asintomatica è presente nella maggior parte della popolazione umana. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sul controllo dell'HSV del successivo legame microbico, può essere applicato anche ad altri sistemi come l'infezione da CMV e quella da adenovirus. Per iniziare, determinare la vitalità del virus HSV1 o HSV2 e la molteplicità dell'infezione, o MOI, mediante colorazione x-gal per ogni test sperimentale eseguito utilizzando un test di ingresso del virus reporter.
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