Name: Anestesia, chirurgia e metodo di raccolta per la valutazione delle viti transpedicolari utilizzando un In Vivo Modello della colonna vertebrale della deriva (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-31T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 7 s
Description: Impara la valutazione delle viti transpedicolari per la chirirgia ortopedica usando un modello in vivo della colonna vertebrale lombare suino. Questo metodo consente di confrontare la stabilità a lungo termine di diversi tipi di viti.

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Questo studio è stato sostenuto da una sovvenzione (CNUH-BRI-2012-02-005) finanziata dall&#39;Istituto di Ricerca Biomedica dell&#39;ospedale universitario di Chonbuk (CNUH-BRI), Repubblica di Corea.

Il comitato istituzionale per la cura e l&#39;uso degli animali della Chonbuk National University ha approvato questo studio. Il trattamento, l&#39;uso e la manipolazione degli animali hanno seguito tutte le linee guida e le politiche. Mantenere la sala operatoria a 24 ° C. 1. Anestesia <ol><li> Acclimatizzare i maiali in miniatura, di età compresa tra 12 mesi, nell&#39;unità sperimentale per almeno una settimana. Esegui un esame clinico che misura la frequenza respiratoria, il cuore e la temperatura corporea. Non alimentare ogni maiale in miniatura per 12 ore prima della procedura di anestesia. </li><li> Iniettare l&#39;atropina (0,05 mg / kg) e il ketamina (20 mg / kg) / xilaxina (2 mg / kg) nella regione muscolare laterale del muscolo cervicale, dietro l&#39;orecchio, per la premedicazione. </li><li> Dopo la sedazione, applicare strettamente una fascia di gomma intorno alla base dell&#39;orecchio e pulire l&#39;orecchio con l&#39;alcool attivo. </li><li> Posizionare un catetere plastico sopra l&#39;ago nella vena dell&#39;orecchio e rimuovere la fascia di gomma. Verificare che il catetere sia posizionato correttamente. InfluenzaIl catetere con salina eparinizzata e fissare con nastro. </li><li> Per l&#39;intubazione endotracheale, posizionare il maiale in miniatura nella ricostruzione sternale. Con l&#39;aiuto di un assistente, tenere la mascella del maiale con una fionda adatta e aprire la bocca. <ol><li> Passare la punta del laringoscopio nella cavità faringea per spostare l&#39;epiglotta dal palato morbido. Utilizzare la punta della lama del laringoscopio per rendere visibili i cavi vocali e far avanzare il tubo endotracheale nella trachea durante la scadenza. </li><li> Sentitevi per un libero passaggio di aria per una corretta intubazione e controllate l&#39;auscultazione del petto per i suoni della respirazione nei lati sinistro e destro del maiale in miniatura. </li></ol></li><li> Riempire il bracciale con un adeguato volume d&#39;aria del tubo endotracheale in aria utilizzando una siringa da 10 ml e fissare il tubo al muso utilizzando nastro adesivo. </li><li> Fornire una concentrazione del 2,0% di isoflurano, un anestetico per inalazione per anestesia prolungata, attraverso l&#39;endotrTubo di intubazione acheal. Testare i riflessi corneali e palpebrali per confermare l&#39;anestetizzazione e utilizzare unguento sugli occhi per prevenire la secchezza. </li><li> Monitorare il sistema cardiovascolare, il sistema respiratorio e la temperatura corporea durante l&#39;anestesia almeno ogni 5 minuti fino a quando il maiale in miniatura recupera. </li><li> 30 minuti prima della chirurgia della colonna vertebrale, applicare lentamente 30 mg / kg di cefazolina IV, la prima generazione di antibiotici di cefalosporina. </li><li> Amministrare 5-10 ml / kg / h di salina calda (37 ° C) usando una linea IV per mantenere l&#39;omeostasi e fornire 50 μg / kg / min di fentanile per controllare il dolore. </li><li> Dopo la chirurgia della spina, eseguire l&#39;estubazione quando è evidente un forte riflesso di deglutizione. </li><li> Prendi il maiale in miniatura in una stanza e in un monitor fino a ricuperare l&#39;anestesia. Fornire cibo e acqua quando il maiale in miniatura è pienamente consapevole. </li><li> Applicare 3 mg / kg di antibiotico enrofloxacin con 4,4 mg / kg carprofen al giorno per il controllo del dolore durante i primi 3 giorni. </li><li> MoniIl maiale al giorno fino alla rimozione delle suture. </li></ol> 2. Chirurgia della colonna vertebrale <ol><li> Autoclave le viti transpedicolari e i sistemi di fissaggio posteriori per la sterilizzazione, seguendo le linee guida del produttore. </li><li> Rasare la parte posteriore del maiale in miniatura, circa 10 cm dal centro verso sinistra o verso destra, utilizzando un rasoio mentre il maiale è in posizione supina. Pulire la pelle con soluzione povidone-iodio e alcool al 70%. </li><li> Fai un&#39;incisione mediana longitudinale dal secondo processo spinoso della colonna lombare alla prima cresta sacrale mediana usando un bisturi. Dissect attraverso il tessuto sottocutaneo e fascia alla punta dei processi spinosi. </li><li> Elevate i muscoli paraspinalini sottoperialmente dalla lamina sottostante usando un ascensore Cobb. Dissect lungo il processo spinoso e lamina limitata ai giunti del facet. </li><li> Aprire la corteccia superficiale del punto di entrata (che è appena inferiore al processo mammillario da L3A L5 su entrambi i lati) con una burr o un rongeur. </li><li> Inserire il perno di guida in un luogo aperto, parallelo alla lastra superiore e ad un angolo di 20 ° rispetto al processo spinoso. Definire il punto di partenza ideale utilizzando i bracci a C oi raggi X postero-anteriori / laterali portatili. </li><li> Inserire una sonda a pedale fino a 25 mm secondo il raggio X. Confermare la traiettoria intraossea completa dalla peduncolo e dalla palpazione del corpo usando un dispositivo di suonatura pedicle. </li><li> Inserire sei viti di peduncolo nel pedone preparato da L3 a L5 finché la testa della vite non è ben posizionata. Puntare l&#39;apertura laterale della testa dell&#39;impianto nella direzione desiderata e allineare la posizione orizzontale con la traiettoria dell&#39;asta. </li><li> Inserire rispettivamente due bacchette su entrambi i lati delle teste a vite. Inserire il manicotto e il dado alla testa della vite di pedice utilizzando una maniglia universale. </li><li> Serrare a fondo il dado con una chiave a filo diritto e stringere saldamente il dado utilizzando una chiave a contatore torcente. </li><li> Confermare le posizioni oLe viti a pedale che utilizzano raggi X posteriori postero-anteriori / laterali. NOTA: attendere che il maiale in miniatura si svegli e controllare i pattern di andatura e la funzione motore dell&#39;arto posteriore per determinare se una vite è stata impigliata male. </li><li> Irrigare il sito di chirurgia con 3 L di salina normale utilizzando una siringa per irrigazione a bulbo con aspirazione. </li><li> Mettere un drenante in silicone nel sito di chirurgia e togliere la punta del silicone. Chiudere i muscoli paraspinal e sottocutanei utilizzando 1,0 suture assorbibili metriche. Chiudere la pelle con suture di nylon non assorbibili di 2,0 metri. </li><li> Disinfettare il sito di sutura con povidone-iodio e applicare una medicazione usando la garza sterilizzata e il nastro. </li></ol> 3. Procedura di raccolta <ol><li> A 12 settimane dopo l&#39;intervento, iniettare xilazina (2 mg / kg) e ketamina (10 mg / kg) nella regione muscolare laterale del muscolo cervicale, dietro l&#39;orecchio, per la premedicazione. </li><li> Dopo la sedazione, somministrare 15 mg / kg di KCl direttamente nella vena dell&#39;orecchioCatetere per l&#39;eutanasia. </li><li> Effettuare un&#39;incisione midline longitudinale alla precedente lesione della cicatrice. Disseccare i tessuti molli e i muscoli paraspinal. </li><li> Esponete il processo spinoso delle spine lombari, delle lamelle, delle aste, dei dadi e dei processi trasversali da L3 a L5. </li><li> Rimuovere i dadi usando una chiave e tiranti di coppia. Tagliare lo spazio del disco L2-3 e lo spazio del disco L5-S1 utilizzando una sega oscillante. </li><li> Disseccare entrambi i lati della parte centrale e anteriore della colonna vertebrale L3-5 con un&#39;aspirazione Cobb e una pinza a torre. Dopo la raccolta, se la colonna vertebrale non può essere testata immediatamente, avvolgerla in garza imbevuta di soluzione salina e conservare a -20 ° C. </li></ol>

<ol><li>Greenfield, R. T., Grant, R. E., Bryant, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pedicle+screw+fixation+in+the+management+of+unstable+thoracolumbar+spine+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Orthop+Rev%22%5BJournal%5D)">Pedicle screw fixation in the management of unstable thoracolumbar spine injuries.</a> Orthop Rev. 21 (6), 701-706 (1992).</li>
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<li>Giavaresi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+preclinical+evaluation+of+the+influence+of+osteoporosis+on+the+anchorage+of+different+pedicle+screw+designs%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">In vivo preclinical evaluation of the influence of osteoporosis on the anchorage of different pedicle screw designs.</a> Eur Spine J. 20 (8), 1289-1296 (2011).</li>
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</ol>

Gli autori non hanno nulla a che fare con questo documento per rivelare.

La valutazione delle viti transpedicolari nella colonna vertebrale richiede molto tempo e fatica. In primo luogo, il maiale in miniatura è un grande animale. Per la cura degli animali e l&#39;anestesia, il ricercatore necessita di un protocollo specializzato. In secondo luogo, la chirurgia dovrebbe mantenere un ambiente simile a quello della chirurgia umana. Lo scopo di valutare le viti di peduncolo nella colonna vertebrale è quello di sviluppare una vite efficiente applicabile agli esseri umani. In terzo luogo, la valu...

La fissazione a vite transpeduncolare è un trattamento gold standard per la colonna lombare degenerativa e la frattura da scoppio, perché coinvolge tre colonne della colonna vertebrale e raggiunge la stabilizzazione1,2. Tuttavia, la maggior parte dei pazienti che si sottopongono a tale intervento chirurgico hanno anche l'osteoporosi3,4. Molti studi hanno valutato la forza di fissazione e lo stato di osteointegrazione delle viti transpeduncolari, perché l'allentamento delle viti peduncolari attualmente in uso è stato riportato in pazienti con osteoporosi5,6.
La spina dorsale suina è simile alla spina dorsale umana in termini di dimensioni. È meno costoso rispetto a un modello di primate7. Inoltre, uno studio meccanico in vivo ha dimostrato che la spina dorsale suina quadrupede è essenzialmente caricata allo stesso modo di quella della colonna vertebrale umana8, motivo per cui molti ricercatori utilizzano le spine suine per studi sulla prevenzione dell'allentamento della vite peduncolare. Tuttavia, ci vogliono diversi mesi per studiare le viti peduncolari nella colonna vertebrale suina perché identificare la stabilità a lungo termine delle viti peduncolari richiede tempo. Per confrontare diversi tipi di viti nel corpo vertebrale, è necessario inserire le viti in posizioni simili. Pertanto, i ricercatori dovrebbero conoscere bene le tecniche di anestesia adeguate, i protocolli chirurgici standardizzati e le procedure di prelievo prima di eseguire qualsiasi esperimento. Qui, descriviamo un metodo dettagliato per l'anestesia, la chirurgia e il prelievo per la valutazione della fissazione della vite peduncolare utilizzando un modello di colonna vertebrale suina, inclusi imaging ex vivo, istologia e test di resistenza.

<table><tbody><tr><td>Maiale in miniatura</td><td>OrientBio</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Jeil farmaceutico</td><td>A04900241</td><td>Anestesia</td></tr><tr><td>sopra l'ago catetere di plastica</td><td>BD</td><td>REF382412</td><td>Manutenzione della linea IV</td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Yuhan</td><td>A04502441</td><td>Anestesia</td></tr><tr><td>xilazina</td><td>Bayer Corea</td><td></td><td>A00800071 Anestesia</td></tr><tr><td>Laringoscopio</td><td>Karl storz</td><td></td><td>Intubazione</td></tr><tr><td>Tubo endotracheale</td><td>Covidien</td><td></td><td>Intubazione</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>JW farmaceutico Co</td><td>A02104781</td><td>Anestesia</td></tr><tr><td>Unguento oculare</td><td>Hanlim pharma</td><td>A37851721</td><td>Protezione dell'occhio di maiale</td></tr><tr><td>Cefazolina</td><td>Donga pharma</td><td>A01503951</td><td>Antibiotici</td></tr><tr><td>Soluzione salina</td><td>JW pharmaceutical Co</td> A02151392 <td>Mantenimento dell'omeostasi</td><td></td></tr><tr><td>fluida Fentanyl</td><td>Hana pharm</td><td>C03200032</td><td>Controllo del dolore</td></tr><tr><td>Enrofloxacina</td><td>Bayer</td><td>93106-60-6&nbsp;</td><td>antibiotici</td></tr><tr><td>Morfina</td><td>Myungmoon pharma</td><td>C03700091</td><td>Controllo del dolore</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>A07600711</td><td>Antibiotici</td></tr><tr><td>Povidone-iodio</td><td>Hyundai pharma</td><td></td><td>Medicazione per ferite</td></tr><tr><td>Lama del bisturi misura 15</td><td>Braun</td><td>&nbsp; I1 BB515</td><td>Incisione cutanea</td></tr><tr><td>Cobb elevator</td><td>Codman</td><td>65-2546</td><td>Dissezione del muscolo</td></tr><tr><td>Burr</td><td>Medtronic</td><td></td><td>Realizzazione del punto di partenza della vite</td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Aesculap</td><td>FO515R</td><td>Realizzazione del punto di partenza della vite</td></tr><tr><td>Perno guida (K-wire)</td><td>CE</td><td>01067803</td><td>Guida della traiettoria della vite</td></tr><tr><td>C-arm</td><td>GE</td><td>OEC 9800 plus</td><td>Guida della traiettoria della vite</td></tr><tr><td>Radiografia portatile</td><td>Siemens</td><td>Mobile XP hybrid</td><td>Guida della traiettoria della vite</td></tr><tr><td>Sonda peduncolare</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-02-01</td><td>Guida della traiettoria della vite</td></tr><tr><td>Dispositivo di sondaggio peduncolare</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-03-01</td><td>Guida della traiettoria della vite</td></tr><tr><td>Vite peduncolare</td><td>OtisBiotech</td><td>MS-40025</td><td></td></tr><tr><td>Sistemi di fissaggio posteriore</td><td>OtisBiotech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rod&nbsp;</td><td>OtisBiotech</td><td>ROD-60140</td><td>Fissaggio rigido tra le viti</td></tr><tr><td>Impugnatura universale</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-08-01</td><td>Per fissare le viti all'asta</td></tr><tr><td>Chiave a bussola diritta</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-06-01</td><td>Per fissare le viti alla</td></tr><tr><td>chiave dinamometrica per conta</td> aste <td>OtisBiotech</td><td>SPI-07-01</td><td>Per fissare le viti all'asta</td></tr><tr><td>Siringa per irrigazione a bulbo</td><td>Hyupsug medical</td><td>HS-IR-140</td><td>Irrigazione</td></tr><tr><td>Drenaggio in silicone</td><td>Sewon medical</td><td>2205-006</td><td>Per drenare il fluido nel sito chirurgico</td></tr><tr><td>Sutura riassorbibile metrica 3.0</td><td>Ethicon</td><td>BA1673H</td><td>Sutura muscolare Sutura</td></tr><tr><td>in nylon non assorbibile metrica 2.0</td><td>Ethicon</td><td>W1626T</td><td>Sutura cutanea</td></tr><tr><td>Garza</td><td>Kingphar Corea</td><td>KP120-06</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital</td><td>Hanlim pharma</td><td>645301221</td><td>Eutanasia</td></tr><tr><td>Sega oscillante</td><td>Zimmer</td><td></td><td>Harvest spine</td></tr> Tower <tr><td>pinze</td><td>Aesculap</td><td>BF461R</td><td>Harvest spine</td></tr></tbody></table>

anestesia, chirurgia e metodo di raccolta per la valutazione delle viti transpedicolari utilizzando un<em&gt; in vivo</em&gt; modello della colonna vertebrale della deriva

An Anesthesia, Surgery, and Harvest Method for the Evaluation of Transpedicular Screws Using an In Vivo Porcine Lumbar Spine Model

La fissazione a vite a pedicella è il gold standard per il trattamento delle malattie spinali. Tuttavia, molti studi hanno riportato la questione dell&#39;allentamento delle viti di peduncolo dopo la chirurgia spinale, che è una preoccupazione grave. Per risolvere questo problema, sono stati esaminati diversi tipi di viti di peduncolo per identificare quelli con buona forza di fissazione e osseointegrazione nell&#39;osso della colonna vertebrale. La colonna vertebrale è una buona alternativa per la colonna vertebrale umana nella valutazione delle viti peduncolari a causa della dimensione anatomica, delle caratteristiche meccaniche e dei costi. Sebbene diversi studi abbiano riportato che le viti di peduncolo sono efficaci nel modello della suina, nessuno studio ha descritto protocolli dettagliati per la valutazione di una vite a peduncolo usando il modello porcino. Qui descriviamo un metodo dettagliato per valutare le viti transpedicolari usando un modello di colonna vertebrale lombare in vivo . I dettagli tecnici per l&#39;anestesia, la chirurgia della colonna vertebrale e il raccolto forniti qui faciliteranno con la valutazione del tModello di fissaggio a vite ranspedrici.

Qui viene descritto un protocollo dettagliato per l&#39;anestesia, la chirurgia e il raccolto per la valutazione delle viti transpedicolari utilizzando un modello di colonna vertebrale lombare in vivo . Questo protocollo è adatto a numerose analisi a valle, inclusi i test meccanici ( Figura 1 ), la valutazione micro-CT quantitativa ( Figura 2 ) e l&#39;istologia ( Figura 3 ). La prova meccanica rappresentativa ( figura 1...

Qui introduciamo un metodo per valutare le viti transpediciche utilizzando un modello di colonna vertebrale lombare in vivo .

Anestesia, chirurgia e metodo di raccolta per la valutazione delle viti transpedicolari utilizzando un<em&gt; In Vivo</em&gt; Modello della colonna vertebrale della deriva

Pedicle screw fixation is the gold standard for the treatment of spinal diseases. However, many studies have reported the issue of loosening pedicle ...

L'obiettivo generale di questo intervento chirurgico è valutare le viti transpeduncolari utilizzando un modello in vivo della colonna lombare su suino. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali riguardo complicanze della colonna vertebrale, come il allentamento della vite peduncolare. Il principale vantaggio di questa tecnica è che consente di confrontare la stabilità a lungo termine di diversi tipi di viti. Mantenere i suini nani di 12 mesi nell'unità sperimentale per almeno una settimana. Dopo questo periodo di ambientamento, sottoporre ogni suino a un esame clinico, misurare la frequenza respiratoria, la frequenza cardiaca e la temperatura corporea. Prima dell'anestesia, privare i suini dell'alimentazione per 12 ore.Per sedare un maiale, iniettare atropina nella regione muscolare cervicale laterale dietro l'orecchio. Una volta sedato, premere una mano alla base dell'orecchio e quindi pulire l'orecchio con alcol. Successivamente, inserire un catetere in plastica con ago nell'arteria auricolare.Quindi, sciacquare il catetere con soluzione salina eparinizzata e fissarlo con del nastro adesivo. A questo punto, indurre l'anestesia somministrando chetamina e xilazina attraverso il catetere. Per intubare il maiale, posizionarlo in decubito sterno.E, con l'aiuto di un assistente, tenere aperta la mascella utilizzando un'adeguata cinghia. Successivamente, inserire la punta del laringoscopio nella cavità faringea per spostare l'epiglottide dal palato molle. Una volta intubato, ascoltare la respirazione in entrambi i polmoni.Quindi, riempire la cuffia del tubo endotracheale con aria utilizzando una siringa da 10 millilitri e fissare il tubo al muso con del nastro adesivo. Successivamente, iniziare a somministrare il 2% di isoflurano attraverso il tubo. Poi, verificare i riflessi corneale e palpebrale del suino per confermare un piano chirurgico di anestesia.Ora, applicare un unguento sugli occhi e impostare i monitor dei segni vitali, che devono essere controllati almeno ogni cinque minuti. 30 minuti prima dell'intervento chirurgico, somministrare una dose di cefazolina attraverso il catetere nella vena auricolare. Successivamente, passare alla linea endovenosa per somministrare soluzione salina a 37 gradi Celsius e fentanil per la gestione del dolore.Per iniziare, rasare la schiena del maiale per 10 centimetri su entrambi i lati della linea mediana. Successivamente, pulire la pelle alternando lavaggi con soluzione di iodopovidone ed etanolo al 70%. Ora, effettuare un'incisione longitudinale lungo la linea mediana, dal secondo processo spinoso della colonna lombare fino al primo processo sacrale mediano.Quindi, dissezionare attraverso il tessuto sottocutaneo e la fascia fino alla punta dei processi spinosi. Successivamente, utilizzando un sollevatore di Cobb, sollevare i muscoli paravertebrali subperiostalmente dalla lamina sottostante. Quindi, dissezionare lungo il processo spinoso e la lamina a livello delle articolazioni facetarie.All'ingresso, appena inferiore al processo mamillo dal L3 al L5, utilizzare una frese o un rongeur per aprire la corticale superficiale. Inserire quindi la penna guida in parallelo alla piastra terminale superiore e con un angolo di 20 gradi rispetto al processo spinoso. A questo punto, eseguire radiografie in proiezione antero-posteriore laterale per definire i punti di inserzione delle viti peduncolari.Quindi, inserire una sonda peduncolare fino a 25 millimetri e confermare una traiettoria intraossea completa utilizzando il dispositivo di sondaggio e la palpazione. Ora, inserire sei viti peduncolari. Assicurarsi che le teste delle viti siano correttamente alloggiate.Prestare attenzione all'orientamento dell'apertura del sito e alla posizione orizzontale, che deve essere allineata con la barra. Inserire quindi due barre su entrambi i lati delle teste delle viti peduncolari. Successivamente, fissare manicotti e dadi sulla testa della vite.Prima serrare leggermente i dadi con una chiave dinamometrica dritta, quindi avvitarli con una chiave dinamometrica a coppia contrapposta. Successivamente, verificare la posizione delle viti peduncolari mediante raggi X. Una volta che il sito è pronto per la chiusura, irrorarlo con tre litri di soluzione fisiologica normale.Quindi, applicare un drenaggio in silicone ed estrarre la punta in silicone. Ora, chiudere i muscoli paraspinali e i tessuti sottocutanei utilizzando punti di sutura riassorbibili, quindi chiudere la cute con punti di sutura in nylon non riassorbibili. Dopo la sutura, disinfettare la sede con iodopovidone e applicare una medicazione.Una volta che un riflesso di deglutizione forte è evidente, estubare il suino e trasferirlo in una stanza di recupero. Una volta completamente cosciente, fornire al suino cibo e acqua e controllare i suoi schemi di deambulazione. Monitorare il movimento degli arti posteriori per valutare l'impianto e somministrare analgesici per tre giorni.12 settimane dopo l'implantazione, eutanasiare il suino. Per prelevare una sezione spinale, eseguire un'incisione longitudinale mediana a livello della cicatrice dell'intervento chirurgico precedente. Quindi, dissezionare i tessuti molli e i muscoli paravertebrali per esporre completamente l'impianto da L3 a L5. A questo punto, rimuovere i dadi utilizzando una chiave dinamometrica controrotante.E quindi rimuovere le aste. Successivamente, utilizzando una sega oscillante, tagliare lo spazio del disco L2-3 e lo spazio del disco L5-S1. Poi, dissezionare entrambi i siti nella parte mediale e anteriore della colonna L3-5 con un sollevatore Cobb e pinze a torretta.Se la sezione spinale non può essere analizzata immediatamente, conservarla in garza inzuppata di soluzione salina a meno 20 gradi Celsius. La resistenza dell'adesione tra le viti peduncolari e l'osso è stata valutata per tre tipi di viti: non rivestite, rivestite con idrossiapatite e rivestite con titanio.Il picco massimo di coppia torsionale durante l'estrazione, ovvero la resistenza del legame, è risultato maggiore con le viti peduncolari rivestite in titanio. La regione di interesse può essere valutata mediante un programma di micro-TC per l'analisi della frazione di volume osseo, della densità della superficie ossea e della superficie ossea specifica. L'analisi di una sezione spinale con la colorazione tricromatica di Goldner mostra l'interfaccia tra la vite peduncolare e l'osso.Il tessuto fibroso è rosso, mentre l'osso è blu. Quando si utilizzavano viti peduncolari non rivestite, al limite di interfaccia si osservava soltanto tessuto fibroso. Tuttavia, per entrambi i tipi di viti rivestite, si riscontrava la formazione di nuovo osso all'interfaccia.È stato persino osservato che con viti peduncolari rivestite in titanio, lo spazio tra i filetti della vite e l'osso era completamente compattato. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in tre ore se realizzata correttamente. Durante il tentativo di questa procedura, è fondamentale concentrarsi sul corretto posizionamento delle viti peduncolari per prevenire un errato posizionamento del peduncolo.Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della chirurgia della colonna vertebrale per studiare il allentamento delle viti peduncolari nei pazienti con osteoporosi.

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In questo video, descriviamo la procedura chirurgica per indurre l'instabilità della colonna lombare in un modello murino resecando il processo spinoso lombare da L3 a L5 insieme ai legamenti sopraspinosi e interspinosi.

Induzione chirurgica dell'instabilità della colonna lombare nel modello murino: una procedura chirurgica per la resezione dei processi spinosi lombari e dei legamenti collegati in modello murino

Questo protocollo descrive l'impianto di una finestra di vetro sul midollo spinale del mouse per facilitare la visualizzazione mediante microscopia intravitale.

Laminectomia e impianto della finestra del cavo spinale nel mouse

Il protocollo descrive un nuovo modello murino in vivo di infezione da impianto spinale in cui un impianto k-wire in acciaio inossidabile è infettato da Staphylococcus aureus Xen36 bioluminescente. La carica batterica viene monitorata longitudinalmente con imaging bioluminescente e confermata con la conta delle unità formanti colonie dopo l'eutanasia.

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Abbiamo sviluppato un modello di topo di degenerazione del disco intervertebrale lombare per resezione dei processispinosiL 3 –L5 insieme a legamenti sovra- e inter-spinosi e distacco di muscoli paraspinosi.

Un modello di topo di instabilità della colonna lombare

La microcircolazione del midollo spinale svolge un ruolo fondamentale nella lesione del midollo spinale. La maggior parte dei metodi non consente la valutazione in tempo reale della microcircolazione del midollo spinale, che è essenziale per lo sviluppo di terapie mirate alla microcircolazione. Qui, proponiamo un protocollo che utilizza sonde Laser-Doppler-Flow Needle in un modello animale di ischemia/ riperfusione di grandi dimensioni.

Valutazione in tempo reale della microperfusione del midollo spinale in un modello suino di ischemia/riperfusione

Il display montato sulla testa di realtà aumentata, Magic Leap, è stato utilizzato in combinazione con un sistema di navigazione convenzionale per posizionare viti peduncolari in un modello suino aderendo a un nuovo flusso di lavoro. Con un tempo di inserimento mediano di &lt;2,5 min, sono state raggiunte un'accuratezza tecnica submillimetrica e un'accuratezza clinica del 100% secondo Gertzbein.

Posizionamento della vite peduncolare utilizzando un display montato sulla testa a realtà aumentata in un modello suino

In questo protocollo, vengono descritti due approcci per rendere più praticabili i test di compressione uniassiale delle vertebre lombari dei topi. Innanzitutto, viene descritta la conversione di una piegatrice a tre punti in una macchina per prove di compressione. In secondo luogo, un metodo di inclusione per preparare la superficie di carico che utilizza cemento osseo è adattato per le vertebre lombari dei topi.

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Determinare l'attecchimento delle cellule del donatore rappresenta una sfida in modelli di trapianto di midollo osseo di topo che non hanno ben definiti marcatori fenotipici. Abbiamo descritto una metodologia per quantificare maschio attecchimento delle cellule del donatore nel topo femmina riceventi di trapianto. Questo metodo può essere utilizzato in tutti i ceppi di topo per lo studio delle funzioni HSC.

Utilizzando quantitativa real-time PCR per la determinazione cellulare attecchimento dei donatori in un modello murino competitivo trapianto di midollo osseo

Questo articolo presenta un metodo rapido e semplice per l'amministrazione bleomicina direttamente nella trachea del mouse tramite intubazione. I principali vantaggi di questo metodo sono che è altamente riproducibile, facile da padroneggiare, e non richiede attrezzature specializzate o tempi di recupero lunghi.

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L'obiettivo del protocollo è di presentare una procedura ottimizzata per la creazione di un modello in vitro barriera ematomeningea (BBB) basato sulle cellule endoteliali cerebrali primari porcina (pBECs). Il modello mostra un'elevata riproducibilità, alta tenuta ed è adatto per studi di trasporto e traffico intracellulare nella scoperta della droga.

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Impara la valutazione delle viti transpedicolari per la chirirgia ortopedica usando un modello in vivo della colonna vertebrale lombare suino. Questo metodo consente di confrontare la stabilità a lungo termine di diversi tipi di viti.

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