Name: Tecnica mouse Microchirurgia infusione per Targeted Sostanza consegna nel sistema nervoso centrale via Carotide interna (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: Impara una tecnica di microchirurgia murina per la somministrazione mirata di sostanze nel sistema nervoso centrale tramite l'arteria carotide interna. Questo metodo minimamente invasivo preserva l'integrità neuronale e garantisce alte concentrazioni cerebrali.

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Vorremmo ringraziare la Dott.ssa Lei Chen (Icahn School of Medicine at Mount Sinai, NY) che per prima ha stabilito l'uso di questo modello nel nostro laboratorio, e la Dott.ssa Gretchen Wolff (Centro Tedesco di Ricerca sul Cancro, Heidelberg, Germania) per aver diffuso la tecnica nel nostro laboratorio. Supportato in parte da HL126559, DA039576, MH098891, MH63022, MH072567, DA027569 e NSC 2015/17/B/NZ7/02985.

Le procedure coinvolte nel seguente protocollo sono stati approvati dalla University of Miami Istituzionale cura degli animali e del Comitato uso (IACUC). In aggiunta, tutte le procedure sono state condotte in impianti autorizzati dall&#39;Associazione per la valutazione e l&#39;accreditamento degli animali da laboratorio Care International (AAALAC). 1. Preparazione di topi per Chirurgia <ol><li> Anestetizzare topo con isoflurano mescolato con l&#39;ossigeno, utilizzando un sistema di laboratorio anestesia. Utilizzare isoflurano a stabilire tra il 4-5% e il flusso di ossigeno a 2 L / min sulla macchina commerciale (vedi Materiali Tavolo). Trasferire l&#39;animale alla superficie un intervento chirurgico, sotto uno stereomicroscopio, e sostenere l&#39;anestesia con un cono (utilizzare l&#39;impostazione 1,5 isoflurano - 2,5 e ossigeno flusso a 2 L / min). <ol><li> Assicurarsi che la frequenza respiratoria del mouse è di circa 1 - 2 respirazione / sec, senza boccheggiare. Inoltre, assicurarsi che l&#39;animale non presenta reazione stimolazione baffi e pedale reFlex (tep pizzico). Monitorare la frequenza respiratoria e lo sforzo durante l&#39;intervento chirurgico, almeno ogni 5 min. Seguire specifica Istituzionale Animal Care e del Comitato Usa e le linee guida per il monitoraggio veterinari roditore anestesia. </li></ol></li><li> Applicare una goccia di lubrificante oftalmica su ciascun occhio con un tampone sterile per prevenire la secchezza. Si raccomanda somministrazione di anti-infiammatori e analgesici per alleviare il disagio. </li><li> Con l&#39;animale sdraiato sul dorso, mantenere l&#39;anestesia con un cono di naso. </li><li> Pulire collo dell&#39;animale strofinando la zona tre volte con etanolo al 70% e clorexidina. Radere zona chirurgia dell&#39;animale utilizzando un rasoio (descritto di seguito). </li></ol> 2. La dissezione della carotide comune (CCA) <ol><li> Eseguire l&#39;intera procedura microchirurgia allo stereomicroscopio. Utilizzando forbici chirurgiche e pinze eseguire una incisione mediana superficiale nel collo, da sopra lo sterno al di sotto tegli mascella (circa 3 o 4 cm). </li><li> Utilizzando pinze grassi accuratamente separato e tessuto connettivo per esporre la trachea. </li><li> Posizionare un cuscino (oggetto rotondo, circa 0,5 cm di diametro) sul retro del collo del mouse per estendere il collo, esponendo la zona. </li><li> Separare il tessuto utilizzando un divaricatore tissutale o ganci. </li><li> Sul lato sinistro dell&#39;animale della trachea, accuratamente tweeze parte il tessuto connettivo per esporre il CCA partita. </li><li> Uso di pinze rimuovere accuratamente tutto il tessuto connettivo per esporre la biforcazione CCA, e l&#39;inizio di entrambe le arterie carotidi interne ed esterne. </li></ol> 3. Preparazione del CCA per la sostanza Infusion <ol><li> Inserire due segmenti di sutura in nylon (circa 1 cm ciascuno) sotto carotide esterna (ECA), con pinze. </li><li> Posizionare un nodo permanente al punto possibile della ECA più alto. </li><li> Nel punto più basso possibile della ECA, immediatamente al di sopra della biforcazione CCA, postoun nodo rimovibile. Questo nodo dovrebbe essere sciolto rispetto al nodo superiore. </li><li> Chiudere la CCA utilizzando una clip nave, nel punto più basso possibile. </li><li> Chiudere l&#39;arteria carotide interna (ICA) utilizzando una clip nave. </li><li> Con le forbici a molla di microdissezione eseguire un piccolo taglio nella ECA (circa 2 mm), tra i due nodi. </li></ol> 4. Infusione Sostanza via ICA <ol><li> Assemblare un sistema di infusione. Fissare 6 pollici di tubo capillare (dimensioni ideali: 2,5 mm x 1,2 mm) ad una siringa tubercolina contenente 250 ml di sostanza da infondere (farmaci, agenti patogeni, vescicole extracellulari, tra gli altri) e inserire la punta capillare dolcemente verso l&#39;incisione eseguita al punto 3.6. </li><li> Continua a scivolare lungo il capillare fino a raggiungere un punto medio tra la biforcazione e la clip di chiusura del CCA. </li><li> Legare giù il nodo ECA inferiore. Verificare che il nodo è sufficiente per consentire capillare fluidità sciolti e abbastanza stretta per impedire leaking. </li><li> Rimuovere clip dalla ICA. </li><li> applicare una leggera pressione alla sostanza della siringa del pistone consente l&#39;infusione a circa 10 ml al secondo. </li></ol> 5. Procedure di infusione postali <ol><li> Posizionare la clip posteriore sul ICA. </li><li> Rimuovere delicatamente il tubo capillare. </li><li> Legare giù il nodo ECA inferiori completamente. </li><li> Rimuovere clip dal ICA e il CCA. </li></ol> 6. Incisione di chiusura e di assistenza post-operatoria <ol><li> Rimuovere divaricatore o di tessuti ganci e cuscino. </li><li> Pulire l&#39;area di sutura con soluzione fisiologica sterile. </li><li> Chiudere l&#39;incisione mediante sutura in nylon / ago e pinza. </li><li> Somministrare anti-infiammatori e analgesici per alleviare il disagio post-operatorio. </li><li> Mettere animale in gabbia posto sulla piastra elettrica per almeno 1 ora e il recupero del monitor. </li></ol>

<ol><li>Chen, L., Swartz, K. R., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+microport+technique+for+applications+in+cerebrovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Vessel microport technique for applications in cerebrovascular research.</a> J Neurosci Res. 87 (7), 1718-1727 (2009).</li>
<li>Frisella, W. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+injection+of+recombinant+adeno-associated+virus+improves+cognitive+function+in+a+murine+model+of+mucopolysaccharidosis+type+VII%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Intracranial injection of recombinant adeno-associated virus improves cognitive function in a murine model of mucopolysaccharidosis type VII.</a> Mol Ther. 3 (3), 351-358 (2001).</li>
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<li>Wu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+delivery+of+methotrexate+to+epidermal+growth+factor+receptor-positive+brain+tumors+by+means+of+cetuximab+%28IMC-C225%29+dendrimer+bioconjugates%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Targeted delivery of methotrexate to epidermal growth factor receptor-positive brain tumors by means of cetuximab (IMC-C225) dendrimer bioconjugates.</a> Mol Cancer Ther. 5 (1), 52-59 (2006).</li>
<li>Pignataro, G., Studer, F. E., Wilz, A., Simon, R. P., Boison, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+in+ischemic+mouse+brain+induced+by+stem+cell-derived+brain+implants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection in ischemic mouse brain induced by stem cell-derived brain implants.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 27 (5), 919-927 (2007).</li>
<li>Sugiyama, Y., Kusuhara, H., Suzuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+and+biochemical+analysis+of+carrier-mediated+efflux+of+drugs+through+the+blood-brain+and+blood-cerebrospinal+fluid+barriers%3A+importance+in+the+drug+delivery+to+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Kinetic and biochemical analysis of carrier-mediated efflux of drugs through the blood-brain and blood-cerebrospinal fluid barriers: importance in the drug delivery to the brain.</a> J Control Release. 62 (1-2), 179-186 (1999).</li>
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<li>Vantyghem, S. A., Postenka, C. O., Chambers, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrous+cycle+influences+organ-specific+metastasis+of+B16F10+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Estrous cycle influences organ-specific metastasis of B16F10 melanoma cells.</a> Cancer Res. 63 (16), 4763-4765 (2003).</li>
<li>Huang, R. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+gene+delivery+targeted+to+the+brain+using+a+transferrin-conjugated+polyethyleneglycol-modified+polyamidoamine+dendrimer%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Efficient gene delivery targeted to the brain using a transferrin-conjugated polyethyleneglycol-modified polyamidoamine dendrimer.</a> FASEB J. 21 (4), 1117-1125 (2007).</li>
<li>Liu, R., Martuza, R. L., Rabkin, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracarotid+delivery+of+oncolytic+HSV+vector+G47Delta+to+metastatic+breast+cancer+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Intracarotid delivery of oncolytic HSV vector G47Delta to metastatic breast cancer in the brain.</a> Gene Ther. 12 (8), 647-654 (2005).</li>
<li>Kumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transvascular+delivery+of+small+interfering+RNA+to+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Transvascular delivery of small interfering RNA to the central nervous system.</a> Nature. 448 (7149), 39-43 (2007).</li>
<li>Wrobel, J. K., Wolff, G., Xiao, R., Power, R. F., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+Selenium+Supplementation+Modulates+Growth+of+Brain+Metastatic+Tumors+and+Changes+the+Expression+of+Adhesion+Molecules+in+Brain+Microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Trace+Elem+Res%22%5BJournal%5D)">Dietary Selenium Supplementation Modulates Growth of Brain Metastatic Tumors and Changes the Expression of Adhesion Molecules in Brain Microvessels.</a> Biol Trace Elem Res. , (2015).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

La microchirurgia infusione qui descritto è stato dimostrato di essere molto successo nella fornitura di sostanze esogene di varie funzioni biologiche nel SNC, impedendo la diffusione indesiderata in tutto il corpo 1, 12. Rottura della barriera emato-encefalica è una caratteristica patologica di diverse malattie del sistema nervoso centrale-correlate; pertanto valutare il rapporto di sostanze esogene con la barriera emato-encefalica è di grande importanza ed int...

Nei modelli in vivo del sistema nervoso centrale (SNC) malattie richiedono un efficace erogazione di sostanze esogene, come la droga, agenti patogeni, o esosomi, nel cervello. Pertanto, un metodo di distribuzione ideale dovrebbe causare un trauma minimo per l&#39;animale, preservare l&#39;integrità della rete neuronale, e raggiungere elevate concentrazioni di sostanza nel cervello 1. Sono stati descritti diversi metodi chirurgici di consegna sostanza locale, tra intra-guaina, intracerebrale, e iniezioni intraventricolare o protesi 2, 3, 4, 5. Questi approcci, tuttavia, sono considerate traumatica al SNC, e permettono la somministrazione di solo bassi volumi della sostanza di interesse. Inoltre, è stato suggerito che le sostanze esogene possono essere rapidamente rimossi dal liquido cerebrospinale 6 </sup&gt; e una gamma bassa penetrazione al parenchima cerebrale è stata osservata 7 quando le tecniche sopra menzionate sono impiegati. Metodi di consegna sistemici, come ad esempio per via orale, polmonare, per via sottocutanea, endovenosa e, sono più comunemente utilizzati nei modelli animali, anche se essi mostrano scarsa efficacia nel fornire le sostanze al sistema nervoso centrale, a causa di assorbimento da parte di altri organi 8, 9. Pertanto, queste rotte di consegna richiedono dosi elevate di sostanze amministrati, aumentando il rischio di effetti collaterali e la tossicità 10, 11. Qui, descriviamo una tecnica microchirurgica infusione del mouse, che offre in modo efficace le sostanze direttamente nel cervello attraverso l&#39;arteria carotide interna. Oltre al targeting la consegna al CNS, questa tecnica non bypassare normali barriere fisiologiche ed è quindi molto importante per biologicaprocessi l coinvolti nei passaggi terapie o agenti patogeni nel cervello.

<table><tbody><tr><td>Strumento per anestesia</td><td>Vetequip</td><td>901806</td><td></td></tr><tr><td>Forbici chirurgiche</td><td>Fine Science Tool</td><td>14558-09</td><td></td></tr><tr><td>Pinze chirurgiche a punta dritta</td><td>Fine Science Tool</td><td>00108-11</td><td></td></tr><tr><td>Pinze chirurgiche a punta angolata</td><td>Fine Science Tool</td><td>00109-11</td><td></td></tr><tr><td>Forbici a molla</td><td>Fine Science Tool</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Sutura in nylon</td><td>Braintree Scientific</td><td>SUT-S 104</td><td></td></tr><tr><td>Tubo capillare (Micro-Renathane 0,010" x 0,005" per piede)&nbsp;</td><td>Braintree Scientific MRE01050</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura di chiusura</td><td>VWR</td><td>95057-036</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Piramal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazolio cloruro</td><td>FisherScientific</td><td>50-121-8005</td><td></td></tr></tbody></table>

tecnica mouse microchirurgia infusione per targeted sostanza consegna nel sistema nervoso centrale via carotide interna

Mouse Microsurgery Infusion Technique for Targeted Substance Delivery into the CNS via the Internal Carotid Artery

I modelli animali di malattie del sistema nervoso centrale (SNC) e, di conseguenza, di malattie di distruzione della barriera emato-encefalica, richiedono la somministrazione di sostanze esogene nel cervello. Queste sostanze esogene possono avere un impatto dannoso o costituire una strategia terapeutica. I metodi più comuni di somministrazione di sostanze esogene nel cervello si basano su consegne sistemiche, come le vie sottocutanee o endovenose. Sebbene comunemente usati, questi approcci hanno diverse limitazioni, tra cui la bassa efficacia della somministrazione nel cervello. Al contrario, i metodi chirurgici che rilasciano localmente sostanze nel SNC sono più specifici e impediscono l'assorbimento delle sostanze esogene da parte di altri organi. Sono disponibili diversi metodi chirurgici per il parto del SNC; Tuttavia, tendono ad essere molto traumatici. Qui, descriviamo una tecnica di microchirurgia per infusione di topo, che rilascia efficacemente sostanze nel cervello attraverso l'arteria carotide interna, con un trauma minimo e senza interferenze con la normale funzionalità del SNC.

La tecnica microchirurgia infusione topo descritto qui è molto versatile ed è stato utilizzato per fornire diverse sostanze direttamente nel cervello, compresa la fornitura di cellule tumorali in un modello rappresentativo di una formazione di metastasi cerebrale 1, 12. Questa tecnica è adatto anche per valutare gli aspetti patologici diversi patogeni nel SNC. In un mo...

Il presente protocollo descrive una tecnica di infusione di microchirurgia del topo, che eroga efficacemente sostanze direttamente nel cervello attraverso l'arteria carotide interna.

Tecnica mouse Microchirurgia infusione per Targeted Sostanza consegna nel sistema nervoso centrale via Carotide interna

Animal models of central nervous system (CNS) diseases and, consequently, blood-brain barrier disruption diseases, require the delivery of exogenous ...

L'obiettivo generale di questa tecnica chirurgica è quello di fornire sostanze esogene nel cervello del topo senza penetrare nel cranio. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nelle neuroscienze riguardanti l'azione di farmaci, agenti patogeni ed esosomi nel cervello. Il vantaggio principale di questa tecnica è che provoca un trauma minimo all'animale, preserva l'integrità della rete neuronale e raggiunge alte concentrazioni della sostanza nel cervello.Inizia somministrando isoflurano mescolato con ossigeno per anestetizzare il topo in una camera di induzione. Dopo l'induzione dell'anestesia, trasferire l'animale sulla superficie chirurgica sotto uno stereomicroscopio e posizionare il cono nasale per mantenere un piano chirurgico di anestesia. Assicurarsi che la frequenza respiratoria sia di circa una o due respire al secondo senza ansimare.Inoltre, assicurarsi che l'animale non reagisca alla stimolazione dei baffi o a un pizzicamento delle dita dei piedi. Utilizzare un tampone sterile per applicare una goccia di lubrificante oftalmico su ciascun occhio per prevenire la secchezza. Dopo aver rasato il sito chirurgico con un rasoio, preparare l'area con etanolo al 70% e clorexidina.Mentre guardi attraverso lo stereomicroscopio, usa le forbici chirurgiche e le pinze per creare un'incisione sulla linea mediana nel collo da sopra lo sterno a sotto la mascella. Usa una pinza per separare accuratamente il tessuto adiposo e connettivo per esporre la trachea. Quindi posiziona un oggetto morbido e rotondo di circa zero virgola cinque centimetri di diametro sotto la parte posteriore del collo per estendere il collo ed esporre ulteriormente l'area.Quindi, separare il tessuto attorno alla trachea usando ganci o un divaricatore tissutale. Sul lato sinistro della trachea, separare con cura il tessuto connettivo per esporre l'arteria carotide comune sinistra, o CCA. Usando una pinza, rimuovere con cura tutto il tessuto connettivo per esporre la biforcazione CCA all'inizio delle arterie carotidi esterne e interne.Una volta che l'ECA e l'ICA sono esposti, utilizzare una pinza per posizionare un segmento di sutura di nylon di un centimetro sotto l'arteria carotide esterna. Quindi posizionare un secondo segmento di un centimetro. Quindi fare un nodo permanente nel punto più alto possibile dell'ECA.Nel punto più basso possibile dell'ECA, immediatamente sopra la biforcazione CCA, fare un nodo più sciolto e rimovibile. Quindi utilizzare le clip del recipiente per chiudere il CCA nel punto più basso possibile e per chiudere l'ICA. Chiudere correttamente l'arteria carotide interna prima di praticare un piccolo taglio nell'arteria carotide esterna previene il sanguinamento.Ora, usando le forbici a molla per microdissezione, fai un taglio di due millimetri nell'ECA tra i due nodi. È importante mantenere i tagli piccoli, poiché un taglio grande causerà la fuoriuscita della sostanza da infondere. Assemblare il sistema di infusione collegando sei pollici di tubo capillare a una siringa di tubercolina contenente 250 microlitri della sostanza da infuso.Quindi inserire delicatamente la punta del tubo capillare nell'incisione dell'ECA. Continua ad avanzare la punta fino a raggiungere la metà tra la biforcazione e la clip sul CCA. Annodare il nodo ECA inferiore.Verificare che il nodo sia sufficientemente largo da consentire la fluidità capillare e sufficientemente stretto da evitare perdite. Quindi, rimuovere la clip dall'ICA. Applicare delicatamente una pressione sul pistone della siringa, consentendo l'infusione della sostanza a circa 10 microlitri al secondo.Dopo l'infusione della sostanza in esame, riposizionare la clip sull'ICA. Rimuovere delicatamente il tubo capillare. Quindi, legare completamente il nodo ECA inferiore.Rimuovere la clip dall'ICA e dal CCA. Quindi rimuovere il divaricatore o i ganci per fazzoletti e il cuscino. Pulire l'area da suturare con soluzione fisiologica sterile, quindi chiudere l'incisione utilizzando suture di nylon.Dopo aver somministrato un agente antinfiammatorio e analgesico approvato per alleviare il disagio post-operatorio, posizionare l'animale in una gabbia su un termoforo per almeno un'ora e monitorare il recupero. Questo istogramma dimostra il rilevamento dell'HIV mediante PCR in tempo reale sette giorni dopo l'infusione virale attraverso l'arteria carotide interna sinistra. Come previsto, i livelli del virus sono più alti nell'emisfero sinistro.Questa immagine in immunofluorescenza mostra una sezione del cervello di topo raffigurante il tag GFP CD63, un marcatore esosoma, dopo l'infusione di vescicole extracellulari attraverso l'arteria carotide interna. Le vescicole extracellulari che esprimono CD63, mostrate in verde, sono associate al microvaso cerebrale del topo. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in 20 minuti se eseguita correttamente.Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo delle malattie neurodegenerative per esplorare le interazioni tra farmaci, agenti patogeni ed esosomi nei topi.

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Come indagine delle neuroscienze diventa più sofisticato, l'indagine delle strutture cerebrali e circuiti richiede migliori livelli di accuratezza e alta risoluzione. Abbiamo sviluppato un metodo per la preparazione e l'impianto di un sistema di infusione cronica all'interno del cervello utilizzando un microcannula borosilicato con una punta di diametro 50 micron.

Costruzione e l&#39;impianto di un sistema Microinfusion sostenuta per l&#39;erogazione degli agenti neuroattivi.

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Fonte: Leda, A. R., et al. Tecnica di infusione di microchirurgia del topo per la somministrazione mirata di sostanze nel SNC attraverso l'arteria carotide interna. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra una procedura microchirurgica progettata per facilitare l'infusione mirata di una sostanza in esame nel cervello attraverso l'arteria carotide interna (ICA). La procedura prevede una sutura precisa e una manipolazione vascolare per limitare temporaneamente il flusso sanguigno, garantendo una...

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Emato-encefalica perturbazione barriera favorisce l'erogazione di alcuni farmaci al cervello. Mannitolo consegnato intra-arteriosa cellule restringe i vasi sanguigni circostanti, al fine di distruggere fisicamente la barriera.

Modello Rat di emato-encefalica Turbativa Barriera per consentire mirato Therapeutics neurovascolare

Cervello metastasi è diventato un bisogno medico non soddisfatto urgente come la sua incidenza è aumentata mentre le opzioni terapeutiche sono rimaste palliative. La creazione di modelli animali sperimentali di metastasi cerebrali tramite iniezione arteriosa intracarotidea delle cellule tumorali facilita gli studi meccanicistici della biologia della malattia e la valutazione dei regimi di intervento innovative.

Intracarotidea Cancer Cell iniezione per produrre modelli murini di cervello Metastasi

Un metodo per la fornitura di cellule staminali neurali, adattabile per l'iniezione di soluzioni o sospensioni, attraverso l'arteria carotide comune (mouse) o l'arteria carotide esterna (ratto) dopo ictus ischemico è segnalato. Le cellule iniettate sono distribuite ampiamente in tutto il parenchyma cerebrale e possono essere rilevate fino a 30 d dopo la consegna.

Consegna intra-arteriosa di cellule staminali neurali al cervello di ratto e topo: applicazione all'ischemia cerebrale

Le metastasi cerebrali sono una causa di grave morbilità e mortalità nei pazienti oncologici. La maggior parte dei modelli murini di metastasi cerebrali sono complicati da metastasi sistemiche che confondono l'analisi della mortalità e dei risultati dell'intervento terapeutico. Presentato qui è un protocollo per l'iniezione carotidea interna di cellule tumorali che produce tumori intracranici coerenti con tumori sistemici minimi.

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Facilitare la ripetizione delle iniezioni intracarotidei in modelli murini mediante una nuova tecnica di riparazione del sito di iniezione

Qui, presentiamo un protocollo per valutare la funzione delle cellule immunitarie dopo ictus ischemico utilizzando l'analisi citofluorimetrica in un modello di mini-ictus. Questo metodo consente un esame dettagliato delle interazioni neuroimmunitarie e può essere adattato per lo studio di altre malattie neurodegenerative, migliorando la nostra comprensione delle risposte immunitarie nella patologia dell'ictus.

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Impara una tecnica di microchirurgia murina per la somministrazione mirata di sostanze nel sistema nervoso centrale tramite l'arteria carotide interna. Questo metodo minimamente invasivo preserva l'integrità neuronale e garantisce alte concentrazioni cerebrali.

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