Name: Intracarotidea Cancer Cell iniezione per produrre modelli murini di cervello Metastasi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 43 s
Description: Scopri la tecnica di iniezione intracarotidea di cellule tumorali per creare modelli murini di metastasi cerebrale con alta riproducibilità. Questo metodo microchirurgico consente di valutare nuove terapie oncologiche in vivo.

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Gli autori non hanno riconoscimenti.

dichiarazione etica: Tutti gli studi su animali sono stati approvati dal Comitato di Cura e uso istituzionale animali (IACUC) della University of Texas MD Anderson Cancer Center. 1. Preparare cellule tumorali per iniezione <ol><li> Seme le cellule tumorali uno o due giorni prima dell&#39;iniezione. Utilizzare DMEM / F12 supporti supplementato con 10% FBS, a meno che un mezzo specialità è indicato in letteratura per una particolare linea cellulare. </li><li> Il giorno dell&#39;intervento chirurgico, cellule raccolto quando raggiungono 70 - 80% di confluenza dal primo lavaggio con mezzi senza siero volta prima tripsinizzazione (0,25%) per 1 - 2 min a 37 ° C. Aggiungere in cellule 10% FBS contenenti DMEM media / F12 per placare la tripsina 0,25%. </li><li> Centrifugare le cellule a 80 g per 3 min. Lavare le cellule in mezzi privi di siero due volte per rimuovere siero residuo, contare le cellule con un emocitometro e risospendere in soluzione salina bilanciata di Hank (HBSS) a 1 - 5 × 10 6 cellule / ml, a seconda della linea cellulare. Tenere in ghiacciofino al momento dell&#39;iniezione. NOTA: MDA-MB-231 cellule del cancro al seno e le cellule di melanoma K1735 sono stati utilizzati in questo studio, ed entrambe le linee cellulari sono stati utilizzati a 2 × 10 6 celle concentrazione / ml. Mantenere la durata tripsinizzazione più breve possibile come trattamento eccessivo può influenzare i risultati del test di metastasi. </li></ol> 2. Preparare topi per tumore delle cellule iniezione <ol><li> Anestetizzare topi intraperitoneale (ip) iniezione di ketamina / xilazina cocktail (ketamina 100 mg / kg, xilazina 10 mg / kg). </li><li> Confermare l&#39;anestesia completa pizzicando i piedi degli animali e di osservare la mancanza di risposta. </li><li> Posizionare il mouse su una lastra di vetro (utilizzato per la fusione gel proteici), e fissare con elastici. </li><li> Se necessario, rimuovere i peli del collo con la rasatura o l&#39;applicazione di una piccola quantità di prodotto di rimozione dei capelli e asciugandosi i capelli fuori con un tovagliolo di carta. NOTA: Se si utilizza topi nudi, saltare questo passaggio in quanto non hanno peli sul corpo. </li><li> Pulire la pelle del collo applicandopovidone-iodio e il 70% di alcol. </li><li> Posizionare il mouse sul palco del microscopio da dissezione </li><li> Fare un&#39;incisione nella pelle ~ 1 cm di lunghezza con un bisturi chirurgico. </li><li> Senza mezzi termini sezionare il muscolo con una pinza dentata per esporre la carotide sotto. </li><li> Separare l&#39;arteria carotide dal nervo vago adiacente con pinza chirurgica. </li><li> Utilizzando pinze chirurgiche, separare un batuffolo di cotone da un batuffolo di cotone, inumidire, e la moda in un batuffolo di cotone più piccola. Inserire questo batuffolo di cotone tampone-idratata sotto la carotide del sito previsto per l&#39;iniezione. </li><li> Posizionare un distale e prossimale di sutura per il batuffolo di cotone e fare nodi sciolti. Stringere il nodo prossimale per bloccare il flusso di sangue nel sito di iniezione. </li><li> Procedere alla iniezione di cellule di cancro se la carotide sul batuffolo di cotone appare completamente pressurizzato con sangue rosso fresco. </li></ol> 3. Cancer Cell iniezione in carotide <ol><li> Vortex e disegnare 100 ml ocellule tumorali f nella siringa. </li><li> Al microscopio da dissezione, inserire lentamente il 31 ago G (con bisello alto) nel lume dell&#39;arteria carotide seduto sulla cima del batuffolo di cotone. </li><li> Iniettare lentamente le cellule dalla siringa nella carotide. iniezione di successo può essere osservata al microscopio dal colore cambiando dei vasi sanguigni vicini e muscolatura quando le cellule tumorali buffered vengono spinti nella circolazione. </li><li> Quando l&#39;iniezione dell&#39;intero volume è completa, sollevare l&#39;arteria carotide distale delicatamente per evitare rigurgito. </li><li> stringere rapidamente il nodo distale per completare il processo di iniezione. </li><li> Dopo aver completato l&#39;iniezione, serrare le legature e tagliare la sutura di seta in eccesso con micro-forbici sotto il microscopio da dissezione. Spostare indietro il muscolo separato per coprire la ferita. Chiudere la pelle con due punti metallici. </li></ol> 4. recupero chirurgico <ol><li> Spostare l&#39;animale operato su una piastra elettricaper il recupero. Si può prendere 30-60 minuti per gli animali a riprendere conoscenza. Nel frattempo, amministrare buprenorfina (0,05 mg / kg) per via sottocutanea come analgesia post-chirurgica. Nota: L&#39;analgesia deve essere fornito secondo il vostro IACUC locale approvato protocollo. </li><li> Una volta che gli animali si svegliano e riprendono il loro comportamento normale, restituire i topi alla loro posizione abitazioni. Fornire i topi con il cibo in gel per diversi giorni dopo l&#39;intervento chirurgico. Mantenere un record chirurgica e tenerlo nella stanza. </li></ol> 5. non invasiva In Vivo Imaging <ol><li> Per le cellule marcate con costrutti reporter luciferasi, misurare l&#39;efficienza di iniezione delle cellule tumorali utilizzando in vivo sistema di imaging 14. NOTA: Imaging non viene eseguita il giorno di iniezione per evitare eccessive sollecitazioni agli animali di ricerca. </li></ol>

<ol><li>Gavrilovic, I. T., Posner, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+metastases%3A+epidemiology+and+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">Brain metastases: epidemiology and pathophysiology.</a> J Neurooncol. 75 (1), 5-14 (2005).</li>
<li>Patchell, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+management+of+brain+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Treat+Rev%22%5BJournal%5D)">The management of brain metastases.</a> Cancer Treat Rev. 29 (6), 533-540 (2003).</li>
<li>Barnholtz-Sloan, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+proportions+of+brain+metastases+in+patients+diagnosed+%281973+to+2001%29+in+the+Metropolitan+Detroit+Cancer+Surveillance+System%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Incidence proportions of brain metastases in patients diagnosed (1973 to 2001) in the Metropolitan Detroit Cancer Surveillance System.</a> J Clin Oncol. 22 (14), 2865-2872 (2004).</li>
<li>Schouten, L. J., Rutten, J., Huveneers, H. A., Twijnstra, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+brain+metastases+in+a+cohort+of+patients+with+carcinoma+of+the+breast%2C+colon%2C+kidney%2C+and+lung+and+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma.</a> Cancer. 94 (10), 2698-2705 (2002).</li>
<li>Bendell, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+metastases+in+women+who+receive+trastuzumab-based+therapy+for+metastatic+breast+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Central nervous system metastases in women who receive trastuzumab-based therapy for metastatic breast carcinoma.</a> Cancer. 97 (12), 2972-2977 (2003).</li>
<li>Clayton, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+cerebral+metastases+in+patients+treated+with+trastuzumab+for+metastatic+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Incidence of cerebral metastases in patients treated with trastuzumab for metastatic breast cancer.</a> Br J Cancer. 91 (4), 639-643 (2004).</li>
<li>Romond, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trastuzumab+plus+adjuvant+chemotherapy+for+operable+HER2-positive+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer.</a> N Engl J Med. 353 (16), 1673-1684 (2005).</li>
<li>Mayer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+patient+perspective+on+brain+metastases+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A patient perspective on brain metastases in breast cancer.</a> Clin Cancer Res. 13 (6), 1623-1624 (2007).</li>
<li>Lin, N. U., Bellon, J. R., Winer, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+metastases+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">CNS metastases in breast cancer.</a> J Clin Oncol. 22 (17), 3608-3617 (2004).</li>
<li>Zhang, C., Yu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microenvironment+determinants+of+brain+metastasis+of+brain+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biosci%22%5BJournal%5D)">Microenvironment determinants of brain metastasis of brain metastasis.</a> Cell Biosci. 1 (1), 8(2011).</li>
<li>Fidler, I. J., Nicolson, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+selectivity+for+implantation+survival+and+growth+of+B16+melanoma+variant+tumor+lines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Organ selectivity for implantation survival and growth of B16 melanoma variant tumor lines.</a> J Natl Cancer Inst. 57 (5), 1199-1202 (1976).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microenvironment-induced+PTEN+loss+by+exosomal+microRNA+primes+brain+metastasis+outgrowth%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth.</a> Nature. 527 (7576), 100-104 (2015).</li>
<li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SRC+family+kinases+as+novel+therapeutic+targets+to+treat+breast+cancer+brain+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">SRC family kinases as novel therapeutic targets to treat breast cancer brain metastases.</a> Cancer Res. 73 (18), 5764-5774 (2013).</li>
<li>Lim, E., Modi, K. D., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescent+imaging+of+mammary+tumors+using+IVIS+spectrum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescent imaging of mammary tumors using IVIS spectrum.</a> J Vis Exp. (26), (2009).</li>
<li>Zhang, C., Zhang, F., Tsan, R., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transforming+growth+factor-beta2+is+a+molecular+determinant+for+site-specific+melanoma+metastasis+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Transforming growth factor-beta2 is a molecular determinant for site-specific melanoma metastasis in the brain.</a> Cancer Res. 69 (3), 828-835 (2009).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Le fasi più critiche per successo iniezione arteriosa carotidea delle cellule tumorali sono: 1) anestesia profonda di topo in preparazione per il funzionamento chirurgico; 2) il posizionamento stabile della carotide sulla sommità del supporto di cotone; 3) stretto legatura dell&#39;arteria carotide dopo l&#39;iniezione di successo. anestesia profonda di ~ 30 minuti è di solito necessario per le prestazioni chirurgiche costante sotto il microscopio da dissezione. Usiamo cocktail di ketamina /...

La metastasi del cancro al sistema nervoso centrale (SNC) è una malattia devastante, e può comportare l&#39;parenchima cerebrale o le leptomeningi ( &quot;metastasi cerebrali&quot; si riferisce sia in questo articolo). E &#39;il tumore intracranico predominante, superando in numero gliomi primari per&gt; 10: 1 1, 2. Il cancro del polmone, il cancro al seno, e il melanoma sono i primi tre principali malattie neoplastiche che producono alta incidenza di metastasi cerebrali 3, 4. Negli ultimi anni, notevoli progressi nelle nuove terapie per il cancro sono notevolmente prolungato la sopravvivenza e una migliore qualità della vita per molti malati di cancro. Tuttavia, sulla recidiva, l&#39;incidenza di metastasi cerebrali è in rapido aumento. Ad esempio, il trastuzumab anticorpo anti-HER2 (trastuzumab) ha dimostrato notevole efficacia clinica nei pazienti con carcinoma mammario HER2 +; ancora una preoccupante tendenza è emersain questi pazienti: fino a 1/3 di coloro la cui extracranica malattia sistemica inizialmente beneficiato di un trattamento con trastuzumab successivamente sviluppare metastasi cerebrali 5, 6, 7. Purtroppo, i pazienti con metastasi cerebrali sono refrattari a quasi tutte le attuali trattamenti, di solito sperimentare un deterioramento traumatica della qualità della vita, e la loro sopravvivenza a un anno dopo la diagnosi è solo ~ 20% 8. Le attuali terapie per metastasi cerebrali (compresi gli steroidi, la radioterapia cranica, e la resezione chirurgica nei pazienti selezionati) sono solo palliative, non curativo 9. Pertanto, metastasi cerebrali sta emergendo come la prossima sfida imponente in questa epoca di nuove terapie del cancro. Per affrontare la sfida insoddisfatti i pazienti devono affrontare ogni giorno nella clinica, abbiamo urgente bisogno di capire meglio il meccanismo alla base di metastasi cerebrali e usare questa conoscenza per sviluppare nuove terapie. <pclass = &quot;jove_content&quot;&gt; colonizzazione successo del cervello da cellule tumorali metastatiche richiede prestazioni di una serie di funzioni mediate dall&#39;interazione intricata di più giocatori biologici, come il bypass della barriera ematoencefalica (BBB) ​​e la fuga dal cervello di intrinseca meccanismi di difesa immunitari 10, nessuna delle quali si riassume in un ex vivo o in vitro sistema. Quindi, la corretta e fedele a modelli in vivo sono fondamentali per gli studi di metastasi cerebrali. Un convenzionale nel test in vivo metastasi introduce le cellule tumorali mediante iniezione vena della coda, che porta la maggior parte delle cellule di rimanere incastrati nel polmone. Lesioni metastatiche cerebrali sono raramente prodotte in questi modelli animali prima della morte causata da carico tumorale nei polmoni 11. iniezione diretta intracerebrale di cellule tumorali produce escrescenza tumorale consistente nel SNC ed è ampiamente usato in studi di gliomi primari. Tuttavia, siniezione uch compromette la BBB e provoca lesioni traumatiche al sito di iniezione, entrambi i punti principali di preoccupazione per quanto riguarda la rilevanza fisiologica di questo modello. Un altro uso frequente percorso introduzione delle cellule del cancro, iniezione intracardiaca, è facile da amministrare e che produce metastasi sperimentale al sistema nervoso centrale. Tuttavia, le metastasi simultanee a siti di organi diversi da quelli del sistema nervoso centrale sono sempre prodotte e possono causare la mortalità degli animali 11; Pertanto, l&#39;elevato grado di variabilità di questo modello rende appropriati per la valutazione quantitativa dei meccanismi biologici o agenti terapeutici con un numero limitato di animali. Qui si descrivono le procedure per la produzione sperimentale metastasi cerebrali tramite l&#39;iniezione di cellule tumorali in arteria carotide comune. Abbiamo usato questo approccio per sezionare i contributi singoli geni &#39;alla cascata metastatica di metastasi cerebrali e per valutare l&#39;efficacia di un intervento terapeuticos 12, 13. I principali vantaggi di questo approccio sono l&#39;elevato grado di riproducibilità e basso grado di variabilità; Lo svantaggio principale è la sofisticazione e la destrezza necessaria per eseguire la microchirurgia.

<table><tbody><tr><td>Soluzione di ketamina cloridrato/xilazina cloridrato</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K113</td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscopio di routine Leica M50</td><td>Leica</td><td>M50</td><td>Il microscopio è modulare e altamente configurabile per adattarsi a particolari esigenze di spazio.</td></tr><tr><td>Scapel chirurgico monouso</td><td>Integra Miltex</td><td>4-410</td><td>per praticare incisioni cutanee</td></tr><tr><td>Pinze per tessuti - 1 x 2 denti</td><td>Strumenti di scienza fine</td><td>11021-12</td><td>per sezionare senza mezzi termini i muscoli</td></tr><tr><td>Dumont #5 - Pinze con finitura a specchio</td><td>Strumenti di scienza fine</td><td>11252-23</td><td>per separare e preparare l'arteria carotide per l'iniezione</td></tr><tr><td>Forbici a molla</td><td>Strumenti di scienza fine</td><td>15025-10</td><td>per tagliare le suture</td></tr><tr><td>EZ Clip Kit</td><td>Stoelting</td><td>59020</td><td>per chiusura delle ferite</td></tr><tr><td>Siringa da insulina BD</td><td>Becton Dickinson</td><td>328438</td><td>per iniezione cellulare</td></tr><tr><td>IVIS Spectrum In Vivo Sistema di imaging</td><td>PerkinElmer</td><td>124262</td><td></td></tr></tbody></table>

intracarotidea cancer cell iniezione per produrre modelli murini di cervello metastasi

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Metastasi, la diffusione e la crescita di cellule maligne nei siti secondari all&#39;interno del corpo di un paziente, rappresenta&gt; 90% della mortalità per cancro. Recentemente, impressionanti progressi nelle nuove terapie hanno notevolmente prolungato la sopravvivenza e una migliore qualità della vita per molti malati di cancro. Purtroppo, l&#39;incidenza di recidive cerebrali metastatici sta rapidamente crescendo, e tutte le terapie attuali sono solo palliativi. Quindi, buoni modelli sperimentali animali sono urgentemente necessari per facilitare studi approfonditi della biologia della malattia e per valutare nuovi regimi terapeutici per la valutazione preclinica. Tuttavia, lo standard di test metastasi vivo tramite coda vena iniezione delle cellule tumorali produce prevalentemente lesioni metastatiche del polmone; animali in genere soccombono alla massa tumorale del polmone prima di qualsiasi conseguenza significativa delle metastasi cerebrali. Intracardiaca iniezione di cellule tumorali produce lesioni metastatiche a più siti di organi compreso il cervello; tuttavia, la variabilità della crescita tumorale prodotto con questo modello è grande, smorzando la sua utilità nella valutazione dell&#39;efficacia terapeutica. Per generare modelli animali affidabili e coerenti per lo studio metastasi cerebrali, qui si descrive una procedura sperimentale per la produzione di metastasi cerebrali in casa del mouse (Mus musculus) tramite iniezione intracarotidea delle cellule tumorali. Questo approccio permette di produrre gran numero di topi di metastasi cerebrali-cuscinetto con simili caratteristiche di crescita e di mortalità, facilitando in tal modo gli sforzi di ricerca per lo studio dei meccanismi biologici fondamentali e per valutare nuovi agenti terapeutici.

Ci sono due punti in cui la qualità di iniezione può essere valutata. La prima occasione è per l&#39;osservazione dell&#39;operatore di cambiare i colori dei vasi sanguigni durante l&#39;iniezione. Perdite da iniezioni poveri può essere facilmente osservata al microscopio da dissezione. Il posizionamento stabile e sicuro del corpo del mouse (Figura 1A) e la sua arteria carotidea (Figura 1B) sul batuffolo di cotone di supporto sono fattori critici per ini...

Cervello metastasi è diventato un bisogno medico non soddisfatto urgente come la sua incidenza è aumentata mentre le opzioni terapeutiche sono rimaste palliative. La creazione di modelli animali sperimentali di metastasi cerebrali tramite iniezione arteriosa intracarotidea delle cellule tumorali facilita gli studi meccanicistici della biologia della malattia e la valutazione dei regimi di intervento innovative.

Intracarotidea Cancer Cell iniezione per produrre modelli murini di cervello Metastasi

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

L'obiettivo generale di questa iniezione microchirurgica di cellule tumorali attraverso l'arteria carotide è quello di produrre modelli sperimentali di metastasi cerebrale in vivo nei topi in modo costante. Pertanto, questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo delle metastasi cerebrali, ad esempio se un nuovo trattamento possa dimostrare efficacia nel trattare le metastasi cerebrali. Il principale vantaggio di questa tecnica è che consente la produzione di metastasi cerebrale sperimentale in vivo con elevata riproducibilità e bassa variabilità.Generalmente, i principianti incontrano inizialmente delle difficoltà con questa tecnica, poiché è necessaria una certa pratica per mantenere una mano ferma durante l'iniezione delle cellule tumorali nell'arteria carotidea di questi topi al microscopio. Iniziare questa procedura seminando le cellule tumorali in un mezzo DMEM F12 integrato con il 10% di FPS e coltivandole per uno o due giorni prima dell'iniezione. Nel giorno dell'intervento chirurgico, rimuovere le cellule dall'incubatore e raccoglierle quando raggiungono una confluenza del 70%-80%, lavandole con un mezzo privo di siero.Successivamente, incubare

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Questo video dimostra l'impianto di cellule tumorali nel cervello del topo eseguendo l'iniezione intracranica.

Modello ortotopico intracranico: una procedura per impiantare cellule tumorali nel cervello di topo

Questo video dimostra la creazione di un modello murino di metastasi cerebrali mediante iniezione intracarotide di cellule tumorali marcate in modo fluorescente. Il modello murino può essere utilizzato per studiare gli effetti di nuove terapie e i meccanismi fisiologici sottostanti.

Modello murino di metastasi cerebrali: un metodo per generare un modello murino di metastasi cerebrali mediante iniezione intracarotide di cellule tumorali

Fonte: Lim, M., et al. Modellazione delle metastasi cerebrali mediante iniezione di cellule tumorali nell'arteria carotide interna. J. Vis. Exp. (2022)In questo video, un topo anestetizzato viene sottoposto a una procedura chirurgica in cui le cellule tumorali vengono iniettate nell'arteria carotide comune (CCA) per facilitare la consegna mirata al cervello. La procedura prevede la sutura e la manipolazione precise delle arterie carotidi per dirigere le cellule iniettate verso l'arteria...

Modellazione delle metastasi del tumore cerebrale tramite iniezione di cellule tumorali nell'arteria carotide interna

Un seno cancro al cervello metastasi modello del mouse viene stabilito con ecografia guidata iniezione intracardiaca delle cellule MDA-MB231/Br-GFP. Sviluppo delle metastasi intracraniche multifocali è stato monitorato longitudinalmente utilizzando ad alta risoluzione di 9.4 T MRI.

Ultrasound Imaging guidata intracardiaca iniezione di sviluppare un modello murino di Breast Cancer metastasi cerebrali Seguito da longitudinale MRI

La modellazione della metastasi cerebrale intracraniciale è complicata dall'incapacità di monitorare le dimensioni del tumore e la risposta al trattamento con metodi precisi e tempestivi. La metodologia presentata accoppia l'iniezione di tumore intracranico con l'analisi della risonanza magnetica, che se combinata, coltiva iniezioni precise e coerenti, un monitoraggio degli animali migliorato e misurazioni accurate del volume tumorale.

Modellazione delle metastasi cerebrali attraverso l'iniezione intracraniciale e la risonanza magnetica

Descriviamo un modello murino di xenotrapianto di metastasi cerebrali di cancro al seno generate tramite iniezione di vena della coda di una linea cellulare di carcinoma mammario infiammatorio amplificata endogenamente da HER2.

Modellazione delle metastasi cerebrali tramite iniezione di vena della coda di cellule infiammatorie del cancro al seno

Le metastasi cerebrali sono una causa di grave morbilità e mortalità nei pazienti oncologici. La maggior parte dei modelli murini di metastasi cerebrali sono complicati da metastasi sistemiche che confondono l'analisi della mortalità e dei risultati dell'intervento terapeutico. Presentato qui è un protocollo per l'iniezione carotidea interna di cellule tumorali che produce tumori intracranici coerenti con tumori sistemici minimi.

Modellazione delle metastasi cerebrali mediante iniezione interna di cellule tumorali nell'arteria carotide

I tumori del sistema nervoso centrale (SNC) sono la principale causa di morte correlata al cancro nei bambini e le terapie locoregionali a base immunitaria vengono sempre più testate per i pazienti negli studi clinici. Questo protocollo descrive i metodi per l'impianto di cannule locoregionali nei topi per la valutazione preclinica di infusioni immunoterapeutiche mirate ai tumori del SNC.

Impianto di cannula intracranica per infusioni seriali di cellule T del recettore dell'antigene chimerico locoregionale (CAR) nei topi

La riparazione dell'arteria intracarotide in un modello murino dopo l'iniezione restituisce il flusso sanguigno all'arteria senza influire negativamente sulla distribuzione del materiale iniettato. La riparazione del sito di iniezione facilita le iniezioni successive attraverso la stessa arteria e previene l'ischemia cerebrale nei ceppi di topo privi di un Circle of Willis completo.

Facilitare la ripetizione delle iniezioni intracarotidei in modelli murini mediante una nuova tecnica di riparazione del sito di iniezione

Questo manoscritto fornisce la procedura dettagliata dell'iniezione intra-iliaca dell'arteria (IIA), una tecnica per fornire cellule tumorali specificamente ai tessuti degli arti posteriori, comprese le ossa, per stabilire metastasi ossee sperimentali. Sebbene inizialmente stabilito con modelli di tumore al seno, questo protocollo può essere facilmente esteso ad altri tipi di cancro.

Intra-iliaca iniezione per un efficiente e selettivo Modellazione di microscopico metastasi ossee

Scopri la tecnica di iniezione intracarotidea di cellule tumorali per creare modelli murini di metastasi cerebrale con alta riproducibilità. Questo metodo microchirurgico consente di valutare nuove terapie oncologiche in vivo.

Intracarotidea Cancer Cell iniezione per produrre modelli murini di cervello Metastasi

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