Name: Creazione di addominali aderenze nei topi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: Impara una procedura chirurgica affidabile per creare aderenze addominali nei topi. Questo metodo consente di studiare cellule, citochine e vie di segnalazione coinvolte nella formazione delle aderenze con mortalità molto bassa.

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CDM è stata sostenuta dalla American College of Surgeons (ACS) Borsa di studio Resident Research. MSH è stato sostenuto dal California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) formazione Fellow clinica concessione TG2-01159. MSH, HPL, e MTL sono stati sostenuti dalla società americana di chirurghi maxillo-facciale (ASMS) / maxillofacciale Chirurghi Foundation (MSF) Research Grant Award. HPL è stato sostenuto da NIH concedere R01 GM087609 e un dono di Ingrid Lai e Bill Shu in onore di Anthony Shu. HPL e MTL sono stati sostenuti dal Laboratorio Hagey Pediatrica Medicina rigenerativa e la Fondazione Oak. MTL è stato sostenuto dal / Fondo Olivier Gunn.

Il seguente protocollo è stato approvato dal Comitato Istituzionale Stanford University cura degli animali e Usa (IACUC) e soddisfa tutte le linee guida etiche istituzionali per quanto riguarda l&#39;uso di animali di ricerca. 1. Creazione di addominali aderenze <ol><li> Avviare il mouse sulla dieta chow antibiotico una settimana prima della procedura. </li><li> Autoclave gli strumenti chirurgici e pre-caldo la soluzione di irrigazione salina. </li><li> Anestetizzare il mouse utilizzando 2% isoflurano per via inalatoria. </li><li> Utilizzando un tagliacapelli seguito da un breve applicazione (5 - 10 sec) di agente depilatorio, rimuovere i capelli dalla maggior parte della superficie dell&#39;addome. Rimuovere accuratamente l&#39;agente depilatorio strofinando delicatamente con una garza umida e, opzionalmente, da inzuppare con cura la parte inferiore del mouse in acqua calda. Asciugare accuratamente l&#39;animale. </li><li> Posizionare muso dell&#39;animale nel cono del naso anestetico. Durante l&#39;intero intervento chirurgico, monitorare attentamente la rtasso espiratory dell&#39;animale e titolare la portata anestetico, se necessario. </li><li> Utilizzare un dispositivo di riscaldamento, come ad esempio una piastra elettrica o una lampada di riscaldamento, per evitare l&#39;ipotermia. </li><li> Prima preparando l&#39;addome, fissare il mouse con strisce di nastro posti sopra e sotto l&#39;addome per evitare che il mouse si sposti durante l&#39;intervento chirurgico. Disinfettare l&#39;addome con betadine, poi seguire con il 70% di etanolo. Include tanta zona possibile nella preparazione, compresi i capelli sui bordi della zona rasata. Posizionare un telino sterile sopra il mouse. (Figura 1) </li><li> Sottocutanea iniettare 0,1 mg / kg buprenorfina o 3 mg di 30 g mouse. </li><li> Rendere l&#39;incisione cutanea. <ol><li> A partire dalla linea mediana addominale inferiore, afferrare la pelle con una pinza e fare un taglio verticale poco profondo nella pelle usando forbici affilate. </li><li> Effettuare il taglio superiormente al xifoidea con le forbici. Fare attenzione a inserire solo la pelle. </li></ol></li><li> Come la muscolatura addominale è nOW visibile che copre le viscere, afferrare la linea mediana della muscolatura con una pinza e con molta attenzione fare un piccolo taglio in esso usando forbici affilate. Assicurarsi di non tagliare accidentalmente in un organo addominale. </li><li> Dopo aver inserito spazio peritoneale con un piccolo taglio e vedere strato muscolare allontanarsi dagli organi addominali, estendere il taglio superiormente ed inferiormente inserendo le forbici nell&#39;apertura e accuratamente taglio in entrambe le direzioni. Estendere l&#39;incisione dal xifoidea superiormente al di sopra della vescica inferiormente. (Figura 2) </li><li> Ora che gli intestini sono esposti, individuare il cieco e delicatamente esteriorizzare esso. Evitare di afferrare il cieco con una pinza dentata o taglienti. Invece di utilizzare una pinza atraumatica come un Adson pinze dentellate. </li><li> Abrasivare il cieco con carta vetrata. <ol><li> raschiare delicatamente tutta la superficie di entrambi i lati del cieco con 100 carta abrasiva grana per 30-60 secondi fino a quando la superficie diventa meno lucida e petecchie appeaR sulla superficie. Se il chirurgo è destro, aiuta a orientare cieco con la punta rivolta verso destra e drappeggio cieco sopra il dito indice sinistro del chirurgo. (Figura 3) </li><li> Eseguire la levigatura dolcemente, come è facile provocare accidentalmente una perforazione della parete cecal sottile. Una piccola quantità di granulosità deve essere sentito come la carta vetrata viene spostato lungo la superficie cecale. Se la carta vetrata è sentita più volte prendendo piede il cieco, questo probabilmente causerà una rottura nel muro del cieco. Guarda con attenzione per assicurare che le particelle di carta vetrata non sloggiare e rimangono nell&#39;addome, in quanto ciò potrebbe causare un eccessivo reazione da corpo estraneo. </li><li> Se si verifica una rottura nel muro cecal, chiudere il procedimento e l&#39;eutanasia dell&#39;animale. </li><li> Se un vaso sanguigno del cieco viene tagliato dalla carta vetrata e provoca emorragie, mantenere la pressione per un massimo di due minuti con una garza. Tuttavia, se il sanguinamento persiste dopo questo tempo, mettere una figura di otto 7-0 monofilamento di sutura intorno alpunto di sanguinamento. Ciò affidabile fermare l&#39;emorragia in quasi tutti i casi. Fare attenzione a non incorporare una grande quantità di parete cecal nella sutura, in quanto questo rischia di provocare necrosi della parte interessata del muro. </li></ol></li><li> Ferire il diritto fianco addominale. <ol><li> Utilizzare una striscia di carta vetrata per abradere la superficie peritoneale del muscolo della parete laterale destra addominale. Sia più aggressivo con la levigatura qui che il cieco e continuare fino l&#39;intera superficie della parete laterale destra addominale appare malmenato. Evitare di levigatura così forte che la pelle è visibile attraverso le aperture nello strato muscolare. (Figura 4) </li><li> Utilizzando un driver ago Castro-Viejo, posto tra due e quattro otto figure-of-4-0 punti di sutura di seta nello strato muscolare della parete laterale addominale destra. Lasciare le code lunghe circa 5 mm. Fare attenzione a non catturare accidentalmente parete intestinale nella sutura. (Figura 5) </li></ol></li><li> Usando una siringa da 10 ml riempita wesimo riscaldato soluzione salina, irrigare gli intestini più volte. Dirigere il flusso di soluzione salina nella cavità addominale per irrigare l&#39;interno pure. Se la superficie sotto il mouse viene bagnato, spostare il mouse o sostituire la superficie, al fine di evitare l&#39;ipotermia. </li><li> Utilizzare una garza sterile posto sopra l&#39;incisione per assorbire l&#39;irrigazione in eccesso. </li><li> Prendere una presa di amido e cospargerlo sulla superficie della parete laterale addominale destra e su entrambi i lati del cieco. (Figura 6) </li><li> Assicurarsi che non vi è alcun sanguinamento attivo. Se esiste, utilizzare una garza per applicare pressione direttamente sul punto di sanguinamento fino all&#39;arresto. Se l&#39;emorragia non si ferma immediatamente, posizionare una sutura emostatica come descritto sopra. </li><li> Con l&#39;estremità smussata della pinza e un dito, spingere delicatamente l&#39;intestino nella cavità addominale. Posizionare il cieco accanto alle suture nella parete laterale addominale destra al fine di massimizzare la formazione di aderenze. </li><li> Cperdere l&#39;incisione addominale. <ol><li> Utilizzando 6-0 assorbibile sutura intrecciata, posizionare un punto in esecuzione nello strato muscolare nella parte superiore dell&#39;incisione. </li><li> Eseguire la sutura verso la parte inferiore dell&#39;incisione, riunendo strato muscolare. Viaggiare in circa 3 mm e prendere 3 morsi mm con ogni nuovo punto. Fare attenzione a non prendere accidentalmente un morso di intestino pur ponendo suture. </li><li> In fondo dell&#39;incisione, lasciare un loop sutura dal morso precedente e utilizzare questo per strumento legare la sutura. Tagliare la sutura lasciando 5 mm code. </li><li> Ripetere quanto sopra tre gradini con 6-0 monofilo di nylon di sutura per chiudere la pelle. </li></ol></li><li> Somministrare un 20 ml / kg per via sottocutanea soluzione fisiologica in bolo (circa 0,5 ml per 30 g del mouse). </li><li> Usando una garza asciutta, asciugare accuratamente l&#39;intero animale, come la pelliccia dorsale tende a bagnarsi durante l&#39;irrigazione. </li><li> Liberamente avvolgere un adesivo vestire intorno all&#39;addome per coprire l&#39;incisione. Fare attenzione a non vincolare la unaLe gambe di Nimal o la meccanica di respirazione con il condimento. </li><li> Monitorare attentamente l&#39;animale in quanto recupera da anestesia. Somministrare buprenorfina ogni 12 ore per 2-3 giorni dopo la procedura per il controllo del dolore. </li></ol> 2. La raccolta Adesione Tissue <ol><li> Aspetta un minimo di sette giorni dopo l&#39;intervento iniziale. Anche in questo caso, autoclave strumenti chirurgici e anestetizzare il mouse con isoflurano. </li><li> Sterilizzare l&#39;addome con betadine seguito da 70% di etanolo. Shave e depilare capelli supplementari dal lato destro dell&#39;addome in modo che il campione di adesione contenenti pelle non saranno coperti in capelli, che rende più difficile l&#39;istologia. </li><li> Utilizzare una incisione paramediana sinistra, dal momento intestinale è spesso bloccato per l&#39;incisione originale. Partendo all&#39;estremità inferiore dell&#39;addome, circa 5 mm a sinistra del fondo dell&#39;incisione originale, afferrare la pelle con piccole pinze dentate e tagliare nella pelle con forbici affilate. Estendere questo taglio superiorely alla cassa toracica. (Figura 7) </li><li> Utilizzando le forbici, tagliare nello strato muscolare e dopo l&#39;inserimento nello spazio peritoneale, estendere il taglio alla parte superiore e inferiore della incisione. Ci saranno tessuto adesivo causando cieco e nel piccolo intestino di aderire alla parete laterale destra dell&#39;addome ed eventualmente anche per l&#39;incisione originale. (Figura 8) </li><li> Utilizzando le forbici e iniziare sul bordo di incisione, di sopra del livello del cieco, inizia a tagliare nella parete addominale in cerchio attorno all&#39;area in cui l&#39;intestino è aderente. </li><li> Alternando sopra e sotto il livello del cieco, ridurre gradualmente tutto intorno l&#39;adesione e completare il cerchio, ottenendo un &quot;isola&quot; della pelle e aderente parete addominale per l&#39;intestino. (Figura 9) </li><li> Sempre con le forbici, tagliare nell&#39;intestino e separare la parte aderente dal resto delle viscere, ottenendo un sandwich di tessuto che consiste di pelle e parete addominaleda un lato, intestino sull&#39;altro lato, e il tessuto adesivo che li collega tra. (Figura 10) </li><li> Facoltativamente, utilizzare un paio di forbici a punta di separare nettamente la pelle dal muscolo parete addominale. Per l&#39;istologia considerare lasciando la pelle allegata, ma per la digestione e l&#39;isolamento delle cellule della pelle può essere rimosso. Se verrà utilizzato il tessuto per esame istologico, assicurarsi di rimuovere il materiale di sutura, per quanto possibile, senza disturbare troppo l&#39;interfaccia adesivo. Per la digestione e l&#39;isolamento di cellule è accettabile lasciare le suture in posizione fino a quando il tessuto digest viene filtrato. </li><li> Dopo ablazione del tessuto adesione, eutanasia il mouse mediante metodo umanitario approvati dal comitato istituzionale uso animale. </li></ol>

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<li>Rajab, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+model+for+the+induction+of+experimental+adhesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Surg%22%5BJournal%5D)">An improved model for the induction of experimental adhesions.</a> J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).</li>
</ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

I passaggi critici di questa procedura sono: accuratamente abrasione cieco senza provocare la perforazione, suture nella parete laterale addominale, e applicando la giusta quantità di amido. applica carta vetrata Solo al cieco, o per una piccola porzione specifica dell&#39;intestino. Ampio uso di carta vetrata su grandi quantità di piccolo intestino tende a causare una significativa ileo. Fare attenzione a raschiare il cieco con forza sufficiente che la superficie diventa ruvida, ma non così tanto che le lacrime a muro....

aderenze addominali sono una forma di tessuto cicatriziale che si formano nell&#39;addome in risposta all&#39;infiammazione, di solito dopo un intervento chirurgico o infezioni intra-addominale. Le adesioni sono una delle principali cause di dolore addominale cronico ed infertilità, e sono la causa più comune di piccola occlusione intestinale 1. La presenza di aderenze fa eseguire una seconda operazione addominale più difficile e aumenta la probabilità di complicazioni 2. Nonostante anni di ricerca, i meccanismi alla base della formazione di aderenze sono ancora poco chiare. E &#39;noto che una lesione iniziale alla superficie peritoneale provoca un essudazione di liquido ricco di fibrina, che quindi forma un coagulo che lega le superfici di intestino e la parete addominale insieme 3. Successivamente, fibroblasti e altre cellule migrano nello spazio adesivo e secernono tessuto connettivo 4. Nel corso di mesi o anni l&#39;adesione matura attraverso lo sviluppo di vasi sanguigni e nervi <sup&gt; 5. Diversi prodotti commerciali esistono che sono progettati per ridurre la formazione di aderenze dopo l&#39;intervento chirurgico addominale (ad esempio, Seprafilm). Tutti questi prodotti agiscono come barriere meccaniche e interrompere la formazione di aderenze impedendo il contatto fisico tra anse intestinali e 6,7 parete addominale. Nonostante le prove da uno studio controllato che una barriera adesione chirurgica riduce la formazione di aderenze 8, molti chirurghi anecdotally sono stati delusi con l&#39;efficacia dei prodotti barriera meccanica. Attualmente non ci sono terapie anti-adesione a base di droga, che riflette il fatto che i processi precisi coinvolti nella formazione di aderenze sono poco conosciuti. Lo sviluppo di una terapia che si rivolge specificamente agenti cellulari o molecolari coinvolti nella formazione di aderenze richiederà una migliore comprensione degli eventi che sono coinvolti nella formazione di adesione. Diversi gruppos hanno identificato percorsi molecolari che possono essere importanti per la formazione di aderenze 9-11. Modelli animali forniscono un ambiente eccellente per studiare la formazione di aderenze. Molti studi sono stati pubblicati che descrive la creazione chirurgica di adesione in molti animali, soprattutto il ratto e nel topo 6,12-14. Data la nostra esperienza con lo studio della fibrosi nel topo e l&#39;ampia disponibilità di topi transgenici e gli anticorpi di topo-based, abbiamo scelto il topo come modello per lo studio di adesioni. Qui, si segnala la tecnica che abbiamo sviluppato per creare riproducibile e affidabile aderenze addominali nel topo.

<table><tbody><tr><td>Fisherbrand Underpads assorbenti, 20" x 24"</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-206-62</td><td></td></tr><tr><td>Campo sterile polifoderato, 18" x 24"</td><td>Busse Hospital Monouso:</td><td>696</td><td>Tagliare un foro rettangolare della dimensione appropriata</td></tr><tr><td>Isothesia isoflurane</td><td>Henry Schein&nbsp;</td><td></td><td></td>050033</tr><tr><td>Fisherbrand Garza di cotone sterile, 4" x 4"</td> <td>Fisher Scientific</td><td>22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>Unguento oftalmico in vaselina Puralube, tubo da 1/8 oz.</td><td>Dechra Veterinary Products</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Crema depilatoria</td><td>Nair Church & Dwight Co.</td><td>22339-05</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex buprenorfina&nbsp; 0,3 mg/ml</td><td>Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc.</td><td>NDC 12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>Siringa da insulina da 1 cc, 27&nbsp; G</td><td>Becton Dickinson</td><td>329412</td><td></td></tr> Soluzione per la <tr><td>preparazione dello iodio povidone</td><td>Medline</td><td>MDS093944H</td><td></td></tr><tr><td>Webcol tamponi per la preparazione dell'alcol</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td></td></tr><tr><td>Nastro per etichettatura Labarotory per uso generico</td><td>VWR</td><td>89097-912</td><td></td></tr><tr><td>Guanti chirurgici BioGel PI</td><td>M&ouml; lnlycke Health Care</td><td>ALA42675Z</td><td></td></tr><tr><td>Micro Pinze con denti</td><td>Roboz</td><td>RS-5150</td><td></td></tr><tr><td>Forbici fini - affilate</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>Pinze seghettate diritte</td><td>Fine Science Tools</td><td>11050-10</td><td></td></tr><tr><td>Cacciavite ad ago Castro-Viejo</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>100 grana 1/4 foglio di carta vetrata</td><td>ACE Hardware</td><td>1010446</td><td>Tagliare a strisce</td></tr><tr><td>4-0 sutura di seta, 30", ago SH</td><td>Ethicon</td><td>K831</td><td></td></tr><tr><td>7-0 PDS II sutura monofilamento assorbibile, 30", ago BV-1</td><td>Ethicon</td><td>Z135</td><td>Di solito viene fornito a doppio braccio. Tagliare la sutura a metà strada per generare due suture utilizzabili.</td></tr><tr><td>Amido di riso</td><td>MP Biomedicals</td><td>102955</td><td></td></tr><tr><td>0,9% cloruro di sodio irrigazione</td><td>Baxter</td><td>BHL2F7121</td><td>caldo a 37 gradi C prima dell'uso</td></tr><tr><td>siringa da 10 ml</td><td>Becton Dickinson</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Vicryl sutura intrecciata assorbibile, 18", RB-1 ago conico</td><td>Ethicon</td><td>J212H</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Ethilon nylon monofilamento&nbsp; sutura, 18", ago P-3,&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>1698G</td><td></td></tr><tr><td>Tegaderm Pellicola Trasparente Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm</td><td>3M</td><td>1624W</td><td>Taglio a metà nel senso della lunghezza</td></tr></tbody></table>

creazione di addominali aderenze nei topi

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

Le aderenze addominali consistono in tessuto fibrotico che si forma nello spazio peritoneale in risposta a un insulto infiammatorio, tipicamente un intervento chirurgico o un'infezione intraaddominale. I meccanismi precisi alla base della formazione dell'adesione sono poco conosciuti. Molti composti e barriere fisiche sono stati testati per la loro capacità di prevenire le aderenze dopo l'intervento chirurgico con vari livelli di successo. Il topo e il ratto sono modelli importanti per lo studio delle aderenze addominali. In letteratura esistono diverse tecniche per la creazione di aderenze nel topo e nel ratto. Qui descriviamo un protocollo che utilizza l'abrasione del cieco con carta vetrata e suture posizionate nella parete laterale addominale destra. Il topo viene anestetizzato e l'addome viene preparato. Viene creata una laparotomia della linea mediana e viene identificato il cieco. La carta vetrata viene utilizzata per abradere delicatamente la superficie del cieco. Successivamente, diverse suture a forma di otto vengono posizionate nel peritoneo della parete laterale addominale destra. La cavità addominale viene irrigata, viene applicata una piccola quantità di amido e l'incisione viene chiusa. Abbiamo scoperto che questa tecnica produce le aderenze più coerenti con il più basso tasso di mortalità.

<html> A sette giorni dopo l&#39;intervento, il cieco e, eventualmente, colon ascendente, il fegato, e loop di piccolo intestino dovrebbe essere aderente alla parete addominale lato destro. (Figura 8) tessuto asportato può essere integrato e sezionato e produrrà ottimi vetrini istologici. (Figura 11, 12) Quando la procedura viene eseguita correttamente, il 100% dei topi dovrebbe avere adesioni ...

Le aderenze addominali che si formano dopo l'intervento chirurgico sono una delle principali cause di dolore, infertilità, ospedalizzazione e reintervento per ostruzione dell'intestino tenue. La nostra procedura chirurgica per la creazione di aderenze addominali nei topi è uno strumento affidabile per studiare i meccanismi alla base della formazione delle aderenze.

Creazione di addominali aderenze nei topi

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

L'obiettivo generale di questa procedura è produrre in modo costante aderenze addominali nel topo riducendo al minimo la mortalità. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo delle aderenze addominali, come quali cellule, macromolecole, vie di segnalazione e citochine siano coinvolte nella formazione delle aderenze. I principali vantaggi di questa tecnica sono che i topi sviluppano aderenze il 100% delle volte e il tasso di mortalità è molto basso quando la procedura viene eseguita correttamente.Generalmente, i soggetti alle prime esperienze con questa procedura incontrano difficoltà nel dosare la forza corretta durante l'uso della carta vetrata e anche nell'applicare la giusta quantità di amido. Una dimostrazione visiva di questa tecnica è fondamentale, poiché una forza eccessiva potrebbe perforare il cieco, mentre una forza insufficiente potrebbe non portare alla formazione di aderenze. Nel giorno dell'intervento, utilizzare un rasoio elettrico per tagliare il pelo addominale dell'animale anestetizzato.Quindi trasferire l'animale su un dispositivo di riscaldamento e fissare gli arti con del nastro adesivo. Successivamente, disinfettare l'addome con betadina, seguito da etanolo al 70%, avendo cura di includere anche i peli sui bordi della zona rasata. Posizionare un campo sterile sul topo.Quindi afferrare la pelle dell'addome inferiore con una pinzetta ed eseguire un'incisione verticale superficiale. Prolungare l'incisione fino al processo xifoidi. Successivamente, afferrare la muscolatura addominale in corrispondenza della linea mediana ed eseguire con forbici a punta un'incisione piccola con attenzione, avendo cura di evitare gli organi interni.Quando gli organi addominali sono visibili, inserire le forbici nell'incisione e tagliare con attenzione in entrambe le direzioni per estendere il taglio dal processo xifode fino alla regione sovrapubica. Una volta esposti gli intestini, individuare il cieco e utilizzare una pinza atraumatica per esteriorizzare delicatamente il tessuto. Orientare il cieco in modo che l'estremità sia rivolta verso la mano dominante e appoggiarlo sull'indice della mano non dominante.Utilizzando carta vetrata da 100, abrasionare delicatamente l'intera superficie di entrambi i lati dell'intestino esternalizzato per 30-60 secondi. Si dovrebbe percepire una leggera ruvidezza mentre la carta vetrata viene spostata lungo la superficie cecale. Se durante l'abrasione viene recisa una vena cecale, premere delicatamente una garza sulla sede del sanguinamento per un massimo di due minuti.Se il sanguinamento continua dopo due minuti, posizionare un punto a 870 di sutura monofilamento attorno al vaso. Quando la superficie cecale diventa meno lucida e compaiono petecchie, utilizzare una nuova striscia di carta vetrata per abrasionare la superficie peritoneale del muscolo della parete laterale addominale destra finché l'intera superficie della parete laterale appare ruvida. Quindi utilizzare un pinza da Castroviejo per posizionare da due a quattro punti a 840 in seta nello strato muscolare della parete laterale addominale destra, lasciando code lunghe pochi millimetri.Utilizzare una siringa da 10 millilitri di soluzione salina riscaldata per irrorare più volte l'intestino e la cavità addominale. Se la zona sotto il topo si inzuppa, spostare l'animale su una superficie asciutta per evitare l'ipotermia. Una volta che l'intestino è stato adeguatamente irrorato, posizionare una garza sterile sulla ferita per assorbire l'eccesso di soluzione salina.Quindi posizionare il ceco accanto ai punti di sutura nella parete laterale addominale destra. Utilizzare una garza per applicare pressione su eventuali punti con sanguinamento attivo. Successivamente, spargere una piccola quantità di amido di riso sulla superficie della parete laterale addominale destra e sul ceco.Per chiudere l'addome, utilizzare un filo riassorbibile intrecciato da 60 per eseguire una sutura continua nello strato muscolare nella parte superiore dell'incisione. Procedere con la sutura verso il basso lungo l'incisione, avvicinando sezioni di muscolatura di tre millimetri per tre millimetri con ogni nuovo punto. Alla fine dell'incisione, lasciare un'ansa del punto precedente per annodare il filo con lo strumento, quindi tagliare il filo lasciando code di cinque millimetri.Chiudere la cute nello stesso modo utilizzando un filo di sutura monofilamento in nylon 60. Somministrare quindi una bolo di soluzione salina sottocutanea di 20 millilitri per chilogrammo e asciugare completamente l'animale con garza pulita. Infine, avvolgere in modo lento una medicazione adesiva intorno all'incisione, avendo cura di non limitare gli arti dell'animale né la meccanica respiratoria, e monitorare il topo fino a quando non si sarà completamente ripreso.Sette giorni dopo l'intervento chirurgico, il ceco e possibilmente il colon ascendente, il fegato e i tratti dell'intestino tenue dovrebbero essere aderenti alla parete addominale laterale destra. L'inclusione e la sezione del tessuto addominale asportato producono ottimi preparati per analisi istologiche e immunohistochimiche. Una volta acquisita padronanza di questa procedura, essa può essere eseguita in meno di 30 minuti.Dopo aver seguito questa procedura, altri metodi come la PCR quantitativa e la coltura su fibra di vetro possono essere utilizzati per rispondere a domande riguardanti l'espressione genica nel tessuto adesivo.

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